非小细胞肺癌癌组织中DEK蛋白表达及意义

林黎娟，金 政，王 研，张晓燕，蔡英兰*

(1辽东学院医学院影像系，辽宁丹东 118002;2延边大学医学院;3沈阳市第五人民医院)

肺癌的发病率较高，但目前对肺癌发生、发展的相关基因认识仍有限［1］。有研究表明，DEK蛋白与人类多种肿瘤的发生、发展有密切关系［2］，但目前国内有关肺癌组织中DEK蛋白的相关报道鲜见。2006年9月～2008年12月，我们采用免疫组化SP法检测了48份非小细胞肺癌(NSCLC)组织中DEK蛋白表达，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 行手术切除的NSCLC标本48份，患者男37例，女11例;年龄23～76岁，平均47.3岁。术后病理证实为肺腺癌36例，鳞癌12例，其中高分化12例，中等分化33例，低分化3例;肿块≤3 cm者23例，＞3 cm者25例;伴有淋巴结或/和胸膜、支气管软骨侵犯29例，所有患者术前均未经化疗，无远处脏器转移。另选择48份癌旁良性组织作对照。

1.2 DEK蛋白表达检测及结果判定 采用免疫组化SP法。常规石蜡病理切片4 μm，脱蜡、水化，柠檬酸盐抗原修复液中修复，PBS漂洗，置入30 ml/L H2O210 min，正常血清37℃孵育15 min，加入一抗(抗DEK单克隆抗体，1∶50稀释;空白对照中以PBS代替一抗)4℃冰箱孵育过夜，加入二抗(生物素标记抗IgG抗体及辣根过氧化物酶标记抗IgG抗体)37℃孵育60 min，DAB显色，苏木精复染细胞核，中性树胶封片。参考Mathew等［3］的分级标准进行结果判定，DEK阳性着色于细胞核。无着色为－;着色细胞数＜50%或染色较浅为+;着色细胞数＞50%且染色较深为++;+和++均为阳性表达。

1.3 统计学方法 应用SPSS11.0统计学软件，率的比较行χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

DEK蛋白在癌组织及癌旁组织的阳性表达率分别为 84.4%(35/48)、6.7%(3/48)，P=0.000。DEK蛋白表达与NSCLC临床病理学特征的关系见表1。

表1 DEK蛋白表达与NSCLC临床病理特征的关系

3 讨论

DEK蛋白是一种原癌蛋白，1992年其被首次从急性髓系白血病(AML)的一种亚型中以DEK-CAN融合蛋白形式分离出来［4］。在很多人类的侵袭性肿瘤如视网膜母细胞瘤、结肠癌、膀胱癌、宫颈癌、恶性胶质瘤、黑色素瘤以及成年人急性白血病中，DEK蛋白均出现过表达［2］。目前关于DEK蛋白与肺癌发生、发展的关系报道少见。

本研究结果显示，DEK蛋白在NSCLC组织中阳性表达率明显高于癌旁组织，说明DEK蛋白与NSCLC的发生、发展有一定关系，但DEK蛋白的具体作用机制仍不明了。有研究表明，DEK蛋白与染色质重构及基因转录有关，对细胞凋亡具有重要作用［4］;此外，DEK蛋白是一种核磷酸化蛋白，DEK蛋白磷酸化是DEK蛋白的一种重要的翻译后修饰，DEK蛋白的磷酸化水平与细胞凋亡密切相关，诱导细胞凋亡时DEK蛋白的磷酸化水平降低［5］。有学者用携带DEK基因的腺病毒侵染HeLa细胞，侵染Ad-DEK组细胞凋亡的比例仅为对照组细胞的50%，提示DEK蛋白可能通过抑制细胞凋亡刺激HeLa细胞生长［6］;Carro 等［7］通过 DEK 与 Ki-67 表达相关性得出，DEK过表达与肿瘤细胞增殖率密切相关，国内学者亦证实DEK蛋白与宫颈癌细胞增殖密切相关［8］。故我们推测在NSCLC发生、发展中可能存在DEK蛋白的磷酸化修饰过程，从而抑制细胞凋亡、促进细胞增殖。另外本研究发现，DEK蛋白在NSCLC中的表达与肿瘤体积、组织分化程度有密切关系。因此我们认为DEK蛋白可能对NSCLC预后判断有一定参考价值，但本研究样本量较少、无临床分期，且病理类型只有腺癌和鳞癌，DEK蛋白与NSCLC进展的关系有待进一步扩大样本研究。

［1］谭明旗，张秀娟，周卓，等.Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌中的表达及意义［J］.中国现代医学杂志，2007，17(23):2924-2927.

［2］华颖，胡红刚，彭向雷，等.DEK蛋白与细胞凋亡的研究进展［J］.中国科学 C 辑:生命科学，2009，39(5):434-440.

［3］Mathew J，Hines JE，Obafunwa JO，et al.CD44is expressed in hepatocellular carcinomas showing vascular invasion［J］.J Pathol，1996，179(1):74-83.

［4］Wise-Draper TM，Allen HV，Jones EE，et al.Apoptosis inhibition by the human DEK oncoprotein involves interference with p53 functions［J］.Mol Cell Biol，2006，26(20):7506-7519.

［5］Wise-Draper TM，Mintz-Cole RA，Morris TA，et al.Overexpression of the cellular DEK protein promotes epithelial transformation in vitro and in vivo［J］.Cancer Res，2009，69(5):1792-1799.

［6］Tabbert A，Kappes F，Knippers R，et al.Hypophosphorylation of the architectural chromatin protein DEK in death-receptor-induced apoptosis revealed by the isotope coded protein label proteomic platform［J］.Proteomics，2006，6(21):5758-5772.

［7］Carro MS，Spige FM，Quarto M，et al.DEK expression is controlled by E2F and deregulated in diverse tumor types［J］.Cell Cycle，2006，5(11):1202-1207.

［8］刘双萍，金京春，韩艳，等.子宫颈病变中DEK和Ki-67蛋白过表达及其意义［J］.临床与实验病理学杂志，2010，26(2):187-190.