ADVIA Centaur超敏肌钙蛋白I测试法的性能分析及临床应用评价

蔡迪娅 邱晓明 苏月梅 王宗泽 常艳敏

心肌肌钙蛋白（cTn）是目前反映心肌损伤灵敏度和特异度较高的生物学标志物，广泛应用于急性心肌梗死（AMI）的早期诊断[1-2]。2000年欧洲心脏病协会（ESC）和美国心脏病学会（ACC）联合提出重新定义AMI[3]，将cTn的变化作为诊断AMI的重要依据之一。近年来，随着检验技术的不断改进，新一代高敏感方法检测的试剂相继问世，对检测性能进行评估是合理选择cTn检测方法的一个重要步骤。高敏感心肌肌钙蛋白I（hs-cTnI）检测可采用ADVIA Centaur分析系统，直接化学发光技术的3位点夹心免疫测试法。本文对该方法的检测性能进行评估，并对其在临床上的应用做初步探讨。

1 对象与方法

1.1 研究对象 病例组为我院2010年8月—10月急诊胸痛入院患者120例，年龄46～79岁。AMI诊断参照2000年ESC/ACC的诊断标准，确诊AMI 41例，男23例，女18例；非AMI 79例，男47例，女32例。对照组：无心血管、肺、肾、肝、胆、胰等器质性疾病，心电图检查正常，各项血清检测指标均正常者20例，男13例，女7例，年龄20～60岁。

1.2 方法 收集病例组入院即刻血清样本及对照组血清样本，所有样本采集1 h内分离血清，-20℃保存至分析，仅冻融1次。使用SIEMENS超敏TnI试剂盒（批号：10054/55）在SIEMENS ADVIA Centaur CP全自动化学发光免疫分析仪上检测。

1.3 功能灵敏度评估 本研究取变异系数（CV）=10%时的质量浓度值：收集超敏TnI（TnI-Ultra）高值血清10 mL，对照组血清60 mL。用对照组血清将高值血清稀释为7个质量浓度梯度，由低到高依次为0、0.01、0.03、0.05、0.07、0.09及0.11 μg/L。将上述系列质量浓度血清各分装10管，-20℃保存至分析。将上述系列质量浓度每天检测1次，连续检测10 d，计算每日CV值。以质量浓度为横坐标，CV为纵坐标做图，求取CV=10%时TnI-Ultra质量浓度值，即为该方法的功能灵敏度。

1.4 评估精密度 用对照组血清将TnI-Ultra高值血清稀释，配制质量浓度为0.04 μg/L血清样本（L）并分装10管，-20℃保存0.04 μg/L厂商提供的ADVIA Centaur超敏TnI测试法第99百分位值。1 d内连续检测20次，评估批内不精密度。每天早晚各检测1次，连续监测10 d，评估批间不精密度。分别计算其均值（x） 、标准差（s）、CV。

1.5 临床应用评估 对AMI组患者入院即刻TnI-Ultra检测结果进行ROC曲线分析，评估检测结果对AMI的诊断特性。

1.6 统计学分析 使用SPSS 16.0软件包进行统计分析。计算CV、检出阳性率及ROC曲线下面积（AUC）。应用四格表计算灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。

2 结果

2.1 功能灵敏度 TnI-Ultra在CV=10%处质量浓度为0.042 μg/L，在CV=20%处的质量浓度为0.019 5 μg/L，见图1。

2.2 精密度 血清样本（0.04 μg/L）批内、批间检测不精密度结果，见表1。

表1 ADVIA Centaur TnI-Ultra批内、批间检测不精密度

2.3 临床应用评估 急诊胸痛入院患者120例，最终确诊AMI 41例（34%），对入院即刻检测值进行ROC曲线分析。ROC曲线下面积为0.956，确定诊断界值为0.436 μg/L，此界值对于AMI诊断的灵敏度为90.2%，特异度为87.3%。在第99百分位正常值处的灵敏度为100%，特异度为63%，见图2。以0.436 μg/L为诊断界值，对于AMI的阳性预测值为85.7%，阴性预测值为93.6%，见表2。

