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幽门螺杆菌与胆囊结石相关性的研究

2011-08-05孙和平郭定刚吴建国

医学理论与实践 2011年17期
关键词:胆道螺杆菌胆汁

孙和平 郭定刚 吴建国

浙江省温岭市中医院 317500

消化道溃疡病的发生与H.pylori感染密切相关已无争议,然而胆囊结石的发生是否与H.pylori感染有关目前还难以定论,很多学者做了相关的研究,发现胆囊结石患者的胆囊黏膜、胆汁、结石中均发现有H.pylori活动的踪迹,推出 H.pylori的感染可能导致胆囊结石的发生,本文选择消化道溃疡患者为研究对象,验证其中的H.pylori感染与胆囊结石的相关性,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2008年9月1日-2010年5月31日在我院住院治疗的87例上消化道溃疡患者,根据快速尿素酶试验法检测H.pylori,分为H.pylori阳性组及H.pylori阴性组,比较两组的胆囊结石患病率。H.pylori阳性组35例,男26例,女9例,年龄31~86岁,平均年龄55.6岁,其中胃溃疡9例,十二指肠溃疡20例,复合溃疡6例,B超检查见胆囊结石2例;H.pylori阴性组52例,男38例,女14例,年龄23~87岁,平均年龄58.7岁,其中胃溃疡8例,十二指肠溃疡32例,复合溃疡12例,B超检查见胆囊结石6例。两组病例在性别、年龄组成上有无差异。入选标准:2008年9月1日-2010年5月31日在我院住院治疗,并行胃镜、胆囊B超、H.pylori检查的病例;剔除标准:缺少上述3项检查之一者,既往曾有过抗H.pylori治疗史的病例。

1.2 方法 所有患者入院后均行腹部B超、胃镜检查及H.pylori检测,行纤维胃镜检查时,于胃窦部距幽门口3~5cm处大弯侧钳取活组织一块,采用福建三强生物化工有限公司提供的诊断试剂盒,将进行涂片后的黏膜浸于快速尿素酶液中,观察5min,试剂由黄色变成红色为阳性,无变化为阴性。

1.3 统计处理 采用SPSS18.0统计软件包处理数据,采用χ2检验,以P<0.05为有统计学意义。

2 结果

HP阴性组患者胆囊结石患病率为11.54%,H.pylori阳性组胆囊结石患病率为5.71%,χ2=0.0034,P>0.05,H.pylori阴性组的胆囊结石患病率高于H.pylori阳性组,然而统计学显示两者无显著差异,详见表1。

表1 两组胆囊结石患病率比较

3 讨论

胆囊结石大多是胆固醇类结石,传统认为是由于胆汁中胆固醇过饱和、胆汁中胆固醇成核过程异常以及胆囊功能异常等因素共同作用下形成,较少考虑到细菌的作用,直到1995年,Swidsinski等[1]采用分子生物学方法,在胆固醇结石中分离到细菌DNA,并进行扩增、克隆和测序,证明胆固醇结石中存在细菌,使得人们开始考虑细菌在胆固醇结石发病机制中的作用。此后Figura等[2]的研究进一步提出,H.pylori感染及H.pylori相关抗原可能是促进胆石形成的潜在危险因素。此后有很多学者通过不同的方法对胆囊标本的胆囊黏膜、胆汁、胆石进行细菌检测,结果大相径庭,有报道上述样本中存在H.pylori DNA,也有人报道未发现,但细菌培养的结果基本一致,无幽门螺杆菌生长。Fox等[3]利用特异性的螺杆菌16SrRNA基因引物,对23例慢性胆囊炎患者的胆汁和胆囊黏膜行PCR检测,其中13例胆汁和9例胆囊黏膜为阳性,并经16SrRNA序列鉴定为 Helicobacter bilis,Helicobacter pullorum和Flex-ispira rappini,提示除了普通细菌以外,胆道疾病还可能与耐胆汁的螺杆菌感染有关,但Fox鉴定的结果并非是幽门螺杆菌。Rudi等[4]重复了Fox的实验,报告50例标本通过培养及多种螺杆菌16SrRNA基因引物经PCR和Southern印迹法检测均无阳性,并认为两者间无明显相关性,抑或由地域差异引起。Robert等[5]同样采用16S rRNA的方法也未能从胆囊结石患者胆汁中检出H.pylori DNA;Chen等[6]虽从胆囊结石胆汁中检出H.pylori DNA,但与无结石组间无差异,从而认为H.pylori并未参与胆囊结石的形成。Silva等[7]应用PCR检测方法,发现H.pylori DNA在胆结石患者的胆汁、胆囊组织中的检出率分别为31.3%、42.9%,但对胆结石患者的胆囊黏膜、胆汁进行细菌培养,未见H.pylori生长。国内田志杰等[8]采用敏感性和特异性都较高的NP2PCR技术,对44例患者的胆囊结石核心,胆汁和胆囊黏膜进行螺杆菌16SrRNA基因片段检测,发现螺杆菌DNA存在于胆囊结石、胆汁及胆囊黏膜中,但无法排除胆道中检测到的细菌就是H.pylori或为与H.pylori相似的其他螺杆菌属细菌,胆汁和胆囊黏膜标本经需氧、厌氧和微需氧培养均未发现螺杆菌属细菌生长。朱玉娟[9]120例胆囊结石患者胆汁、黏膜和胆石进行H.pylori培养,并以Ure A和CagA作引物进行扩增,培养结果为无H.pylori生长,使用PCR方法也未检测到H.pylori DNA及 H.pylori CagA抗体,从而认为H.pylori可能经Oddi’s括约肌逆行的进入胆道,但与胆囊结石并无明确相关性。顾建平[10]等通过对胆固醇结石及对照组进行碳13呼气试验和血清幽门螺杆菌IgG抗体检测,结果显示两组间无差异,再通过胆汁和胆囊黏膜标本接种于微需氧和厌氧培养基培养,并采用PCR技术扩增幽门螺杆菌特异的Ure A基因,也显示胆囊结石与非结石对照组间无显著差异。王春敏[11]等通过对7929例被检人群的幽门螺杆菌感染与良性胆囊疾病的检测,得出胆囊结石与H.pylori感染无明确相关性。这与本文结果基本一致。

