急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP测定的临床意义

郑彩丽

（嘉峪关市疾病预防控制中心，甘肃嘉峪关 735100）

急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP测定的临床意义

郑彩丽

（嘉峪关市疾病预防控制中心，甘肃嘉峪关 735100）

目的探讨急性胰腺炎（AP）时血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、一氧化氮（NO）、C-反应蛋白（CRP）测定的临床意义。方法将43例AP患者，分为轻症AP（MAP）组、重症AP（SAP）组，发病后1、2、3、5、7 d分别抽取外周静脉血检测，并于发病后1 d取同期健康体检者36例（对照组）血样测定作为对照。用ELISA法、ABC-HRP法、化学法、比浊免疫法分别测定上述血清因子。结果上述因子在AP发病早期持续升高，MAP组TNF-α、IL-6、NO、CRP水平高于对照组，有显著性差异（P＜0．05）；SAP组明显高于MAP组，有非常显著性差异（P＜0．01）。结论TNF-α、IL-6、NO、CRP测定可作为AP病情严重程度及判断预后的指标，动态测定更具有重要的临床意义。

急性胰腺炎；细胞因子；炎性介质

急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）是消化系统的一种常见急症，是由多种病因引起的胰酶激活，继以胰腺局部炎症反应为主要特征，伴或不伴有其他器官功能改变的疾病。在临床上可表现为轻至重型，轻型预后良好，多数属自限性，约15%～30%发展成为重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）而危及生命，总体死亡率为10%～30%[1]。至今，急性胰腺炎发病机制仍未完全阐明。长期以来，胰腺炎一直被认为是各种因素致消化酶在胰腺内活化及消化酶的高分泌导致胰腺自身消化所致（自身消化学说），近年比较公认的四大机制是胰腺胰酶自身消化、胰腺血循环障碍、肠道细菌移居胰腺组织和白细胞过度激活学说。特别是1998年Rindernecht提出了AP的“白细胞过度激活学说”，认为在AP尤其是SAP期间，某些炎症细胞及被破坏的胰腺组织释放多种炎性介质、细胞因子，如氧自由基、血小板活化因子、前列腺素、白三烯、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素等，导致全身炎症反应综合征及多器官功能衰竭，是患者死亡主要原因。炎性因子的产生及其级联瀑布效应（cascade teaction），使得胰腺局限性炎症反应发展为威胁生命的SAP越来越受到关注。C-反应蛋白（CRP）是肝脏合成的一种炎症因子,在各种炎症状态下其血清含量迅速升高,且与炎症的程度相关。它能反映不同应激状态如组织创伤、缺血、炎症、感染和恶性疾病严重程度，也能在一定程度上反映AP的严重程度。本研究通过观察AP血清TNF-α、白细胞介素6（IL-6）、NO、CRP水平及动态变化规律,从而探讨其可能的作用机制和临床意义。

1 资料和方法

1.1 临床资料

2002年11月至2004年12月，共收集AP患者43例,其中轻症AP（MAP）32例,男性20例、女性12例，年龄20～72岁，平均44.6岁；重症AP（SAP）11例，男性7例、女性4例，年龄24～75岁，平均48.5岁。所有病例按1997年全国胰腺外科学术会议诊断标准[2]，均经临床症状，体征，血、尿淀粉酶，血生化等实验室检查及影像学诊断证实。对照组36例，男21，例、女15例，年龄21～74岁，平均43.7岁,系同期健康体检者。

1.2 实验方法

所有病例在发病后1、2、3、5、7 d抽取外周静脉血，分离血清后检测血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平,并于发病后1 d取同期健康体检者36例血样测定作为对照。TNF-α采用芬兰产Labsystems WellscanMK3酶标仪、DragonMK2洗板机，ELISA法测定，试剂由法国制造；IL-6采用芬兰产Labsystems Wellscan-MK3酶标仪、DragonMK2洗板机，ABC-HRP法测定法，试剂由上海西宝生物科技有限公司生产；NO采用日本产东芝120全自动生化分析仪，化学法测定，试剂由长春汇力生物工程技术开发中心生产；CRP采用日本产东芝120全自动生化分析仪，比浊免疫测定法测定，试剂由上海复星长征医学科学有限公司生产。所有检测严格按说明书和操作规程进行。

