通腑汤对急性肺损伤大鼠肠组织SP的影响

刘建秋 李竹英 王 珏 郅扶旻 隋博文 刘晓东 王雪慧

黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040

急性肺损伤 (ALI)是指各种直接和间接严重肺内、外致病因素导致的急性进行性呼吸衰竭。其最终严重阶段被定义为急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)。ALI当属中医学“暴喘”、“上气”等范畴。本实验将通过ALI大鼠模型肠组织SP含量的变化，探讨通腑汤对ALI的作用机制。同时，也为“肺与大肠相表里”提供有力的实验依据。

1 实验资料

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 清洁级Wistar大鼠180只，购自哈尔滨医科大学第二附属医院实验动物中心，体重：200～250g。

1.1.2 主要试剂及药品

(1)双抗体夹心酶联免疫吸附 (ELISA)法大鼠SP试剂盒; (2)冻干精制大肠杆菌内毒素脂多糖 (LPS)L2880;(3)通腑汤：大黄、枳实、厚朴、杏仁、黄芩等组成。由笔者所在医院药剂科提供;(4)地塞米松磷酸钠注射液;(5)0.9%生理盐水。

1.2 实验方法

1.2.1 实验动物分组 将180只实验大鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组6组，30只/组。

1.2.2 动物模型的建立 将LPS用蒸馏水配成1mg/ml的溶液，正常对照组大鼠尾静脉注射生理盐水 (2.5ml/kg)作为空白组。其余各组大鼠尾静脉注射LPS溶液 (2.5ml/kg)复制ALI模型。

1.2.3 实验动物给药 造模后0.5h正常对照组、模型组用生理盐水1ml/100g灌胃治疗，其余各组分别予以各自药物1ml/100g灌胃治疗。本实验大鼠给药剂量是6.5g/kg。为方便灌胃，将药物配成浓度分别为0.325g/ml、0.65g/ml、1.3g/ml的低、中、高浓度溶液。

1.2.4 实验动物标本采集及检测指标 制备肠组织匀浆，取大肠 (回肠末端1cm肠段)组织，备用组织匀浆，ELISA法测定组织中SP(操作步骤严格按照试剂盒说明书进行)。

1.3 统计学处理 实验数据采用统计软件SPSS13.0进行统计处理，数据用均数±标准差 (±S)表示，组间比较用t检验，多组间比较用单因素方差分析。P＜0.05有统计学意义。

表1 各时间点大鼠肠组织中SP含量 (pg/ml)(±S)

2 实验结果

从表1可以看出：模型组肠组织SP含量在前6h内随时间的延长而降低。模型组SP含量低于正常对照组，有统计学意义 (P＜0.05)，说明实验造模是成功的。地塞米松、中药各剂量治疗均有效。中药低剂量组SP含量低于地塞米松组，说明中药低剂量疗效不如地塞米松。中药中剂量组、中药高剂量组SP含量与地塞米松组无差异，说明中药中剂量、中药高剂量与地塞米松疗效相当。△

3 讨论

SP是一种神经肽，具有多种生物活性，能增加胃肠蠕动，促进胃肠激素及唾液的分泌。内毒素血症状态下，空肠肠壁内SP能神经释放耗竭，使空肠组织局部SP减少，局部SP的释放为肌电复合，引起不规则峰电位活动，说明内毒素血症后肠道内SP含量变化与肠运动紊乱有关。研究表明，阻断SP作用大鼠更容易受沙门氏菌感染[1]。SP可通过NK1R磷酸化和激活抗凋亡的Akt途径，达到防止大肠炎过程中的进一步的组织损害及挽救结肠细胞的凋亡。作为一种免疫保护因子和抗应激因子SP逐渐受到人们的重视。SP在炎性反应中具有双向调节作用，既参与促进炎性反应，也在抗炎性反应中发挥作用。近年研究表明：SP是ALI病理过程中重要的因子[3]。SP在胰腺和肺均高表达，NEP(SP降解酶)抑制剂能明显上调SP的表达并加重肺损伤[4]。有人认为SP在异氟烷诱发脊髓损伤大鼠神经源性肺水肿中有重要作用[5]。实验结果显示在肠组织中，SP介导的抗炎反应占优势，可能通过包括促进免疫球蛋白分泌等方式保护肠粘膜，而对机体产生正面影响。

肠源性感染及肠源性内毒素血症的发生是增加SIRS/MODS病死率的最危险的因素[3]。近年来，对于ALI的病机中“二次打击”学说受到重视，内毒素血症和细菌易位为因果、协同作用，导致机体器官功能损伤。通过本实验我们推断通腑汤可能通过促进胃肠运动，荡涤胃肠积滞，畅通气机，改善肠道微循环，促进sIgA分泌，保护肠道免疫屏障，减少细菌和内毒素异位，调节促炎因子和抗炎因子平衡，减轻SIRS，保护脏器功能。它通过降低肺组织中SP，减轻呼吸道炎性反应，减轻病理损害，同时纠正内毒素血症后肠道功能紊乱，SP能神经释放耗竭，上调SP，控制细菌易位，从而减轻肺损伤。通腑汤治疗后，使肺气得升，腑气得降，相辅相成，相得益彰，阴平阳秘，共成双向调节作用。

综上所述，通腑汤对内毒素血症后急性肺损伤有一定的治疗作用，为中医“肺病治肠理论”提供了依据。它从整体上调节人体免疫机制，平衡促炎反应与抗炎反应，改善微循环，纠正机体内环境紊乱，从而减轻肺损伤，保护全身各个脏器，使疾病“向愈”发展。

[1] Pascual DW.Ther ole of tachykinins on bacterial infections.Front Biosci，2004，9：3209-3217.

[2] Bhatia M，Moochhala S.Role of inflammatory mediators in the pathophysiolo-gy of acute respiratory distress syndrome.JPathol.2004，202(2)：145～156.

[3]马春蕾.P物质在大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤中的作用[D].天津医科大学硕士学位论文集，2007：21.

[4]张劭博，邹最，石学银.P物质在异氟烷诱发脊髓损伤大鼠神经源性肺水肿中的作用[J].中国矫形外科杂志，2009，17(10)：774～776.