高黏样品影响全自动生化分析仪加样量

席文华， 李泽文，刘汝胜

(1、丰城市人民医院，江西 丰城 331100；2、星子县中医院，江西 星子 332800；3、奉新县人民医院，江西 奉新330700)

高黏样品影响全自动生化分析仪加样量

席文华1， 李泽文2，刘汝胜3

(1、丰城市人民医院，江西 丰城 331100；2、星子县中医院，江西 星子 332800；3、奉新县人民医院，江西 奉新330700)

高黏样品；影响；全自动生化分析仪；加样量

高黏度血清常见于血浆黏度增高型之高血黏滞综合征[1]，如高脂血症、原发性巨球蛋白血症等。我们就高黏度血清对全自动生化分析仪加样量的影响进行了试验，将溴甲酚绿分别溶于不同浓度的甘油作为不同黏度的样品，测定KT6HB560全自动生化分析仪非反应试验的光密度，以探讨高黏度样品对全自动生化分析仪加样量的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器 KT6HB560全自动生化分析仪，H198103酸度计(上海精密仪器有限公司生产)，上海精科723PC紫外-可见分光光度计。

1.1.2 试剂及测试液 生理盐水，配制含溴甲酚绿均为0.6 mol/L的不同黏度的4组检测样品A、B、C、D，其含甘油分别为 0%、50%、80%、90%。

1.2 方法

1.2.1 对生化仪进行常规保养维护，使仪器处于良好的状态，每天用质控品测定，结果在控。

1.2.2 0.6mol/L溴甲酚绿溶液用生理盐水作30、60、120、240倍稀释，用 H198103酸度计，测得各稀释度溴甲酚绿溶液pH值为4.5～5.4之间。用723PC紫外-可见分光光度计测定各稀释度溴甲酚绿溶液光密度(OD)，测得第1峰值为612 nm，第2峰值为405 nm，以此确立检测波长。

1.2.3 用A、B、C、D四组溴甲酚绿溶液作样品，其含甘油分别为0%、50%、80%、90%，均测试3个加样量：6、12、24μl，生理盐水作试剂，加至 500μl，吸入量均为300μl，终点法10 min，主、副双波长全程测试。根据上述光密度测试结果及KT6HB560波长设置，选择主波长600 nm、副波长405 nm，光密度值为两波长光密度之差。重复测定10次，计算生化仪非反应试验变异系数。用积差法计算相关系数。用SPSS软件12.0进行分析。

2 结果

2.1 不同样品黏度不同加样量在KT6HB560非反应测试OD值结果，见表1。

表1显示，A组不含甘油，B组甘油含量低，两组样品黏度低；两组各加样量CV均较小，相同加样量光密度均值接近，B组光密度均值稍大是甘油所致；两组光密度均值与加样量之间的直线关系呈正相关，相关系数r均为0.980，单侧P<0.0005。C组甘油含量较高，样品黏度较高，加样量较少时(6μl)CV稍大，光密度均值为A组的94.9%；加样量较多时(12、24μl)CV较小，但光密度均值分别为A组的72.2%、46.7%；光密度均值与加样量之间呈较好的直线相关，r=0.9302，单侧0.0250.25。

表1 各加样量及样品黏度的非反应测试结果(n=10)

3 讨论

液体流过水平圆管时的黏度遵循Poiseuillie公式[1]，即 Q=πr4△P/8ηL，则生化仪加样量 V=Qt。从公式可以看出，生化仪加样量与样品黏度(η)成反比。表1的数据表明，当样品黏度增加到一定时，黏度相当于80%的甘油时，其影响加样量已显现，加样量已开始减少；黏度相当于90%的甘油时，加样量明显减少。且随黏度的增加，影响越大。

我们在工作中发现高脂血症[2]，因其血清黏度增加而影响全自动生化分析仪的吸样量。该患者血清在使用KT6HB560检测时，样品探针吸取血清后，生化仪异常停机并报警，清洗探针与传感器后，重复测定还是如此，这时探针黏有浓稠血清，就像血凝块，经查血清无凝固；试着将探针与传感器间的距离加大后再测，仪器运行好似正常，但测试结果很低，就像无反应测试；再次清洗探针和传感器，重做室内质控，结果在控，但该患者血清重测结果还是很低；最后该患者血清用生理盐水稀释成正常血清黏度后再测，仪器运行顺畅，测试反应正常。该患者血清总蛋白高达120g/L，球蛋白高达82g/L；显然上述异常是高黏度血清所引起。停机原因是高黏度血清黏在探针与传感器之间致其隔开而引起。将探针与传感器间的距离加大后，它们之间不再黏上高黏度血清后仪器能运行；但是，因高黏度血清，探针不能吸取血清致测不出结果。将患者血清稀释成正常黏度血清后，探针就能正常吸取血清，测试结果正常[3]。

血液黏度的升高与诸多因素有关[1]，如红细胞比积增高，红细胞变形性降低，红细胞聚集性增高，血浆蛋白增高，血脂增高等。血液黏度升高可能是上述某一原因的结果，也可能是几种因素共同作用所致。血清成份较甘油复杂，其中的蛋白质尤其是球蛋白的量和质的改变对白清黏稠度的影响会更大。尽管黏稠血清对全自动生化分析仪加样的影响要比单纯甘油复杂得多；但溴甲酚绿易溶于醇[4]，是常用的试剂且颜色稳定；甘油具黏稠特性，能与水任意比例混合；甘油与血清均为牛顿液体。尽管测试时甘油也有光密度，但甘油为无色澄明黏稠液体[5]，其光密度可以忽略不计。故溴甲酚绿溶于甘油作为高黏度样品代替黏稠血清在生化仪上作无反应测定有可比性。其检测结果亦能表明临床常见高黏稠血清对全自动生化分析仪加样量的影响。

综上所述，高黏度血清使全自动生化分析仪加样量减少，甚至严重减少，致测定结果明显减低，应引起足够重视。在使用KT6HB560全自动生化分析仪测定高脂血症样品或其他高黏度样品时，如出现测定结果不合理偏低，或生化仪异常停机并报警，应清洗探针与传感器，将患者血清稀释成正常血清黏度时再检测，就能测出真实结果。

[1]张 翼.实用血液流变学[M].广西师范大学出版社，2009:16-18.

[2]张新生,郭小春,朱宇椿,等.高脂血症与血液流变学相关性研究报告[J].实验与检验医学，2008,26(3)：345.

[3]杨继明.日立7180全自动生化分析仪使用过程中常见问题分析与处理[J].实验与检验医学，2011，29(6)：684.

[4]中国医药公司上海化学试剂采购供应站编.试剂手册[M].第3版.上海：上海科学技术出版社，2011:216.

[5]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京.化学工业出版社，2010:72-76.

R446.11+2

B

1674-1129(2012)05-0500-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.035