单硝酸异山梨酯缓释胶囊（Ⅳ）中异山梨醇的薄层色谱杂质检查

黄 雷 李 壮 闵 奇 张春宏

（1 锦州市食品药品检验所，辽宁 锦州 121000；2 大连市食品药品检验所，辽宁 大连 116021）

在检验过程中，发现的问题是：照原标准做（国家食品药品监督管理局国家药品标准73册），对照品溶液不显斑点。于是从：①对照品溶液配制；②显色条件，这两方面进行一些考察。

1 仪器与材料

硅胶GF254薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号：20100525），紫外分析仪（WD-9403B），BP-211D型电子天平，异山梨醇对照品（批号：1352008）

2 试验方法及结果

2.1 供试品溶液的制备

精密称取本品内容物的细粉适量（约相当于单硝酸异山梨酯125mg），置25mL量瓶中，加无水乙醇适量，超声处理10min，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取异山梨醇对照品10mg，置200mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 薄层检查

照薄层色谱法（中国药典2005年版二部附录V B）[1]试验，吸取上述两种溶液各20μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-无水乙醇（2∶1）为展开剂，展开后，晾干，喷以新鲜制备的碱性高锰酸钾溶液（取高锰酸钾0.25g，氢氧化钠2g，加水100mL溶解，即得），置105℃加热约5min，立即检视。供试品溶液如显与异山梨醇相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深（1.0%）。

试验结果证明两点：①点样量（或者配制的浓度）至少是原标准的4倍，对照品溶液才可以得到确定清晰的斑点。②显色条件，综合进行254nm与显色剂两方面的考察，发现最佳显色条件是喷显色剂后，在105℃温度下稍微加热。而不是如标准规定，即喷显色剂后，在105℃温度下加热5min。如果按照标准操作，不论多大浓度的标准品斑点都看不清楚。见图1～图4。

图1 完全按标准操作，一倍量浓度，喷显色剂，于105℃加热5min，未显对照品斑点

图2 图中显示的是加大对照品溶液浓度，展开未喷显色剂的情况。于254nm紫外灯下检视。从图中可以看出，异山梨醇对照液其浓度为标准规定浓度的二倍与四倍量时未出现斑点，八倍量斑点模糊，十六倍量斑点清晰。所有的供试品溶液斑点清晰

图3 图中显示的是展开后，喷显色剂，在白光下立即检视的情况。从图中可以看出，异山梨醇对照液浓度为标准规定的浓度的二倍点未出现，四倍、八倍、十六倍点清晰，在Rf=0.2处。所有的供试品溶液斑点清晰

图4 图中显示的是喷显色剂，于105℃稍稍加热，在白光下立即检视的情况。此时的各个斑点最为清晰。显示出的对照液系列斑点已经用铅笔做标注

在试验中，点样量的倍增是通过极大的增加溶液的浓度，极大的减小点样体积来实现的。这样做有两点目的：①通过减少点样的时间来防止氧化；②减少点样体积来减少点的扩散。

3 讨 论

由于按原标准方法检验，未能达到检验目的，经过反复实验摸索其结果证明两点：①点样量（或者配制的浓度）至少是原标准的4倍，对照品溶液得到确定清晰的斑点，才可以作为供试品的对照和参考。②显色条件，最佳显色条件是喷显色剂后，在105℃温度下稍微加热，呈清晰的斑点。此方法重现性好，简单便捷[1]。

[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典二部(2005年版)[S].北京:化学工业出版社,2005.