2 结果

发病后1 d MAP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平高于对照组，有显著性差异（P＜0.05），而SAP患者又明显高于MAP患者,有非常显著性差异（P＜0.01），见表1。动态测定可见TNF-α高峰出现在发病后1 d，IL-6、NO高峰出现在发病后1～2 d，CRP高峰出现在发病后2～3 d，SAP组上述因子明显高于MAP组，有非常显著性差异（P＜0.01），见表2。

表1 发病后1 d AP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平测定（）

表1 发病后1 d AP患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP水平测定（）

注：与对照组比较，*P＜0．05；与MAP组比较，**P＜0．01

分组n TNF-αIL-6NOCRP（ng/ml）（pg/ml）（umol/L）（mg/L）对照组MAP组SAP组36 32 11 1．05±0．24 1．25±0．37* 3．03±1．07** 7．83±3．17 10．67±4．88* 30．11±15．03** 78．56±36．14 98．13±42．65* 160．74±53．28** 7．71±3．12 10．13±4．83* 118．47±20．95**

3 讨论

AP时由于细菌、内毒素、炎症等的刺激,激活体内巨噬细胞及T细胞等,释放TNF-α、IL-6、NO等细胞因子和炎性介质，并进而通过“扳机样作用”，触发炎性介质“瀑布样级联反应”，对胰腺及其他重要脏器，如心、肺、肾组织及细胞造成毒性损害，使AP病情加重,严重者可并发多器官功能障碍综合征（MODS）。本研究通过观察AP患者TNF-α、IL-6、NO、CRP的动态变化表明，在AP早期明显升高，MAP与对照组相比有显著性差异（P＜0.05），SAP与MAP相比有非常显著性差异（P＜0.01）。TNF-α是由单核细胞、巨噬细胞等产生的细胞因子,是AP最早升高的细胞因子，对AP发病起重要作用。它具有重要的炎症、免疫反应调节功能，可促使PLA2活化，促使二十碳烯酸的分解代谢。炎性介质的释放，使白细胞浸润，红细胞渗出，活化中性粒细胞，导致AP和内毒素的产生；可直接作用于胰腺血管内皮，导致局部出血坏死和DIC，同时能增加肺血管通透性，使肺间质水肿，促使ARDS的产生[3]。TNF-α作为单核巨噬细胞分泌的递质之一，是感染过程中机体病理、生理改变的重要调节因子，适量时可发挥免疫调节功能，具有抗肿瘤、抗病毒及抗感染作用，但当TNF-α分泌过多或调节失控时则会引起机体脓毒血症、感染性休克，且TNF-α的持续存在可进一步增加白细胞脱颗粒，产生氧自由基和白细胞醇等，进而引起白细胞代谢紊乱及MODS。本实验结果表明，AP患者TNF-α在早期明显升高，且在MAP和SAP之间有显著性差异。实验发现，TNF-α在疾病早期含量即开始升高，1 d达峰值，以后开始下降，说明TNF-α是SAP早期一种重要的炎症递质，在SAP早期参与了胰腺炎的发生、发展过程，并与病情的严重程度和死亡率密切相关，第一天血清TNF-α水平与患者的不良预后成正相关。本实验结果证实，IL-6在AP病程中显著升高且SAP尤甚,与国内外的研究结果相似[4]。IL-6系由单核巨噬细胞及T细胞产生的重要细胞因子,参与免疫、代谢和炎症急性期反应。IL-6在AP早期就升高,在入院后1～2 d达到峰值，能反映胰腺损害程度。IL-6先于CRP 24～36 h升高，它可促进CRP的合成。更重要的是，血清IL-6水平在MAP、SAP中显著不同，提示它对于区分MAP、SAP具有重要的临床诊断价值。IL-6水平与AP的严重程度及持续时间直接相关,被认为是引起局部胰腺和全身器官损伤的重要促炎细胞因子,其机制可能与IL-6改变细胞内G蛋白活性并参与中性粒细胞功能上调有关。本组资料显示,血清NO水平，MAP组较对照组升高,SAP组较MAP组显著升高,在发病1～2 d达到高峰，有显著性差异。NO对AP具有一定的保护作用,其机制主要系NO作为内源性舒血管因子,调节胰腺血流灌注，改善胰腺微循环。但NO作为一种自由基，过量产生后会导致直接抑制靶细胞的氧化呼吸；与铜铁蛋白或其他氧自由基作用，产生过氧硝酸盐；损害血管内皮,降低血管对缩血管物质的反应,致难治性休克；抑制环氧化酶活性,降低血中PGI2/TXA2比值；诱导炎症细胞产生TNF-α等,增强血管通透性和炎症反应[5]。CRP作为非特异性炎症急性时相蛋白,是细菌感染和坏死的突出指标,在炎症早期即急剧升高达峰值,并与炎症的严重程度、范围有一定的平行性。本实验结果显示，AP发病期间CRP的高低与其病情的严重程度密切相关,CRP峰值出现的时间在疾病发作后的2～3 d，重症胰腺炎CRP值大于100 mg/L，而轻症胰腺炎CRP值小于50 mg/L。对CRP进行定量分析还有助于早期发现腹腔内的感染并发症,有助于指导治疗及判断预后[6]。因此,检测血清中TNF-α、IL-6、NO、CRP水平可作为判断AP病情严重程度和预后的辅助指标,并可能为细胞因子和炎性介质拮抗剂等免疫干预治疗提供依据。

