抗中性粒细胞胞浆抗体与狼疮性肾炎的相关性研究

张小莲,鲍 琳,崔江龙,徐 荣，谢 璟

(1、宜春市人民医院检验科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

抗中性粒细胞胞浆抗体与狼疮性肾炎的相关性研究

张小莲1,鲍 琳2,崔江龙1,徐 荣1，谢 璟1

(1、宜春市人民医院检验科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)对狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)诊断、病理分型和病情评估等方面的价值。方法采用间接免疫荧光法对42例无LN的SLE患者、36例LN患者和20例健康体检者的血清ANCA进行检测。对78例SLE患者的肾功能指标进行检测。将LN患者分为ANCA阳性和阴性组，无LN的SLE患者为正常对照，进行肾功能指标的检测与比较。结果LN患者和无LN的SLE患者的ANCA阳性率分别为55.6%(20/36)和7.1%(3/42)，差异有统计学意义(P<0.01)。ANCA阳性和阴性组的肾小球滤过率、严重血尿(镜检红细胞≥++/HP)和管型阳性率间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清ANCA可作为LN的辅助诊断指标，并与其肾功能损害程度有一定的相关性。ANCA阳性可能更易出现在ClassⅢ和Ⅳ型的LN当中。

抗中性粒细胞胞浆抗体；狼疮性肾炎

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种自身免疫性结缔组织病，可累及多个器官和系统，约50%患者会继发肾脏损害，称为狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)[1]。LN的病理机制非常复杂，其中免疫复合物介导的补体激活、白细胞浸润、炎症因子释放、组织增生、坏死以及新月体和肾小球瘢痕形成等过程极为重要，肾小球的损害程度大多与免疫复合物的沉积量相关[2]。一种中性粒细胞依赖、抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)相关的坏死性新月体性肾小球肾炎形成机制则很可能在部分免疫复合物缺乏(pauci-immune)的LN如ClassⅣ-S型中发挥着关键作用[2-4]。ANCA检测对于LN的诊断、病理分型和病情评估等方面的价值仍有待广泛深入研究[3-5]。本研究检测并分析了36例LN患者和42例无LN的SLE患者的血清ANCA，并对ANCA阳性和阴性LN患者的肾功能指标进行了比较，报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例资料 收集2008年1月至2012年3月间宜春市人民医院收治的LN患者36例，其中男4例，女32例，年龄34.4±8.5岁。无LN的SLE患者42例，男6例，女36例，年龄32.8±9.2岁。78例患者均符合国际临床协作组 (SLICC)新修订的分类诊断标准[6]。选取健康体检者20例做正常对照组，男3例，女17例，年龄35.2±6.7岁。

1.1.2 试剂和仪器 ANCA间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)检测试剂盒购自德国EUROIMMUN公司，包括甲醛固定的粒细胞、乙醇固定的粒细胞、HEp-2细胞和猴肝细胞4种基质组成的生物薄片，FITC标记羊抗人IgG等。ECLIPSE 80i荧光显微镜购自日本NIKON公司。

1.2 方法 SLE患者和健康体检者的ANCA检测严格按试剂说明书进行。阳性标本可能有胞浆型(cytoplasmic pattern,c-ANCA)、核周型(perinuclear pattern,p-ANCA)和非典型(atypical pattern,a-ANCA)三种表型。将LN患者分为ANCA阳性和阴性组，无LN的SLE患者为正常对照，进行肾功能指标的检测。留取24h尿做尿蛋白定量和肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)检测，留取晨尿做尿沉渣分析。

1.3 统计方法 采用SPSS 13.0统计软件统计分析，两组计量资料采用两独立样本t检验，两组计数资料采用四格表卡方检验或Fisher确切概率检验。P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ANCA检测 ANCA的检测结果显示，78例SLE患者中检出23例ANCA阳性，表型均为p-ANCA，未见c-ANCA或a-ANCA，20例健康体检者的ANCA检测均为阴性。两组样本阳性率间的差异有统计学意义 (P<0.01)。36例LN患者中，ANCA阳性的有20例，阳性率为55.6%，42例无LN的SLE患者中，ANCA阳性的只有3例，阳性率为7.1%。两组样本ANCA阳性率间的差异有统计学意义(P<0.01)。

2.2 肾功能指标检测 将36例LN患者分为ANCA阳性和阴性组。ANCA阳性LN患者和ANCA阴性LN患者及无LN的SLE患者的尿蛋白和GFR检测结果见表1，尿沉渣分析结果见表2。表1两独立样本t检验结果显示，与无LN的SLE患者相比，LN患者的尿蛋白水平显著升高，GFR显著降低(P<0.01)。ANCA阳性和阴性LN患者比较，尿蛋白水平间的差异无统计学意义(P>0.05)，但GFR间的差异有统计学意义 (P<0.01)。表2四格表Fisher确切概率检验结果显示，与无LN的SLE患者相比，LN患者的镜下血尿、严重血尿 (红细胞≥++/HP)和管型阳性率显著升高(P<0.01)。ANCA阳性和阴性LN患者比较，镜下血尿阳性率间的差异无统计学意义(P>0.05)，但严重血尿(红细胞≥++/HP)和管型阳性率间的差异有统计学意义 (P<0.05)。ANCA阳性LN患者的6例管型包括2例红细胞管型和4例颗粒管型。

表1 SLE患者的尿蛋白和GFR检测结果

表2 SLE患者的尿沉渣分析结果

3 讨论

SLE相关的自身抗体有很多，如抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)、ANCA和抗磷脂抗体等，大概约20%的SLE患者血清中可检出ANCA阳性，ANA的阳性率则超过90%，IIF中ANA很容易造成ANCA检测的假阳性[8]。EUROIMMUN公司的生物薄片使用HEp-2细胞和猴肝细胞作为对照，可以在很大程度上降低ANA可能造成的干扰。本研究中SLE的ANCA总阳性率为29.5%(23/78)，与叶荻庆等[7]报道的27.1%的阳性率较为接近。

ANCA检测对于LN的诊断价值仍存在一定的争议，Sen等认为ANCA阳性与SLE的器官损害间没有明显联系，而杨玉芹等认为血清ANCA检测可以作为LN诊断的参考指标[5,8]。本研究发现，36例LN患者的ANCA阳性率为55.6%，显著高于42例无LN的SLE患者7.1%的阳性率(P<0.01)，支持ANCA作为一种血清标记物用于辅助诊断LN。

本研究对无LN的SLE患者、ANCA阳性LN患者和ANCA阴性LN患者的肾功能指标进行了比较，结果显示，与ANCA阴性组相比，ANCA阳性组的GFR降低幅度更大，出现镜下严重血尿(镜检红细胞≥++/HP)和管型的比例也更高(P<0.05)。病理上，LN通常表现为系膜内(mesangial)、毛细血管内(endocapillary)和膜内(membranous)病变3种，其中以急性GFR降低和血尿为显著特征的主要是毛细血管内病变型，而依据LN分型标准，牵涉到毛细胞血管内病变的主要有ClassⅢ和Ⅳ型[2]。综上说明，ANCA与LN的肾功能损害程度有一定相关性，同时ANCA阳性可能更易出现在ClassⅢ和Ⅳ型的LN当中。

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R446.62，R593.24+2

A

1674-1129(2012)05-0439-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.007

宜春市科技局计划项目(编号:JXYC2012KSA013)

张小莲,女,1977年生,主要从事临床免疫学检验研究。