细胞因子与乙型肝炎肝硬化肝功能分级的相关性

赖祥红

杭州市肿瘤医院中西医结合科 (浙江杭州，310002)

近年来，大量的研究表明，肝硬化患者血清中多种细胞因子的含量升高，这些细胞因子升高与肝硬化病情严重程度有关［1］。我们选择 3 种细胞因子 (TGF-β1、PDGF、IFN-γ)进行检测，比较其与肝功能Child-Pugh分级的关系，从而阐明3种细胞因子的变化规律，寻求能够准确反应肝功能损害程度的新指标。

1 资料与方法

1.1 对象 选择28例本院2010年9月-2011年2月临床确诊的乙型肝炎肝硬化住院患者，男20例，女8例，年龄33～79岁，平均 (42.53±10.67)岁。诊断标准:参照2000年全国传染病与寄生虫病学术会议所修订的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准［2］。乙型肝炎肝硬化的分级采用 Child-Pugh分级标准，A级9例，B级10例，C级9例。排除标准:①血清HCV、HDV、HAV、HEV、HIV阳性;②其他类型慢性肝病 (含肝癌、脂肪肝、自身免疫性肝炎、肝豆状核变性、淤胆型肝炎等);③酗酒和吸毒史;④有明显心、脑、肾、神经、精神病和不稳定糖尿病患者;⑤妊娠和哺乳期;⑥近3个月应用糖皮质激素等影响免疫功能药物者。正常对照组29例为肝、肾、心、肺功能正常，无其他疾病及感染的健康体检者。其中男26例，女3例，年龄20～35岁，平均 (27.00±4.74)岁。

1.2 方法 清晨空腹抽取两组人员肘静脉血5～10m1，不加抗凝剂，2000rpm离心10分钟，离心后收取血清，标号后冻存于-20℃低温冰箱备检。避免使用溶血标本、脂质标本或微生物污染的血清。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)，试剂盒由美国ADL公司生产，购自上海朗顿生物科技有限公司。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计分析，结果以表示，各组间数据以及两个独立样本之间的比较均先采用F检验判断总体方差是否齐同，再运用方差分析，组间两两比较采用q检验。

2 结果

2.1 肝硬化患者与正常者血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ检测情况 见表1。

表1 两组人员血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ水平比较)

表1 两组人员血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ水平比较)

与正常组比较，*P＜0.05

2.2 Child-Pugh A、B、C级患者与正常者血清3指标结果见表2。

表2 Child-Pugh A、B、C级患者与正常者血清3指标水平比较 ()

表2 Child-Pugh A、B、C级患者与正常者血清3指标水平比较 ()

与正常组比较，*P＜0.05;与Child A级比较，#P＜0.05

3 讨论

TGF-β1具有抑制肝细胞增殖、诱导肝细胞凋亡，激活HSC(肝星状细胞)、促进其产生细胞外基质 (ECM)并抑制ECM降解的作用［3］。TGF-β1能通过抑制肝细胞DNA的合成而诱导肝细胞凋亡［4］，并能通过抑制间质细胞分泌肝细胞生长因子 (hepatocyte growth factor，HGF)以及抑制HGF对肝细胞有丝分裂的促进作用［5］，间接抑制肝细胞分裂和增殖。TGF-β1促进ECM的合成与沉积作用主要是通过促进肝脏间质细胞的激活、增殖作用和增加间质细胞对ECM成分的合成实现的。本研究显示，乙型肝炎肝硬化Child-Pugh分级患者血清TGF-β1水平均明显高于正常对照组 (P＜0.05)，并且Child B级和Child C级患者TGF-β1水平明显高于Child A级(P＜0.05)，说明肝硬化患者血清TGF-β1水平一定程度上反应肝功能损害程度和疾病状况，与病情呈正相关，其原因可能是正常肝脏TGF-β1转录仅见于门静脉周围细胞、导管周围细胞、肝小叶中央静脉周围细胞与肝包膜间质细胞，而在肝硬化肝损伤加重时HSC、枯否细胞等非实质细胞增加从而导致TGF-β mRNA转录明显增加所致。

PDGF主要由肝内枯否细胞和HSC产生，是强烈的有丝分裂原，对HSC的活化和分裂、增殖有明显的促进作用。已证实静止期的HSC无PDGF的受体表达，只有活化的才表达PDGF受体，PDGF可使HSC合成DNA增加18倍，是很有效的有丝分裂原［6］。乙型肝炎肝硬化Child-Pugh分级患者血清PDGF水平均明显高于正常对照组 (P＜0.05)，并且Child B级和Child C级患者PDGF水平明显高于Child A级 (P＜0.05)。说明血清PDGF水平与肝硬化的形成及病情发展程度有密切关系。原因可能是PDGF是一种重要的促有丝分裂因子，具有刺激特定细胞群分裂增殖的能力，体内单核、巨噬细胞是主要合成PDGF的细胞，在肝受损时，巨噬细胞、血小板、浸润的炎细胞、受损的内皮细胞及激活的HSC均可分泌PDGF。而大量分泌的PDGF刺激间质星状细胞增殖，转化为肌纤维样母细胞，并促使星状细胞迁移，聚集于炎症受损区，而肌纤维样母细胞合成大量ECM沉积于肝细胞间质，促进肝纤维化发生。因此，PDGF能够强烈刺激HSC的增殖、迁移，促使胶原的产生和沉积，在肝硬化发生发展中起着非常重要的作用。

IFN-γ是目前研究最广泛的抗纤维化细胞因子，它参与了多种肝损伤的病理生理过程，可以抑制HSC的增殖和活化，抑制ECM中蛋白的合成，具有促进前列腺素E2的释放以抑制胶原的合成［7］。表明IFN-γ在抑制肝纤维化形成方面具有重要作用。近年来大量的体内、体外及人体实验均表明IFN-γ对HSC的增殖、胶原合成有抑制作用，与肝纤维化程度呈负相关［8］，并且对TGF-β1促进ECM成分的合成有抑制作用［9］。在CHB发展到肝硬化的过程中，随着HBV DNA的始终存在，抗炎性的Th2型细胞因子含量随之增加，则使得IFN-γ的含量逐渐降低;另外由于HBV DNA入侵外周血单个核细胞，使得后者分泌IFN-γ的含量逐渐减少，以及由于其他细胞因子的相互作用，最终使得IFN-γ的水平逐渐降低，抗肝纤维化的能力逐渐减弱，肝硬化的程度逐渐加重，进一步使得IFN-γ的含量降低。

总之，本研究结果显示随着肝硬化病程延长，病情加重，患者血清TGF-β1和PDGF水平随之升高，而IFN-γ水平随之降低。说明它们在乙型肝炎肝硬化的发生发展过程中有着重要意义，并反应肝硬化患者肝功能损害程度，有利于临床上对肝硬化患者病情和预后的判断。

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