乙型肝炎e抗原定量与HBV-DNA定量的关系及临床意义

周美英，周红波

(上饶市第二人民医院检验科,江西 上饶 334000)

乙型肝炎e抗原定量与HBV-DNA定量的关系及临床意义

周美英，周红波

(上饶市第二人民医院检验科,江西 上饶 334000)

乙型肝炎；HBeAg定量；HBV-DNA定量；时间分辨免疫荧光；荧光PCR

近年来随着抗病毒药物的大量使用，联合检测乙型肝炎患者乙型肝炎e抗原 (HBeAg)定量、HBV-DNA定量已成为乙型肝炎治疗过程中的重要指标，HBeAg定量采用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)是以铕(Eu)作为荧光标记物，具有测量灵敏度高、示踪物稳定、定量线性范围宽等优点，在抗病毒药物的选择、疗效观察、疗程确定上有重要意义[1]，现使用DR6608时间分辨荧光分析系统及美国应用生物系统中国公司ABI－7300荧光定量PCR检测仪对579份标本进行同时检测，对结果进行分析报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 597例标本均为本院门诊部及住院部的乙肝患者，其中男463例，女134例，年龄19～67岁，平均45岁，诊断符合中华医学会感染学分会、中华医学会肝病学分会2010年联合制订的《中国慢性乙型肝炎防治指南》。清晨空腹静脉抽血5ml，待血液自然凝固后2500r/min离心15min分离血清。

1.2 试剂与方法 ⑴HBeAg定量采用DR6608时间分辨免疫荧光(TRFIA)分析，试剂由广州达安基因技术有限公司提供。(2)HBV-DNA采用荧光定量聚合酶链反应进行测定，试剂由广州达安基因技术有限公司提供。⑶结果判读：HBeAg定量>1.0S/CO为阳性，HBV-DNA定量>100IU/ml判断为HBV DNA阳性。均严格按试剂说明书操作。

1.3 主要仪器 DR6608时间分辨荧光免疫分析仪,DEM-3型全自动洗板机,KG-201C微量振荡仪，美国应用生物系统中国公司ABI－7300荧光定量PCR检测仪。

1.4 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件分析，计数资料比较用χ2检验，计量资料采用配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBeAg定量与HBV-DNA定量关系 201例HBeAg阳性患者中HBV-DNA阳性195例，阳性相符率为97.01%，HBeAg阳性患者HBV-DNA阳性率显著大于HBeAg阴性者(P＜0.05)差异有统计学意义,见表1

2.2 HBeAg定量值与HBV-DNA定量拷贝值关系HBV DNA定量值在105～108IU/ml时，HBeAg定量值与HBV-DNA定量值呈现正相关(r=0.865)，见表2。

3 讨论

临床资料显示，HBV病毒复制活跃的慢性肝病发生疾病进展的危险性较高，高滴度病毒血症与肝硬化或肝癌相关[2]。HBV复制水平对判断患者预后有重要意义，联合检测血清HBeAg定量和HBV-DNA含量可直接了解乙肝患者体内HBV复制活跃程度，在抗HBV治疗时有重要意义。

HBV感染人体后，血清中出现大量的HBV Dane颗粒，完整的病毒颗粒含有外衣壳抗原和内衣壳抗原，前者包括HbsAg前S1抗原和S2抗原，后者包括HBeAg、HbcAg。 传统方法检测的HBV血清标志物 (HBV-M)俗称 “两对半”检测的是HBeAg定性试验，随着临床检验科学的发展，HBeAg定量检测已经在临床中广泛开展，用具体的数值反映患者血液中的HBeAg浓度值。“大三阳”患者定期检测HBeAg定量具有重要的临床意义：(1)HBeAg定量值的高低与HBV-DNA定量有良好的相关性，一般情况为HBeAg定量值越高说明患者体内乙肝病毒复制越活跃，传染性越强。(2)HBeAg定量检测可以判断慢性乙肝病毒携带者是否会发病，通过每4～6个月定期检测HBeAg定量，如果持续稳定地处于较高水平，一般情况是近期不会出现肝炎发作；如果HBeAg定量值有比较明显的下降，再结合转氨酶的变化，要警惕肝炎活动的可能。(3)HBeAg定量检测对抗病毒治疗时机的选择有参考价值。如果HBeAg定量数值较高，往往反映患者对乙肝病毒的免疫反应较弱，此时若转氨酶水平不高，在使用抗病毒药物时则疗效不佳。(4)HBeAg定量检测对于确定抗病毒药物的疗程和判断是否复发具有较大的临床意义。“大三阳”患者在抗病毒治疗期间，如果HBeAg定量和HBVDNA定量同步下降，表明抗病毒治疗有效；如果HBeAg定量值下降较快，但是HBV-DNA定量下降不明显，则预示患者体内大部分乙肝病毒在免疫清除和抗病毒药物的双重打击下已经发生了变异，变异病毒将更难治疗[3-6]。病毒变异患者使用干扰素治疗有效的情况下，停药后复发的概率较高，应密切复查HBeAg定量值和HBV-DNA定量值。

通常认为HBeAg阳性患者病毒复制活跃，传染性强，对比HBeAg与HBV-DNA的关系，一般认为两者水平一致。本次实验表明：201例HBeAg阳性患者中HBV-DNA阳性195例，两者阳性相符率为97.01%，乙型肝炎患者HBeAg定量阳性者HBV-DNA阳性率远高于HBeAg阴性者，差异有统计学意义 (P＜0.05)；HBeAg阳性患者依据HBVDNA定量值将病例分为5组，HBV-DNA定量≥105IU/ml时，HBeAg定量值明显高于HBV-DNA定量＜105IU/ml时的HBeAg定量值，差异有统计学意义(P＜0.05)，且当 HBV-DNA定量值在 105～108IU/ml时，HBeAg定量值与HBV-DNA定量值呈现正相关(r=0.865)，与黄松洁，林永志等报道相符[3]，证实乙型肝炎患者血清中存在HBeAg是病毒复制活跃的标志，同时也说明HBeAg定量比定性更能反映HBV复制状态。

因此，HBeAg定量检测在乙型肝炎的传染性，病毒复制水平判断及抗病毒治疗效果评价方面具有重要的临床意义，值得推广。

[1]孙华宝,温丽丽,鲁纯腾,等.定量检测 乙型肝炎患者血清HBeAg/HbeAb与HBV DNA之间相关性及临床意义[J].实验与检验医学，2008，26(5):525-526.

[2]黄肖利，马晓宁,等.乙肝病毒核酸荧光定量与乙肝免疫标志物定量检测及肝功能的相关性研究[J].实用医学杂志，2008，24(18)：3179-3181.

[3]黄松洁，林永志，HBeAg定量与HBV DNA定量的相关性及临床意义[J].检验医学与临床，2010，6(7)12：1236.

[4]中华医学会感染病学分会、肝病学分会.中国慢性乙型肝炎防治指南[J].中华肝脏病杂志，2010,12(10)：324-329.

[5]罗开忠,杨旭,苏先狮,等.应用时间分辨免疫荧光法检测乙型肝炎病毒标志物[J].中华肝脏病杂志，2003，11：569.

[6]Funk ML,Rosenberg D M lok,AS,Word-wide.Epidemiology of HBeAg-negative chronic hepatitis B and associated precore and core promoter Variants[J].J Viral Hepat,2002,9(7):52-61.

R446.62,R512.6+3

B

1674-1129(2012)04-0404-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.04.044

江西省上饶市科技计划项目(121C2D21)