表2 在AP病程中患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP变化（）

表2 在AP病程中患者血清TNF-α、IL-6、NO、CRP变化（）

注：与MAP组比较，*P＜0．01

时间（d）MAP组SAP组2357 18．63±8．22 16．62±7．20 10．97±5．61 3．00±1．82 TNF-α（ng/ml）IL-6（pg/ml）NO（μmol/L）CRP（mg/l）TNF-α（ng/ml）IL-6（pg/ml）NO（μmol/L）CRP（mg/L）1．14±0．32 0．83±0．25 0．78±0．24 0．55±0．14 102．70±25．10 90．13±23．95 78．47±12．83 57．57±9．33 23．54±5．13 32．74±8．28 18．57±4．12 7．74±3．28 2．97±1．02* 2．82±0．97* 1．18±0．79 1．03±0．60 35．55±12．32* 26．60±10．21* 15．92±7．40* 5．05±3．97 169．33±54．14* 138．13±32．20* 108．56±26．10* 78．25±12．33 146．70±31．10* 172．13±40．95* 128．47±28．83* 110．70±16．12*

本研究通过观察AP患者细胞因子TNF-α、IL-6和炎性介质NO变化的结果表明，AP早期时明显升高，SAP时升高更为显著。本实验结果表明，AP患者TNF-α在早期明显升高，发病后1 d达到峰值，以后开始下降，第一天血清TNF-α水平与所有患者的不良预后成正相关，说明TNF-α是SAP早期一种重要的炎症递质，且在MAP和SAP之间有显著性差异。本实验结果证实了IL-6在AP病程中明显升高且SAP尤甚,与国内外的研究结果相似。IL-6在AP早期就升高,在发病后1～2 d达到峰值，能反映胰腺损害程度。本次研究也显示，血清NO水平，MAP组较对照组升高，而SAP组较MAP组明显升高，有显著性差异，其高峰时间与IL-6相似。本组测定发现，AP时CRP升高，其高峰出现在发病后2～3 d，以SAP时升高特别明显，SAP时CRP值大于100 mg/L，而MAP时CRP值小于50 mg/L，有非常显著性差异。

4 结论

检测血清中TNF-α、IL-6、NO、CRP水平可作为判断AP患者病情严重程度和预后的辅助指标,并可能为细胞因子和炎性介质拮抗剂等免疫干预治疗提供依据，具有重要的临床意义。

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R657．5+1

B

1671-1246（2011）13-0151-02