维吾尔药新疆赤芍的定性分析

杨媛媛

(南阳医学高等专科学校,河南 南阳 473061)

新疆赤芍(Radix Paeonia hybrida)是新疆芍药(P.sinjiangensis K.Y.Pan)和块根芍药(P.anomala L.)的统称,是与川赤芍同科同属植物,资源丰富,目前在新疆地区作为赤芍的代用品大量应用。新疆赤芍植物来源广泛,由于受产地、生长条件、采收时间、炮制方法及贮藏等因素影响,药材质量不稳定,临床应用较混乱,且伪品较多,因此有必要建立新疆赤芍的质量标准[1]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

卡玛Linomat 5半自动点样仪;卡玛reprostar 3成像系统;YX型电热恒温鼓风干燥箱(山东甄城永兴仪器厂);马弗炉(北京煤化所煤质仪器研制中心);OLYMPUS DP12显微镜(日本OLYMPUS公司);Sartorious电子天平(万分之一);高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司);硅胶G板(规格:100mm×200mm;青岛海洋化工厂分厂);薄层板加热器;DHP-120型恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂);CW-1Y自动控温冷却循环水装置等。

1.2 试剂和药品

甲醇;乙醇 ;乙醚;硫酸;醋酐;氯仿;乙酸乙酯 ;甲酸 ;盐酸;正丁醇;冰醋酸;5%香草醛的硫酸溶液;茚三酮试液;氢氧化钠;水合氯醛甘油溶液等。芍药苷对照品(批号为110736-200630);赤芍(批号为1093-200001)和川赤芍(批号为1092-200001)对照药材;甘氨酸(735-200102);丙氨酸(0873-9802);苏氨酸(889-200102);丝氨酸(631-9402);组氨酸(890-200001);精氨酸(872-200203)。以上对照品和对照药材均购自中国药品生物制品检定所。

新疆赤芍各批药材样本名称和产地见表1。经新疆药检所专家鉴定,各批药材均为毛茛科植物新疆芍药(P.sinjiangensis K.Y.Pan)或块根芍药(P.anomala L.)的根。

2 芍药苷的鉴别

2.1 化学鉴别

取药材粉末约0.5g,用乙醚加热回流1h,滤过,滤液蒸干,加醋酐与硫酸,先显黄色,渐变成红色、紫色,最后呈绿色。

2.2 薄层鉴别[2]

称取药材粉末0.5g,用乙醇10mL超声处理20min,过滤,滤液蒸干,残渣加乙醇2mL使溶解,作为供试液。另取芍药苷对照品,加乙醇制成2mg/mL的对照品溶液。吸取上述两种溶液各4μ L,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰。其薄层鉴定结果见图1。

表1 新疆赤芍各批药材样本

图1 薄层鉴别图谱

化学鉴别的结果表明实验药材中含有苷类成分;薄层鉴别的结果,供试品色谱中,在与对照品相同位置处均出现蓝色斑点,这表明各批药材样品中均含有芍药苷。

3 蛋白质和氨基酸的鉴别

3.1 化学鉴别

3.1.1 双缩脲实验

将样品粉末用6mol/L盐酸溶液在110℃烘箱中水解后,过滤,在滤液中逐渐加入硫酸铜试液,随加摇匀,溶液呈现紫红色。

3.1.2 茚三酮实验

将样品粉末用6mol/L盐酸溶液在110℃烘箱中水解后,过滤,在滤液中加入茚三酮试液,加热煮沸,待其冷却,呈现红棕色。

3.2 薄层鉴别

3.2.1 供试品的制备

精密吸取供试品溶液1mL,置水解罐中,加6mol/L的盐酸溶液约10mL,减压抽真空30min,充入氮气2min,密闭,置110℃烘箱中水解24h,冷却,80℃充氮气蒸干,用0.01mol/L的氢氧化钠溶液定容至50mL容量瓶中,过滤,即得。

3.2.2 对照品溶液的制备

取苏氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、丙氨酸和精氨酸各约7mg,精密称定,加0.01mol/L的氢氧化钠溶液分别定容至50mL容量瓶中,即得对照品溶液。

取供试品溶液及对照品溶液各5μ L,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19∶5∶5)为展开剂,展开,取出,热风吹干,喷以茚三酮试液,在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,均显红色斑点。该薄层鉴定结果见图2。

4 显微鉴别

将阿勒泰小东沟产的新疆芍药、奇台碧流河乡产的块根芍药粉末和赤芍对照药材过7号筛(120目,孔径0.125),取少许置载玻片上,用滴管滴3滴水合氯醛甘油溶液,置酒精灯上稍烤,盖上盖玻片,将制备好的样品置显微镜上,观察其各个组织,并拍摄特征部分。其显微特征见图3、图4及表2。

表2 药材粉末显微特征的比较

5 水分、浸出物和总灰分的测定

5.1 水分测定

测定各新疆赤芍药材的水分含量数据,评价其质量为进行下一步含量研究作准备。30批药材水分含量结果见表3。

表3 药材水分含量结果

在对30批药材测定的同时,也测定药典收载的赤芍,其中赤芍的水分含量是7.2%,川赤芍为7.6%,30批新疆赤芍的水分含量结果比较接近,并与药典赤芍一致。

5.2 浸出物测定

按照中国药典2005年版ⅨK浸出物测定法,从浸出物量评价新疆赤芍的品质及质量。浸出物量结果见表4。

在对30批药材测定的同时,也测定药典收载的赤芍,其中赤芍的浸出物含量是57.8%,川赤芍为52.6%,30批新疆赤芍的浸出物含量与药典赤芍一致。

5.3 总灰分测定

从药材总灰分量评价新疆赤芍的品质及质量。总灰分量测定结果见表5。

表4 浸出物量结果

表5 总灰分测定结果

在对30批药材测定的同时也测定药典收载的赤芍,其中赤芍的总灰分含量是6.3%,川赤芍为6.9%,30批新疆赤芍的总灰分含量与药典赤芍一致。

6 讨论

目前在维吾尔医院临床应用的芍药药材均为块根芍药或狭叶芍药(亦称新疆芍药)的块根[3],在新疆地区人们把新疆芍药和块根芍药统称为新疆赤芍。通过对新疆赤芍中的芍药苷和氨基酸定性分析,我们初步了解到本课题所研究的药材含有丰富的有效成分芍药苷和多种氨基酸,对进一步的研究具有指导意义。通过对30批药材进行水分、浸出物和总灰分的测定,我们发现浸出物的含量普遍较高,而总灰分的含量普遍较低,并且与药典收载的赤芍一致。

[1]杨媛媛.不同产地新疆赤芍中芍药苷的含量测定[J].医药导报,2008,27(7):763-764.

[2]国家药典委员会.中国药典[S].一部.附录.2010.

[3]汪阳,张峻沛,张彦福,等.维吾尔药芍药的本草考证[J].新疆中医药,1998,16(3):32-33.