血清IL-6、IL-8、TNF-α表达与急性脑梗死损伤的相关性

陈芳梅 尹 琦 (广西卫生管理干部学院检验系微生物与免疫学教研室，广西 南宁 53002)

各种炎性细胞因子在脑缺血再灌注的炎症反应及其损伤中的作用日益受到重视。近年来的基础及临床研究表明〔1〕，白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF-α)与脑梗死的发生、发展及脑损害的程度密切相关。其相互关系的变化与其在脑梗死中的发病机制、病理生理过程及临床早期诊断方面的意义国外虽有研究和报道，但结果并非完全一致。本文对急性脑梗死患者血清中IL-6、IL-8、TNF-α含量的动态变化进行了检测，以期进行相关性研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 所有病例选自2007年6月至2009年6月期间在我院住院的患者，符合1996年中华神经科学会及中华神经外科学会联合制定的脑梗死诊断标准〔2〕，均为首次发病，且发病24 h内入院。排除标准:(1)伴有心、肝、肾疾病或血液病、肿瘤、结缔组织病及自身免疫性疾病;(2)近1个月内有放疗、化疗、激素、免疫抑制剂、生物制剂等特殊治疗史及外伤或手术史;(3)入院前2 w内有感染史或入院后出现感染者。符合入选条件者共49例(观察组)，其中男36例，女13例，年龄46～72〔平均(58.4±13.6)〕岁;梗死部位:脑叶20例，基底节13例，小脑4例，脑干6例，多发梗死6例;按Pul-litono公式估计脑损伤体积:大体积梗死(＞10 cm3)14例，中体积梗死(4～10 cm3)15例，小体积梗死(＜4 cm3)20例。随机选取同期健康体检者30例为正常对照组，男18名，女12名，年龄42～70〔平均(54.9±11.1)〕岁。

1.2 标本采集 发病后1、4、7、14 d各抽取肘静脉血1次，对照组采血1次，均清晨空腹取血，室温下3 000 r/min离心15 min，分离血清置于－30℃冰箱成批检测。

1.3 指标检测 IL-6、IL-8、TNF-α均采用美国Rayto 2001酶标仪以双抗体夹心ELISA法检测，试剂盒由法国Immun Otech公司提供。操作严格按说明书进行。

1.4 脑损伤体积测量 所有患者均于入院当时行头颅断层CT扫描检查，入院后14 d复查头颅CT，以明确该次疾病所导致的损伤范围。按Pul-liitonio公式〔脑梗死体积(cm3)=0.5×a×b×c，其中a、b分别代表两个最大的直径，c代表层数〕来估计梗死体积。

1.5 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件，计量资料以±s形式表示，组间比较采用χ2检验或t检验，各指标间的相关关系采用直线相关分析。

2 结果

2.1 各时点、各指标检测结果 观察组患者发病第1天血清IL-6、IL-8水平明显高于正常对照组(P＜0.01);第4天达峰值，再逐渐下降;第14天水平仍明显高于对照组(P＜0.05)。血清TNF-α水平在1～14 d始终明显高于对照组(P＜0.05)。见表1。

2.2 不同体积梗死患者急性期各指标检测结果 大、中体积梗死组血清IL-6、IL-8水平显著高于对照组(P＜0.01)，而血清TNF-α水平在大、中、小体积梗死组均显著高于对照组(P＜0.05)。见表2。

表1 观察组血清IL-6、IL-8、TNF-α浓度的变化与对照组比较(±s)

表1 观察组血清IL-6、IL-8、TNF-α浓度的变化与对照组比较(±s)

与对照组比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01;下表同

指标照组(n=30)IL-6(pg/ml) 14.77±7.862) 19.53±5.252) 11.69±5.481) 9.70±4.611)7.20±1.57 IL-8(ng/ml) 2.21±1.012) 3.20±1.052) 2.82±0.842) 1.01±0.761) 0.54±0.11 TNF-α(ng/ml) 59.38±14.372) 53.25±16.262) 50.44±12.502) 52.91±10.262)18.71±6.38

表2 不同体积梗死患者急性期血中IL-6、IL-8、TNF-α水平与比较(±s)

表2 不同体积梗死患者急性期血中IL-6、IL-8、TNF-α水平与比较(±s)

组别 n IL-6(pg/ml) IL-8(ng/ml) TNF-α(ng/ml)对照组30 7.20±1.57 0.54±0.11 18.71±6.38大体积梗死 14 21.53±5.252) 4.41±2.112) 64.42±14.562)中体积梗死 15 19.21±4.122) 3.52±1.042) 60.62±14.202)小体积梗死 20 18.10±6.211) 2.11±0.921) 54.92±13.602)

2.3 各时点、各指标检测结果与梗死体积相关性分析 发病后第1天及第4天血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均与梗死体积呈正相关，其中第4天血清IL-6、IL-8的峰值水平及第1天TNF-α的峰值水平与梗死体积的相关性较强(r=0.541，P＜0.01;r=0.661，P ＜0.01;r=0.646，P ＜0.01)。见表3。

表3 各时点血清IL-6、IL-8、TNF-α浓度与梗死体积的相关性分析(r值)

