多肿瘤标志物蛋白芯片检测中铁蛋白在恶性肿瘤中的诊断价值

李 毅，许明芳，顾咸庆，汪广杰，杨宇馨，廖 玲，周 芊，王 东

(第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心，重庆 400042)

肿瘤标志物通常在健康人血浆和血清中含量甚微，而由于肿瘤细胞坏死、蛋白过表达和分泌等原因导致肿瘤患者血液中肿瘤标志物浓度升高，因此测定外周血中肿瘤标志物的浓度常常成为肿瘤筛查、诊断和预测疗效的一种方法[1]。多肿瘤标志物蛋白芯片是一种高通量、高敏感性、微型化的蛋白质分析技术,可同时检测多种常用的肿瘤标志物,有助于肿瘤的早期诊断和多种肿瘤的鉴别诊断[2-6]。铁蛋白是体内铁储存的主要形式，参与多种生理、病理过程，血清铁蛋白升高与肿瘤有关[7-8]。本文收集本院25 076例可供分析的多肿瘤标志物蛋白芯片检测结果，重点分析铁蛋白在恶性肿瘤患者、良性病变者和健康体检者中的阳性率及各种肿瘤中的分布情况，以及与其他指标的伴随情况，从循证医学角度为临床深入了解铁蛋白的诊断价值提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 本院自2003年12月至2011年7月完成多肿瘤标志物蛋白芯片检测共计38 600例，其中诊断不明确者4 229例，同一患者多检测的11 106例，可供分析者共计25 076例，其中男15 993例，女9 083例；年龄12～94岁，平均55.82岁；恶性肿瘤组(肿瘤组)11 485例，包括肺癌4 004例，结直肠癌1 178例，肝癌1 069例，食管癌785例，乳腺癌477例，胃癌375例，胰腺癌266例，卵巢癌208例，前列腺癌63例，子宫内膜癌78例及其他肿瘤2 982例；良性病变组(良性组)3 803例；健康体检组(健康组)9 788例。所有恶性肿瘤患者均经细胞学或组织学确诊。肿瘤组男7 226例，女4 259例；平均年龄55.86岁；良性组男2 248例，女1 555例；平均年龄55.91岁；健康组男6 519例，女3 269例；平均年龄55.73岁。3组患者性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2检测方法 试剂盒为浙江湖州数康生物科技有限公司生产的C12型肿瘤诊断用蛋白芯片试剂盒(简称C12)。抽取空腹静脉血2 mL，分离血清，应用HD2001A 生物芯片检测仪进行检测。12 种肿瘤标志物包括糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原153 (CA153)、糖类抗原242 (CA242)、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、前列腺特异性抗原(PSA)、游离型前列腺特异性抗原(fPSA)、生长激素(HGH)、铁蛋白及绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)。严格按说明书操作。正常参考值范围为:CA125<35 U/mL，CA19-9<35 U/mL，CA153<35 U/mL，CA242<20 U/mL，CEA<5 ng/mL，AFP<20 ng/mL，NSE<13 ng/mL，PSA<5 ng/mL，fPSA<1 ng/mL，HGH<7.5 ng/mL，铁蛋白小于219 ng/mL(女)、322 ng/mL(男)，β-HCG<3 ng/mL。高于正常参考值判定为阳性。

1.3统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行统计学处理，年龄采用t检验，其他资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1各组铁蛋白阳性率的比较 11 485例肿瘤组患者中，铁蛋白阳性患者有2 011例(17.5%)；3 803例良性组患者中，铁蛋白阳性患者有503例(14.3%)；健康组中，铁蛋白阳性者有50例(0.5%)。肿瘤组铁蛋白阳性率明显高于良性组及健康组(P<0.01)，良性组铁蛋白阳性率明显高于健康组(P<0.01)。见表1。

2.2各种类型肿瘤患者铁蛋白阳性率比较 在11 485例肿瘤患者中，铁蛋白阳性率最高为胰腺癌(28.9%)，其次为卵巢癌(28.4%)、肝癌(24.8%)、肺癌(20.2%)、前列腺癌(19.0%)、子宫内膜癌(17.9%)。乳腺癌、食管癌、肠癌、胃癌和其他类型肿瘤患者铁蛋白阳性率明显低于胰腺癌患者(P<0.01)。见表2。

表1 各组铁蛋白阳性率的比较[n(%)]

表2 各种类型肿瘤患者铁蛋白阳性率比较[n(%)]

2.3铁蛋白阳性肿瘤患者中其他肿瘤标志物检测结果 2 011例铁蛋白阳性肿瘤患者中，CA125伴随阳性率最高(46.2%)，其后依次为CEA(34.0%)、CA19-9(29.4%)，见表3。

2.4不同类型肿瘤患者中铁蛋白伴随CA125、CEA、CA19-9阳性情况 铁蛋白和CA125均为阳性最常见于卵巢癌(71.19%)和肝癌(63.02%),铁蛋白和CEA均为阳性最常见于肠癌(58.12%)和肺癌(47.28%),铁蛋白和CA19-9均为阳性最常见于胰腺癌(72.73%)和肝癌(61.13%)，见表4。

2.5铁蛋白与CA125、CEA、CA19-9联合检测阳性患者的比例 2 011例铁蛋白阳性肿瘤患者中，铁蛋白、CA125阳性311例(15.5%)，铁蛋白、CA125、CA19-9、CEA阳性271例(13.5%)，铁蛋白、CA125、CEA阳性271例(9.7%)，铁蛋白、CA125、CA199阳性151例(7.5%)，见表5。

表3 2 011例铁蛋白阳性肿瘤患者中其他肿瘤标志物伴随情况[n(%)]