表2 TnI-Ultra诊断与临床实际诊断AMI比较

3 讨论

高敏感cTn检测对急诊胸痛入院患者早期快速诊断AMI并及时治疗至关重要，能够极大地提高生存率并改善预后[4-5]。2007年，ESC、ACC、美国心脏协会（AHA）和世界心脏联合会（WFA）在对AMI的最新定义中指出，若cTn检测值高于参考范围第99百分位值（要求检测方法CV在第99百分位值处≤10%），并有相应的临床症状和心电图改变，则可考虑诊断为AMI[6]。根据Apple[7]对敏感方法检测cTn的评判模式，本室检测结果显示ADVIA Centaur超敏TnI测试法功能灵敏度CV=10%为0.042 μg/L，与厂商提供的总体第99百分位值（0.04 μg/L）相近。同时L血清样本检测结果显示的批内、批间检测不精密度均小于10%。由于hs-cTnI检测方法的灵敏度高，检出低限更低，且hs-cTnI在一些非心肌梗死性疾病（如肾功能不全、肺栓塞、心肌炎等）中也可升高，故以第99百分位正常值（0.04 μg/L）作为诊断阈值将出现过高的假阳性率（特异性仅为63%）。笔者根据120例胸痛入院疑似AMI患者的TnI-Ultra检测结果进行ROC曲线分析，结果显示AUC为0.956，曲线上最佳点（即最靠近左上角的点）的灵敏度（90.2%），特异度（87.3%）均较好，确定本实验室诊断界值0.436 μg/L，与 WHO 定义的ADVIA Centaur cTnI诊断界值（0.78 μg/L）有差异，原因可能是样本例数太少，另外一个值得重视的原因是大部分患者入院时胸痛已持续发作，由于无法得知胸痛开始的确切时间，一般将就诊时间定为入院即刻。有文献报道AMI发病间隔4 h hs-cTnI质量浓度变化常大于20%，而其他心脏疾病变化小于20%[8]。hs-cTnI的动态上升（>20%）表明存在急性、进行性心肌损伤。连续监测并动态观察分析hs-cTnI变化有助于鉴别诊断因其灵敏度提高而增多的疑似AMI患者。据此确定了本实验室TnI-Ultra测定结果的应用规则：（1）入院即刻TnI-Ultra>0.436 μg/L且有相应临床症状者可考虑AMI。（2）入院即刻TnI-Ultra升高未超过0.436 μg/L者，应进一步观察，并建议间隔2～4 h后再次检测，若第2次结果超过0.436 μg/L或2次变化超过20%可考虑AMI。对于AMI的排除诊断，目前尚无定论，适合于本实验室的正常参考值范围还有待于进一步确定。

[1]鄢盛恺.高敏感心肌肌钙蛋白检测的临床应用[J].中华检验医学杂志，2010，33(9):809-813.

[2]潘伯申，杨振华，吴健民.冠状动脉疾病和心力衰竭时心脏标志物临床检测应用建议[J].中华检验医学杂志，2006,29(9):774-778.

[3]Alpert JS,Thygesen K,Antman E,et al.Myocardial infarction redefined:a consensus document of The Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee for the Redefinition of myocardial infarction[J].J Am Coll Cardiol,2000,36(3)：959-969.

[4]Hoenig MR，Doust JA，Aroney CN，et al.Early invasive versus Conservative strategies for unstable angina&non ST-elevation myocardial infarction in the stent era[J].Cochrane Database Syst Rev，2006,3:CD004815.

[5]Wang K，Asinger RW，Marriott HJ.ST-segment elevation in conditions other than acute myocardial infarction[J].N Engl J Med，2003,349(22):2128-2135.

[6]Thygesen K,Alpert JS,White HD,et al.Universal definition of myocardial infarction[J].JACC，2007,50(22):2173-2195.

[7]Apple FS.A new season for cardiac troponin assays:it’s time to keep a scorecard[J].Clin Chem，2009,55(7):1303-1307.

[8]Jaffe A,Apple FS.High-sensitivity cardiac troponin:hype,help,and reality[J].Clin Chem,2010,56(7):342-344.