HPLC法测定三九胃泰颗粒中芍药苷的含量*

2012-01-03林月英董宪凤

天津药学 2012年4期

关键词：异丙醇芍药甲醇

林月英，董宪凤

(天津市大港区药品检验所，天津 300270)

HPLC法测定三九胃泰颗粒中芍药苷的含量*

林月英1，董宪凤2

(天津市大港区药品检验所，天津 300270)

目的:建立HPLC法测定三九胃泰颗粒中芍药苷的含量。方法:采用HPLC方法，Diamonsil C18分析柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以异丙醇－甲醇－醋酸－水(2∶25∶2∶71)为流动相，流速0.8 ml/min，检测波长为230 nm，柱温30℃。结果:芍药苷在0.211 6 ～5.29 μg范围内线性良好(r=0.999 9)，平均回收率在97.43%，RSD 为0.65%(n=9)。结论:本方法灵敏准确，重现性好，适用于三九胃泰颗粒中芍药苷的含量测定。

三九胃泰颗粒，芍药苷，HPLC

三九胃泰颗粒是由白芍、三叉苦、九里香、两面针、木香和黄芩等8味中药材组成，具有清热燥湿、行气活血、柔肝止痛的作用，用于湿热内蕴、气滞血瘀所致的胃痛，症见脘腹隐痛、饱胀反酸、恶心呕吐、嘈杂纳减等症。现有的质量标准［1］为检测黄芩苷的含量。为了更加有效的控制该药的质量，对此方中芍药苷含量进行测定，利用高效液相色谱法定量，方法操作简便易行，具有分离好、灵敏度高、稳定性强等优点，适用于三九胃泰颗粒的质量控制。

1 仪器与试药

岛津高效液相色谱仪 LC－2010AHT，岛津高效液相色谱仪工作站LC－Solution。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110736－201035);三九胃泰颗粒(规格:20 g/袋，湖南三九南开制药有限公司，批号1104271N、1201006H、1110022H);异丙醇、甲醇和醋酸均为色谱纯，水为纯化水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件色谱柱为Diamonsil C18分析柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流动相:异丙醇－甲醇－醋酸－水(2∶25∶2∶71)，流速为0.8 ml/min，柱温30 ℃，检测波长为 230 nm，进样量 20 μl［2］。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照溶液的制备精取芍药苷对照品10.58 mg至50 ml棕色量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，制成芍药苷对照品溶液。

2.2.2 样品溶液的制备取“装量差异”项下本品，研细，混匀，精取约 1.1 g，精密加入甲醇 25 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

2.2.3 阴性对照溶液制备按处方工艺制备不含白芍的阴性样品，按照“2.2.2”项下方法制成阴性对照品溶液。

2.3 专属性考查分别精取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样，结果阴性对照品溶液无干扰，见图1。

图1 对照品(A)供试品(B)阴性对照品(C)HPLC色谱图

2.4 线性考查精取 1、5、10、15、20 和 25 μl的对照品溶液，在“2.1”项下色谱条件下分别进样，以峰面积为横坐标，样品浓度为纵坐标进行回归，回归方程为Y=3.615 5 ×105X+1.094 4 ×104(r=0.999 9)，结果芍药苷在 0.211 6～5.29 μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验精密吸取一定浓度的对照品溶液，按上述色谱条件连续进样5次，进样量为20 μl，测得芍药苷峰面积，RSD为0.55%。

2.6 重现性试验取同批号的样品1.1 g，按样品配制方法制备5份，进样量为20 μl，测定芍药苷的含量，RSD 为 1.14%(n=5)。

2.7 稳定性试验精密吸取同一浓度的供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件于 0、1、2、4、8、12 及 24 h 分别进样20 μl进行含量测定，结果表明供试品在24 h内稳定。

2.8 回收率试验取已知含量批号1104271N的样品9份，精密称定，至25 ml量瓶中，分别加入芍药苷对照品，依“2.1”项下色谱条件进样，结果平均回收率为97.43%，RSD 为 0.65%，见表 1。