IGF-1R基因在膀胱移行细胞癌中的表达

熊剑华

(南昌市第一医院泌尿外科，南昌 330008)

膀胱移行细胞癌（BTCC）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，易发生侵袭和转移。目前有关膀胱移行细胞癌发生侵袭及转移的具体机制仍不十分清楚，制约了临床医生对其早期诊断、治疗和预后的评估。本文旨在研究IGF-1R mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达与意义，从而探讨其与膀胱癌的发生、侵袭及转移的关系，可望为膀胱癌的分子诊断和判断预后提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 组织标本

40例膀胱移行细胞癌标本取自2009年7月至2010年7月在南昌市第一医院手术切除并经病理证实为BTCC的肿瘤标本。正常对照组15例为良性前列腺增生症合并膀胱结石（12例）、输尿管囊肿（2例）、膀胱阴道瘘（1例）患者经膀胱手术时所取膀胱壁组织，均经病理证实为正常膀胱黏膜组织。标本为石蜡包埋处理后的组织切片:标本组织用4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，实验时连续切取厚5～6 μm的切片。40例膀胱移行细胞癌患者中男31例，女9例。 年龄 38～76（平均 60.5）岁。 40例膀胱移行细胞癌患者中行TUR－Bt术22例，膀胱部分切除术12例，膀胱全切术6例。肿瘤临床分期按TNM标准，Tis－T117例，T2－T423例。肿瘤病理分级按WHO分级标准，I级9例，II级14例，III级17例。术后证实有淋巴结或局部转移者9例。

1.2 试剂与方法

IGF－1R mRNA 采用原位杂交检测，IGF－1R mRNA原位杂交探针（5'端标记地高辛）由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。IGF－1R mRNA探针序列为:5'－TCTTCAAGTGCGGCTCCCT－3'。

1.3 结果判断标准

判断标准:随机选择5个高倍镜视野 （400倍）进行判断，IGF－1R mRNA阳性表达时细胞浆着色呈浅黄色－黄褐色为阳性表现。最后表达以染色强度和阳性细胞率的得分之和进行判断:无染色记0分，弱染色（浅黄色）记1分，中等染色（棕黄色）记2分，强染色（黄褐色）记3分；阳性细胞率≤10%记0分，10%～45%记 1分，46%～65%记 2分，＞65%记 3分。上述两项积分相加，0分为阴性（－），1～2分为弱阳性（＋），3～4 分为中等阳性（⧺），5～6 分为强阳性（⧻）。

1.4 统计学方法

分类变量间比较采用NPar Tests检验，如某一格期望值＜5，则用Fishers精确概率法，率的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。所有结果均在统计软件SPSS10.0上运行。

2 结果

2.1 IGF-1R mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达

对照组15例正常膀胱黏膜组织中未见IGF－1R mRNA阳性表达，而40例膀胱移行细胞癌组织中IGF－1R mRNA 阳性表达 31例，阳性率 77.5%，与正常组比较有统计学意义。IGF－1R mRNA阳性染色主要位于癌（巢）细胞胞浆，呈棕黄色，阳性细胞多位于肿瘤边缘，癌组织的边缘染色强于中心部位。

2.2 IGF-1R mRNA表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系

IGF－1R mRNA阳性表达率随膀胱移行细胞癌临床分期和病理分级的升高而增加（P＜0.05），肿瘤转移者高于未转移者（P＜0.05）,见表 1。

3 讨论

膀胱移行细胞癌是泌尿系统最常见恶性肿瘤，具有易发生侵袭和转移、术后易复发等生物学特性[1]，约有70%的患者虽经系统和正规治疗，但仍然复发，约有30%的肿瘤发生侵袭或（和）远处转移[2]。而侵袭和转移又是恶性肿瘤威胁患者健康乃至生命的最主要因素。

胰岛素样生长因子（insulin－like growth factors,IGFs）是一类十分重要的生长因子，具有促进细胞增殖、分化等多种生物学活性，参与多种恶性肿瘤的发生与发展过程，如结直肠癌、肾癌[3]。IGFs系统是一个庞大的家族，包括IGF－1和IGF－2两类多肽类生长因子，以及其相应受体 IGF－1R（IGF－1 receptor）、IGF－2R（IGF－2receptor）和至少 6 种胰岛素样生长因子结合蛋白（IGF－binding protein,IGFBP）[4]。 研究发现IGF－1与肿瘤的浸润及转移有关，IGF－1能促进乳腺癌细胞的运动，进而促进肿瘤细胞的转移[5]。

本研究通过原位杂交技术在膀胱移行细胞癌组织中对IGF－1RmRNA表达进行了检测，发现对照组15例正常膀胱黏膜组织中未见一例IGF－1R mRNA阳性表达，而实验组中IGF－1R mRNA阳性表达31例（阳性率77.5%），有统计学意义。而且IGF－1R mRNA阳性表达率随BTCC临床分期和病理分级的升高而增加（P＜0.05），肿瘤转移者高于未转移者（P＜0.05）。 可见 IGF－1R 基因与膀胱癌的发生发展存在着密切的关系。

表1 IGF-1R mRNA表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系

［1］Simms M S,Mann Q，Kockelbergh R C,et al.The management of lymph node metastasis from bladder cancer［J］.Eur J Surg Oncol，2005，31（4）:348－356.

［2］Santen R J，Fan P,Zhang Z,et al.Estrogen signals via an extra －nuclear pathway involving IGF －1R ［J］.Steroids，2009，74（7）:586－594.

［3］Fagan D H,Yee D J.Crosstalk between IGF－1R and estrogen receptor signaling in breast cancer［J］.Mammary Gland Biol Neoplasia,2008,13(4):423－429.

［4］Freude S,Schilbach K,Schubert M.The role of IGF－1R receptor and insulin receptor signaling for the disease［J］.Curr Alzheimer Res,2009,6(3):213－223.

［5］Baserga R.Customizing the targeting of IGF－1R receptor［J］.Future Oncol，2009，5(1):43－50.