浅谈生化仪的应用

贺旭东(辽宁省 中医药大学附属医院检验科 110032)

目前，随着全自动生化分析仪的应用的普及，对全自动生化仪器的应用越来越显得重要，一般情况下，厂家在装机后只进行简单的应用培训，或者，有时有些功能即使厂家在培训时已经讲解了，但，我们的工作人员很难在极短的时间内把厂家工程师所讲解的大量的学习内容完全的吸收、消化、理解、并应用。一般情况下只能掌握比较重要的基础操作和一般的仪器的日常保养;并且有时有些功能厂家工程师因为时间关系或某些特殊原因，只能做演示性的讲解。同时，当仪器的数据达不到某种量时，无法真正展示某些功能，这就要求我们的工作人员在厂家工程师培训结束后，能够详细的看厂家配给的仪器说明书，把一些功能开发、完善起来。但，看说明书就像看教科书一样，有时没有一本好的辅导书，教科书上的某些问题很难理解，很多情况下，很多人因此无法把说明书通读，有时即使通读了厂家的说明书，但对于书中所说的某些关键的技术问题却无法理解，更不用说融会贯通，以及应用了。因为说明书就像教科书一样，不可能编写成读书笔记的样式，所以，对于生化仪器的操作，很多检验科的工作人员一直希望拿到一本类似读书笔记一样的操作详解，就好像一个自学的人希望能拿到一本同期某名校的尖子生的课堂笔记一样，特别是对那些在仪器装机时，不在生化室工作，但因检验科工作是轮转的，几年后轮转到生化室工作的老师，尤其更加显得重要，因为，说明书写的太生硬，SOP文件又写的太简单;而在轮组工作交接班时，一般情况下，老人带新人时，一般只能把仪器的基本操作介绍给新人，所介绍的内容一般情况下仅限于最基本的操作，有时，某些医院会找仪器厂家派工程师再次培训仪器的操作及保养。但更多的时候是仅仅老带新仅仅会操作能进行检验标本发报告，关于仪器的保养一般情况下是经过几次换班后保养基本不做了，更不用说仪器的各种独特的功能的开发利用，以及仪器故障的处理了，目前我们职称晋级考的是理论知识，要得是论文的数量及级别;没人会考你仪器的操作，保养，故障的排除，结果的分析(仪器或试剂原因导致的非正常结果)。甚至有人说，生化只要定标通过了，质控合格了就可以发报告了。其实，这只说对了一部分，因为定标通过、质控合格仅是发报告的必要条件，而不是充分条件。在临床工作中我们经常会遇到因为试剂交叉污染，仪器故障等导致结果无法正确发出。这就要求我们的工作人员，能够正确选择试剂，熟悉机器的性能，清楚仪器的正常工作状态，及时发现不正常的仪器状态，避免不正确的结果的错误的发出，误导临床。

本人结合自己十多年的生化工作经验，总结了OLYMPUSAU全自动生化仪的一些操作，保养，以及一些故障的处理，在这里介绍给那些初学者，同时也希望有高水平的老师批评指正。

本文以AU400为例，原因是AU400是OLYMPUS最小的机型(恒速400TEST/小时)，它面对的是基层医疗单位，数量多，而AU640与AU400相差非常小，AU2700和AU5400虽与AU400差的大一点，但大体相同，并且应用 AU2700和 AU5400的用户一般是大型医院，均有高水平的老师在操作仪器。

仪器安装好后，首先要对空机进行参数设定(OLYMPUS机器试剂通道是全开放的，无论原厂试剂还是非原厂试剂均使用相同的通道，通常试剂厂家只要不是特小的，均会提供上机参数，我们只需如何把参数输入仪器即可。

在介绍输入参数之前，首先要把仪器的开机以及工作版面介绍一下。

1 开机

1.1 开机前准备工作

1.1.1 检查水源

AU400生化仪器一般厂家安装时均配有去离子水机，我们要看一下水机的贮水容器中是否有水，出水阀门是否打开。

1.1.2 检查电源

一般情况下AU400安装时会配备容量5KVA的不断电不间断电源(UPS)。

检查UPS电源应该处在断电保护(Inverter)及AC灯亮的工作状态。

1.1.3 检查清洗液量

检查A、B清洗液桶内液面，如不足请加满。一些新款的机器只有B清洗液桶。同时检查W1位有否清洗液。

1.1.4 检查样品、试剂分配器及样品针、试剂针、搅拌棒是否正常。

1.1.5 检查样品架收集槽内有无样品架，如有样品架请移空。

提示:仪器在收集槽内里端有一个传感器，如果里端有架子，仪器会报收集槽内架子满。经常有的老师说，收集槽内只有一个架子，没满呀，怎么报满呀?其实是因为仅有的一个架子正好在里端的传感器位置上。