表4 不同类型肿瘤患者中铁蛋白伴随CA125、CEA、CA19-9阳性情况[n(%)]

表5 铁蛋白与其他几项指标联合检测为阳性患者的分布[n(%)]

2.6不同类型肿瘤患者中铁蛋白与其他几项指标联合检测为阳性患者的分布 铁蛋白伴随CA125、CA19-9、CEA阳性患者最常见于胰腺癌，其次最见于肝癌，见表6。

表6 不同类型肿瘤患者中铁蛋白与其他几项指标联合检测为阳性患者的分布[n(%)]

3 讨 论

铁蛋白是1884年Schmiedeber发现的水溶性铁储存蛋白，1937年被Laufberger命名为铁蛋白。1965年Richter等从肿瘤细胞株中分离出铁蛋白，并发现铁蛋白存在于各种组织和体液中。铁蛋白具有两个亚基，轻型(L型)和重型(H型)，不同比例的亚基聚合形成不同的铁蛋白同工酶。在肿瘤中含H型亚基多的铁蛋白酸性同分异构体增高。血清铁蛋白增高可见于炎症、肝硬化以及各种恶性肿瘤，后一种情况更引起人们对血清铁蛋白的研究与重视。

由于游离铁可诱发氧化反应、DNA损伤，继而诱发肿瘤，当体内铁增加时，铁蛋白摄取铁，并将二价铁转化为三价铁贮存，故铁蛋白可保护脂质、DNA和蛋白免受铁毒性[8]，因而铁蛋白可作为肿瘤辅助诊断的指标，单纯铁蛋白升高对恶性肿瘤的诊断有一定的参考价值。目前大量临床和流行病学研究发现，体内铁蛋白储存量增高可能与罹患肝癌、肺癌、结肠癌、食管癌、胃肠道肿瘤和胰腺癌、乳腺癌有关，特别是当肝癌AFP测定值较低的情况可用铁蛋白测定值补充以提高诊断率[9-10]。本组资料显示，铁蛋白升高在恶性肿瘤患者中显著高于良性病变患者及健康体检者，肿瘤组阳性率最高，其次为良性组，不过值得注意的是0.5%的健康体检者铁蛋白也有升高。本文结果显示,铁蛋白在胰腺癌中阳性率最高，但与卵巢癌、肝癌、肺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等类型肿瘤无明显差异，卵巢癌患者血清铁蛋白阳性率仅略低于胰腺癌患者。林国志等[11]研究发现卵巢癌血清铁蛋白明显升高，与对照组和良性肿瘤组比较均有明显差异，并认为升高原因可能是由于卵巢癌细胞生长迅速,引起组织细胞坏死,导致网状内皮系统细胞增生活跃,诱导铁蛋白合成增加，随着增生活跃的网状内皮细胞释放至血液中，血清铁蛋白水平增高。杨健之和黄敏丽[12]则研究了血清铁蛋白水平与卵巢癌化疗和预后的关系，认为血清铁蛋白水平越高，分期越晚、恶性程度越高、预后越差，手术化疗后越易复发死亡。

由于单项肿瘤标志物的敏感性和特异性有限，且血清铁蛋白属于一种非特异性肿瘤标志物，缺乏特异性，阳性率也较低(20%～30%)，故血清铁蛋白对诊断某一种类型肿瘤的价值不大，伴随或联合其他指标可能更有意义。国内外研究者大多通过研究选择恰当的多肿瘤标志物进行组合，以提高诊断正确率。多肿瘤标志物蛋白芯片通过检测不同种类的蛋白质来比较不同疾病状态的差异表达，从而发现具有诊断或预测价值的生物学标记，提高了效率和降低了费用，越来越受到临床工作者的重视。本组多肿瘤标志物蛋白芯片检测结果显示铁蛋白阳性伴随CA125阳性最常见于卵巢癌。目前大多数学者认为CA125对诊断卵巢癌早期病变的敏感性较低，故一般联合其他标志物以提高诊断的阳性率。何玲[13]研究认为CA125、TPS、铁蛋白联合检测既可以作为诊断恶性卵巢肿瘤的可靠依据，也对肿瘤性质具有鉴别诊断意义。马红[14]研究显示在卵巢恶性肿瘤和良性肿瘤的诊断和鉴别诊断中CA125 和CEA 的检出阳性率最高,铁蛋白其次，并认为联合检测CA125、铁蛋白对于卵巢癌和卵巢良性肿瘤的诊断和鉴别诊断是一种非常重要的方法。此外，本组资料分析还显示铁蛋白伴随CEA升高最常见于肠癌，伴随CA19-9升高最常见于胰腺癌。Wild等[15]研究证实CEA、seprase、CYFRA 21-1、 OPN 、铁蛋白和anti-p53等6种肿瘤标志物联合检测进行结直肠癌筛查的敏感性和特异性均高，可与大便潜血试验一样达到结直肠癌筛查目的。路丹等[16]对188例肺癌患者的C12型肿瘤标志物蛋白芯片检测结果进行分析，单项标志物对肺癌敏感性由高到低依次为CEA(36.7%)、CA125(28.2%)、铁蛋白(20.7%),两项联合后敏感性升至40.4%。上述结果表明，在多肿瘤标志物联合检测中，如果以铁蛋白为观察点，其单独升高的意义不大，而不同肿瘤标志物联合对肿瘤类型有一定的辅助诊断意义。

总之，由于在良性肿瘤及正常组织中存在肿瘤标志物，并且其产生还受诸如感染、炎症及其他各种应激情况的影响，因此在肿瘤标志物检测的临床应用中，应紧密结合临床表现，特别是结合影像和病理综合判断，提高肿瘤诊断的正确率，使其更好地为临床服务。

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