不同发育期黄牛血浆 心肌中心钠素的测定

沈明华，李 莉，俞红贤

（青海大学农牧学院，青海 西宁 810016）

心钠素是通过自分泌、旁分泌、胞内分泌及周身分泌而产生的心源性的肽类激素，也称心房利钠多肽（atrial natriuretic peptide，ANP）。ANP主要存在于哺乳动物的心房肌细胞的胞浆中，具有强大的利钠、利尿、扩张血管、减少血容量、降低血压、参与水盐代谢的作用，此外ANP在肺循环中也有重要的作用，可抑制去甲肾上腺素、血管紧张素、组胺、5-HT等引起的肺动脉和支气管收缩，同时还具有促进肺泡表面活性物质的分泌而改善肺通气防止肺水肿发生的功能；在脑组织视上核，ANP提高渗透压阈值，抑制渴阈从而使机体适应提高了渗透压的内环境；在胰脏，调整胰腺内分泌，促进胰腺外分泌，从而促进消化功能；在胃肠道促进对盐的吸收，从而促进吸收功能；还具有增强巨噬细胞吞噬，增强免疫功能等等。研究表明，ANP对心脏功能的调节具有重要作用，血浆ANP含量和心肌组织中ANP的变化反映了心脏内分泌功能改变的情况。当前对ANP的生理、生化、药理及临床应用的研究正逐步完善，为了探讨ANP分泌调节与生长发育期的关系，笔者等对1日龄、1月龄、6月龄、成年等不同发育期的黄牛血浆、心肌中ANP含量进行了测定，报告结果如下。

1 材料与方法

1.1 试验动物 山东省莱芜市某牛场（海拔400m左右）黄牛，按出生年龄分为1日龄、1月龄、6月龄、成年组（13周岁左右）4组，每组5头份，不分性别，均临床健康，营养状况良好。血样在屠宰前颈静脉采血，用10%EDTA-Na2及抑肽酶抗凝分离血浆，-20℃冷冻保存，心肌组织在屠宰后液氮保存送实验室备用。

1.2 仪器和试剂 自动放免仪（中国科大中佳公司提供），ANP放射免疫分析药盒，购自中国原子能科学研究院同位素研究所，批号：S10950119。

1.3 测定方法 血浆ANP测定按试剂盒说明书操作；心肌组织解冻后滤纸吸去表面残血，分别精确称取50mg，加入1mL 0.05mol／L Tris-HCl缓冲液（pH值=7.2）碾磨，沸水浴中10min，制成匀浆，4℃～3000r／min离心15min，取上清液按试剂盒说明书操作测定ANP含量。

1.4 数据处理 所有数据采用SPSS（11.0版）软件进行方差分析及Duncan′s多重比较，组间差异用t检验，数据以均数±标准差（）表示。

2 结果

不同发育期黄牛血浆和心肌组织中的ANP含量见表1。

表1 不同发育期黄牛血浆、心肌中ANP的含量 （pmol／L）

1日龄组血浆中ANP含量低于其他3个年龄组，差异显著（P＜0.05），1月龄组已达到与成年组相同水平（P＞0.05）。随着年龄的增加左右心房肌中ANP含量逐渐增加，到6月龄时差异显著（P＜0.05），而左右心室肌中ANP含量无明显变化（P＞0.05）。

心房肌中ANP的含量明显高于血浆和心室肌（P＜0.01），6月龄组左、右心房肌中ANP的含量均显著高于1日龄组和1月龄组（P＜0.05）。每个年龄组心肌不同部位ANP的测定结果显示，ANP含量有多至少依次为：左心房、右心房、右心室、左心室。

3 讨论

3.1 ANP是近年发现的动物活性多肽，广泛分布于心、肺、肾及神经系统中。能调节心脏功能、改善心律失常、增加微循环，具有舒张冠状动脉及肺动脉，增加心肌供血和提高微循环血流量的作用，ANP可通过利钠、利尿作用减少容量负荷，改善心功能，还可作为神经递质影响神经细胞的兴奋性 ，调节某些激素的释放。因此，内源性ANP增加是机体重要的保护性代偿反应，对维持心血管系统功能稳定起重要作用［1］。本试验中随着年龄的增长黄牛血液中ANP的含量显著增加（P＜0.05），心房肌中ANP含量逐渐增加，到6月龄时差异显著（P＜0.05）。可以看出随着黄牛机体的不断发育，其循环系统功能逐渐提高，心房肌处于分泌活跃的释放状态，对心肌和肺脏都起到一种很好的代偿性保护作用，揭示了黄牛心脏具有很好的适应能力和良好的内分泌调节机制。

3.2 多数研究认为，ANP主要由心房合成分泌 ，也有研究发现肺及心室也参与ANP的分泌和合成［2］。本试验中，不同年龄段黄牛心房肌中ANP的含量均明显高于血浆和心室肌（P＜0.01）。各年龄段黄牛心肌不同部位分泌结果显示，ANP分泌有多至少依次为：左心房、右心房、右心室、左心室，表明心房是分泌ANP的主要部位，且以左侧心房肌分泌居多。

3.3 本研究中，1日龄黄牛血浆中ANP含量显著低于其他3个年龄组；其他3个年龄组之间差异不显著（P＞0.05）。据罗世生等［3］报道，胎儿及新生儿早期ANP较成人高，这是新生儿为适应生后循环变化的一种生理调节过程，也是导致新生儿早期生理性体重下降和早产儿低钠血症的直接原因，随着年龄的增长，心肌ANP含量降低，提示这种代偿能力随年龄增长进行性减弱。李莉等［4］报道，牦牛随着年龄的增长血液中的ANP含量逐渐降低，而本试验中黄牛随着年龄的增长血液中ANP含量呈逐渐增高趋势（P＜0.01），且1日龄和1月龄时黄牛血浆中ANP含量均低于相同年龄段牦牛，到了6月龄和成年时均显著高于相同年龄段牦牛（P＜0.05），这与李莉报道的牦牛随年龄的增长血浆中ANP含量呈现递减趋势有所不同，这是否与动物品种或动物所生活的环境有关，有待进一步研究。

［1］Grlnstead W C，Young J B.The myocardial renin-angiotensin system：existence，importance and clinical implications［J］.Am Heart，1992，123：1039-1045.

［2］乔珊，孙艳荪，王小花.睡眠呼吸暂停／低通气综合征患者心钠素变化及意义［J］.中国呼吸与危重监护杂志，2004，3：43-46.

［3］罗世生，徐昭文.心房利钠多肽的某些研究进展［J］.临床荟萃，1994，9（10）：442-445.

［4］李莉，俞红贤.不同发育期牦牛血浆和心肌中心钠素的测定意义［J］.中国兽医杂志，2007，43（3）：13-14.