1.1.6 放试剂盘

请在开机前将放有试剂瓶的试剂盘放入相应的试剂仓中。如果开机后再放试剂盘，

将无法使用选择性查试剂方式，仅可使用ALL(全查)。

1.2 开机

AU640有三种开机方式:总关机后开机、待机状态下开机和自动开机。

1.2.1 总关机后开机总关机是指按“EM STOP”键关机后再开机。此状态下开机需先按仪器右侧的白色(RESET)键，按键后可听见冰箱启动声音。

再按白键旁边的绿色(ON)按键，仪器及计算机将启动。

1.2.2 待机状态下开机(绝大多数用户采用此方式)

用END关机后保持冰箱继续开启为待机状态。

此状态下开机仅需要按“ON”按键，仪器及计算机将启动。

1.2.3 自动开机

AU400可以在系统参数内或者在关机窗口内预先设定每天或第二天的自动开机时间。自动开机必须在待机状态下才可以执行。

在设定的时刻仪器及计算机将自动启动。

1.2.4 仪器初始化

在任一种方式下开机启动后，计算机屏幕出现＜Program download to the analyzer＞(程序下载)后将自动进入到AU400程序的＜Start Condition＞(起始菜单)。同时仪器将自动运行＜INITAL＞(初始化)程序使仪器各部分做复位动作后，仪器转到＜WARM UP＞(预热)状态。

1.2.5 强制结束预热状态

因某种原因操作者需要尽快开始工作，可以执行菜单(A)—(B)Standby Set

操作，使仪器马上结束预热并转到＜STANDBY＞状态。

1.3 起始条件设定

在任何一种开机方式下启动后程序都会自动进到并停留在 ＜Start Condition＞(起始)

菜单。AU400的数据管理方式有历史数据存储功能的。它可以储存90个工作表。

每次进入时，在Start Condition菜单的Data Index(数据索引)处默认最近一个工作表，如果我们不做选择，直接按两次F2，机器将认为你继续使用目前的工作表，样品号码接在此时工作表的尾部。一般每天首次开机时选择“1.Current Time”，将建立一个空的数据文件。鼠标点击两次“Exit”或按(F2)键，可以退出此菜单。进入主菜单屏幕。

退出起始菜单的同时，试剂盘将自动检查试剂瓶位置。

1.2.6 24 小时连续开机

如果仪器用在24小时连续工作方式，建议用户在每天的第一次测定开始前，从主菜单进入＜Start Condition＞(起始)菜单，将Data Index(数据索引)设置为当天的日期索引。同时“Serum Start No”(起始样品号)复位到0001号。开机过程结束。

2 主屏幕显示及系统状态图标的功能介绍

2.1 如何观察屏幕显示–主屏幕显示名称

下图显示屏幕上的基本显示模型

2.1.1 状态显示

用状态名称显示系统操作状态。STANDBY是待机状态，WARM UP是温度上升状态，前面已经介绍了如何强转到待机状态。MEAS1是连续测定状态，指样品是处于连续测定状态;MEAS2是指没有新的样品架了，可以按F9开始新的标本号测定了，MEAS3指所有标本均已经加样结束，如果有新标本可以按F9进行新的标本测定了，MEAS4是指机器已经进入清洗状态，本批结果均已经报出，STOP是停止，可用F12功能键在STANDBY和STOP之间切换，如果STOP不能切换到STANDBY，机器会有相应的报警信息。

2.1.2 系统日期和时间显示系统内置日期和时间。

2.1.3 菜单条

显示屏幕操作的6个菜单项目:［Routine］，［Parameters］，［Auxiliary］，［Maintenance］，［User］，和［Logout］。每个菜单的前面的小括号内的字母是快捷命令，工程师电话指导时经常用到，我们学习记笔记时也非常方便。［User］装机时是空的，是后建立的用户菜单，(P)—(S)—(U)中进行设定。