3 讨论

近年研究发现〔3〕，脑缺血缺氧造成的能量代谢障碍、兴奋性神经介质释放、钙过量内流、自由基反应、细胞死亡等一系列缺血性连锁反应是导致缺血性脑损害的中心环节。IL-6和TNF-α是一类具有免疫调节与效应功能的多肽类细胞因子，主要由单核巨噬细胞和T淋巴细胞产生。IL-6的生理功能非常复杂，正常神经细胞表达低浓度的IL-6，除具有神经营养和神经保护作用外，还可介导炎症、脱髓鞘和胶质增生。Harada等〔4〕研究发现缺血再灌注后IL-6水平明显增高，可使基质金属蛋酶-1(MMP-1)表达增高而导致组织损伤。而Rosenberg等〔5〕又发现MMP-1参与了缺血性脑损伤与再灌注后血脑屏障开放，而血脑屏障破坏后可引起脑损伤加重。这表明急性脑梗死发生后高浓度的IL-6参与了神经损伤。

IL-8具有趋化和激活中性粒细胞的作用，使中性粒细胞弹性蛋白酶释放，生成活性氧化代谢物，引起组织浸润反应;并能调节黏附分子的表达，增强白细胞与内皮细胞的黏附。TNF主要由被激活的单核/巨噬细胞分泌，适量分泌可发挥免疫调节作用;但分泌过多或失调时则引起免疫损伤，导致感染性休克和多器官衰竭。TNF-α既是有效的肿瘤杀伤因子，又是机体炎症及免疫应答的重要调节因子。目前多数研究支持脑缺血性疾病中 TNF-α 的表达具有神经毒性作用〔6，7〕。

Ferrarese等〔8〕经临床研究发现，在脑梗死发病过程中不仅病灶局部、脑脊液中各种炎性因子水平升高，外周血中TNF-α与IL-6的表达、释放也明显激活，并呈现时相规律。本实验结果显示，急性脑梗死患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平显著升高，IL-6、IL-8于第4天达峰值，再逐渐下降，TNF-α浓度于发病后第1天即升高达峰值，此后保持高水平表达。另外，本次研究中发现脑梗死灶的大小具有明显的时相变化，而急性期IL-6、IL-8、TNF-α水平明显高于恢复期且与梗死灶大小密切相关，梗死灶越大者 IL-6、IL-8、TNF-α 水平越高。这提示 IL-6、IL-8、TNF-α水平的增高程度与神经功能缺损程度及梗死体积大小密切相关，各因子可能参与脑梗死早期的炎症反应及再灌注损伤并在其中起重要作用〔9〕。

大量临床病理研究证明〔10〕，急性脑梗死病情轻重和预后的决定因素是闭塞血管及其引起的脑梗死灶的大小、位置。血清IL-6、IL-8、TNF-α的动态变化不仅提示了脑梗死急性期机体免疫系统激活的状态，反映机体对脑梗死的应激反应程度，还能为临床上早期诊断、预测病灶大小提供证据。本研究例数尚少，这方面的研究还待进一步探讨。

1 蔡志友，晏 勇，余昌胤，等.急性脑梗死患者血清IL-6、TNF-α和应激性高血糖的相关性研究〔J〕.中国老年学杂志，2009;29(22):2851-3.

2 全国第四届脑血管疾病学术会议.各类脑血管疾病诊断要点(1995)〔J〕.中华神经科杂志，1996;29(6):379-83.

3 任金生.急性脑梗死脑损害的病理机制和中西医疗效观察〔J〕.中国实用神经疾病杂志，2010;13(5):14-6.

4 Sbibata M，Ueshima K，Harada M，et al.Effect of magnesium sulfate pretreatment and significance of matrix metallopruteinase-1 and interleukin-6 levels in coronary reperfusion therapy for patients with acute myocardial infarchtion〔J〕.Angiology，1999;50(7):573-82.

5 Rosenberg GA，Estrada EY，Dencoff JE.Matrix metalloproteinase and TIMPS are associated with blood-brain barrier opening after reperfusion in rat brain〔J〕.Stroke，1998;29(5):2189-95.

6 张清华，崔元孝，刘敬花，等.老年脑梗死病人血清细胞因子含量及其动态变化〔J〕.中国老年学杂志，2009;29(18):2310-2.

7 张 洁，郭恒怡.肿瘤坏死因子-α在缺血性脑卒中中的损伤作用〔J〕.国外医学·脑血管疾病分册，2004;12(8):597-600.

8 Ferrarese C，Mascarucci P，Zoia C，et al.Increased cytokine release from peripheral blood cells after acute stroke〔J〕.J Cereb Blood Flow Metab，1999;19(9):1004-9.

9 齐建祥，包玉双，任秀乾，等.人参川芎嗪注射液对急性脑梗死患者血清IL-6、sICAM-1和TNF-α的影响〔J〕.中国老年学杂志，2010;30(12):1732-3.

10 马青峰，贾建平，薛素芳，等.急性脑梗死患者血管异常与CT灌注成像及临床预后关系的研究〔J〕.首都医科大学学报，2010;31(2):149-53.