可见,虽然目前的研究,有部分学者在胆道结石患者的胆囊黏膜、胆汁、结石中检测到了H.pylori DNA的存在,推测幽门螺杆菌的感染可能导致胆道结石的生成,然而作为检测的金标准,胆道组织及胆汁中培养出H.pylori,至今尚无成功报道,使得H.pylori感染导致胆道结石的生成停留于理论阶段,这有待于以后更加深入的研究。

[1] Swidsinski A,Ludwig W,Pahlig H,et al.Molecular genetic evidence of bacterial colonization of cholesterol gallstones〔J〕.Gastroenterology,1995,108(3):860-864.

[2] Figura N,Cetta F,Angelico M,et al.Most Helicobacter pylori infected patients have specific antibodies,and some also have H.pylori antigens and genomic material in bile〔J〕.Dig Dis Sci,1998,43(4):854-862.

[3] Fox JG,Dewhirst FE,Shen Z,et al.Hepatic Helicobacter species identified in bile and gallbladder tissue from Chileans with chronic cholecystitis〔J〕.Gastroenterology,1998,114(4):755-763.

[4] Rudi J,Rudy A,Maiwald M,et al.Helicobacter sp.are not detectable in bile from German patients with biliary diseases〔J〕.Gastroenterology,1999,116(4):1016.

[5] Robert R,Ernst J.Helicobacter species are notdetectable by 16sr DNA PCR in bile from dutch patientswith common〔J〕.Bile Duct Digestion,2002,66(1):89-91.

[6] Chen W,Li D,CannanRJ,et al.Common pesence of Helicobacter DNA in the gallbladder of patients with gallstone diseases and controls〔J〕.Dig Liver Dis,2003,35(4):237-243.

[7] Silva CP,Pereir-Lima JC,Oliveira AG,et al.A ssociation of the presence of Helicobacter in gallbladder tissue with cholelithisasis and cholecystitis〔J〕.J Clin Microbiol,2003,41(12):5615-5618.

[8] 田志杰,韩天权,姜志宏,等.胆囊结石病胆道系统螺杆菌DNA的研究〔J〕.中国实用外科杂志,2004,2(24):84-87.

[9] 朱玉娟,谢健,周卫东,等.幽门螺杆菌感染与胆囊结石形成的相关性分析〔J〕.重庆医科大学学报,2005,30(5):694-696.

[10] 顾建平,黄桂余,徐子平,等.胆固醇结石患者胆道系统幽门螺杆菌研究〔J〕.中国普通外科杂志,2005,14(8):18-19

[11] 王春敏,杨一.胆囊疾病与幽门螺杆菌感染的相关性分析〔J〕.江苏医药,2009,35(7):839-840.

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