2.1.4 下拉菜单

如果选择菜单项目的一条，将显示下拉菜单。每个下拉菜单的前面的小括号内的字母也是快捷命令

2.1.5 子菜单

有些下拉菜单内的菜单包括进一步的多种功能，如果选择下拉菜单内的菜单项目，将出现子菜单。

2.1.6 指南信息显示区显示主要操作的说明。

2.1.7 报警信息显示区显示发生错误或系统改变操作状态的信息。

2.2 系统状态图标的功能介绍，按系统状态键出现系统菜单。

2.2.1 菜单下方八个图标分别代表F1―F8，F9－F12代表左上方四个图标。

2.2.2 F9―开始测定，F10―试剂暂停，F11―样本架暂停，F12―总停。

2.2.3 (0)Reagent Status－试剂管理 (1)ISE ―电解质(2)Data Display―实时数据显示(3)Alarm List―报警表(4)Cuvette Status―比色杯检查(5)Analyzer Status―分析仪状态显示(6)DPR Status―数据处理系统状态显示 (7)STAT Table Status―急诊台状态显示。

2.2.4 F5 W1 Start―用水清洗比色杯(冲洗 1)。2.2.5F6 W2 Start―用酸或碱清洗比色杯(冲洗2)。(周保养项目)

2.2.6 F7Photocal Start―比色杯水空白测定。(周保养项目)

2.2.7 F8One Touch － 固定模式操作。

3 设定实验参数(这里仅简单介绍)

3.1 设置项目名称:(P)—(Y)－(A)－F4–选位置–F5(Edit)－输入名称。

3.2 设置 ROUND(P)—(Y)—(C)—F4—F5选中所设项目。

3.3 设置试剂参数(P)—(I)—F4输入试剂参数:如样品量，试剂量，波长，读书点等。

3.4 设置校正参数 (P)—(B)—(I)—F4分别设置:校正类型(AB或 MB)校正品位置(Cal.No.);浓度值 (CONC)

3.5 设置试剂位置 进入菜单“仪器状态”－(0)－F6

4 查试剂量

4.1 看剩余量，进入“仪器状态”，－(0)－F7按项目显示(或F8按试剂位置显示)，可以看到前一天剩余的试剂量。

4.2 加试剂将刚刚检查不够量的项目，添加足量。4.3查试剂加入新试剂，盖好仓盖后，按F5(Start Check)将弹出一个窗口，第一项是复位，最后一项是将所有试剂全查一遍。其他选项略。

5 编定标工作表

(U)－(C)－F4–选项目 －F4－F2

6 编工作表

进入菜单(U)－(N)－F4(Start Entry)开始编辑。用鼠标依次选择要做的项目，全部选好后，按F4(Entry确认)，此时样品号(S.No)处将自动加1，再重复上面的操作，编第二个标本的工作表…，直至所有的标本编完。(批量，组合录入略)

7 放架(蓝水标，黄标准，绿质控，白标本)

定标，质控如果不做可不放，直接放白架，架子条码向前，从左开始依次放入进样台中。

8 开始工作

以上工作都准备好后，按F9(开始)选“YES”仪器将开始测量。

提示:此时可以修改开始号码，我们输入的号码，仪器将认为是最左白架的第一孔位置上的标本号(即便此位空)，然后下一孔依次加1。

9 检查结果

9.1 实时监测结果

在＜System Status＞(仪器状态)点击＜(2)Data Display＞弹出数据显示屏幕。每一个样品的项目全部测量完成后，在此屏幕将显示该样品的测量数据。数据后面会有一些结果标志，例如:HL#D等都有相应的含义，有的操作者不看这个版面直接把结果传到中文报告机，就会漏掉很多有用的提示信息。导致一些不正确的结果无法及时发现。此处结果是实时结果，无存储功能。

9.2 编辑测量结果

在(U)—(E)菜单内选择相应的样品号，按F5或点击＜Data Display＞，可显示测量结果。

在此菜单下可以对测量结果进行编辑。被编辑过的数据后面会有一个“e”标记。

提示:在此版面下我们可以查到所检测的标本是在具体哪个架第几个孔上测定的(RACK NO项)，曾有工作人员把架前后顺序放反，导致结果错误。

9.3 校正测量结果

如果一个项目的测量结果产生了“系统误差”，可以在 (R)—(D)—(C)Data Correction数据修正菜单，用公式:Y=AX+B对结果进行批量校正。注意:对测量结果进行“编辑”或“校正”有可能引起数据输出错误。因此必须在可靠质控结果对照下，对测量结果进行“编辑”或“校正”。

10 打印及传输结果

进入菜单(U)－(O)－输入所需样品号后按F5－YES可将数据传输到中文计算机中。

11 关机

11.1 待机关机

仪器在Standby或Stop状态下按键盘的＜End＞键，将弹出“关机”窗口。在此窗口可以预制下次自动开机的时间。点击“Yes”仪器将自动关闭ANL主机及 PC(DPR)机，仪器进入“待机关机”。在此状态仪器试剂仓保持制冷(冰箱运转)，试剂可以在试剂仓内不用取出。在此状态ISE将自动做电极的定时冲洗。

11.2 总关机

在仪器转为“待机关机”后，按ANL主机上的＜EM Stop＞键，将关闭试剂仓冰箱电源，使仪器完全关闭。在此状态必须将试剂从试剂仓中取出保存。在此状态ISE将停止做电极的定时冲洗，停机时间过长会对ISE电极有影响。

注:只有特殊情况下才总关机。

11.3 保养部分

11.3.1 每日维护，看样品和试剂分配器及泵管有否渗漏，W1及主洗液量是否充足，针及搅拌棒是否有损坏。

11.3.2 每周维护，清洗样品探针、试剂探针和搅拌棒(1)进行W2(自动冲洗比色杯、搅拌棒、试剂探针和废液管路)将－60ml试剂瓶加满清洗液放入在77号位上。(注:一星期用碱性，一星期用酸性)在STAT(急诊台)W2位置放一杯相同的清洗液。进入仪器状态菜单、选择F6(W2)可进入比色杯清洗程序。(2)进行光校正(PHOTOCAL)。

进入仪器状态菜单、选择F7(PHOTOCAL)可进入光度计校正。

提示:W2和PHOTOCAL做好后，要在仪器状态菜单下进入(4)Cuvette Status，然后按 F5(CheckStart)和F6(Save)检测和存储光度计数据。

11.3.3 每月维护

(1)清洗样品探针和试剂探针冲洗池和清洗搅拌棒冲洗池提示:由于日常工作时，洗针用的是纯水，所以保养时，可以用清洗液手工清洗。

(2)清洗空气过滤片，用清水洗去灰尘，晾干即可。如果空气过滤片长时间不洗，很容易因散热问题导致一些部件受损。

(3)清洗去离子水过滤片和样品探针过滤片提示:如果过滤片过水少了，将直接导致交叉污染增大。

(4)每三个月清洗去离子水桶清洗冲洗管嘴，一定把内外全洗了，特别要注意自刷的连接管。

(5)每六个月，清洗比色杯和比色杯轮盘，比色清洗后要做光度计校正。

(6)更换光源灯 换灯泡时要关机，灯位置在样品针和比色盘之间，一手掌大小的不规则的小盖下，两个接线不分正负极，松开固定灯的大螺丝扭，灯即可拿出，安装时灯座上的开口对好定位楔，然后作W2和PHOTOCAL即可。

上面把基础操作和基础保养介绍了一下，下面介绍几个应用:

(1)(R)－(R)实时反应曲线

观察反应曲线可以解决很多问题，例如:灯泡要坏时的尖峰反应曲线，反应盘漏水时的抛物线反应曲线，变质试剂的反应曲线。定标报警时的原因分析。

(2)(R)－(C)－(T)定标监测

进入后可以看到每个项目有个K值，这个值，如果试剂稳定应该是基本在一个很小的范围内变化，根据它的变化，可以帮助我们分析试剂，定标和质控及仪器问题。例如:当某个项目K值变化很大，我们一般考虑试剂和定标液问题，如果多个项目的K值有问题，我们一般考虑仪器的问题。

(3)(R)－(C)－(S)－F5和(R)－(D)－(W)－F6组合应用的后定标功能

前者可以手工修改定标曲线，后者可以把老的试验结果按新的定标曲线重新换算结果，大大方便临床。因为以前我们都是先定标质控，质控合格后检测数据，如果某项目失控，需要定标，又没定标液了，我们只能等定标液到了，才能定标，检测标本。而OLYMPUS独特的后定标功能可以让我们上午先检测标本，下午标准液到后，定标出结果。如果定标液较长时间不能采购到，前者还可以把历史的比较好的定标曲线拉回，供我们使用，当然使用此功能时一定要慎重。

(4)(A)－(C)相关分析，在对照两组数据分析时，非常方便，例如:我们分析两个厂家的同一项目时。

(5)(A)－(S)和(A)－(H)用于统计分析临床结果的均值，分布等情况。例如二氧化碳均值一般应该在25左右，如果偏离很大，我们就应查找原因。

(6)(M)－(M)－(A)在这个版面下我们经常应用的是，看针位是否正，搅拌棒是否直。

(7)(P)－(B)－(I)和(R)－(C)－(T)的联合应用，前者可以设定试剂的K值范围，某个试剂的K值一般稳定在一定范围，通过范围的设定我们可以及时发现试剂是否变质，或仪器是否有故障，机器工作时的实际K值可以在后者中查到。以上，是本人的一点心得，供大家分享，同时也希望同行批评指正。