铜对固定态和悬浮态栅藻和鱼腥藻除磷效果的比较

李 川，许鹏成, ，薛建辉，刘 栋, ，郭延凯,

(1. 南京林业大学江苏省林业生态工程重点实验室，南京 210037；

2. 华北电力大学能源与环境研究院区域能源系统优化教育部重点实验室，北京 102206；

3. 西北农林科技大学资源环境学院，杨凌 712100；4. 河北科技大学环境科学与工程学院，石家庄 050018)

栅藻和鱼腥藻都有一定的去氮除磷能力[1-3]．但污水中重金属离子会影响到藻的生长与其对污水处理效果[4-5]，其中 Cu2+的影响尤为显著[6]．已有研究表明低浓度 Cu2+作为微量元素，促进藻细胞生长，而高浓度 Cu2+会对藻细胞造成伤害[7-10]．文献[11]研究了在 Cu2+胁迫下固定态小球藻的生理指标影响，文献[12]研究了汞对固定态斜生栅藻净化污水及其生理效应的影响，而Cu2+对藻除磷效果的影响却鲜为报道．为此，笔者研究在不同 pH 下，不同 Cu2+浓度对固定态和悬浮态栅藻和鱼腥藻除磷效果的影响，为藻类处理污水的运用提供相应的依据．

1 材料与方法

1.1 藻种及培养

鱼腥藻(Anabaena sp.)、栅藻(Scenedesmus bijuga)均由中国科学院水生生物研究所提供．培养方法：接种适量的藻类材料于含200,mL SE培养基的锥形瓶中[13]，在温度 25,℃、t(光)∶t(暗)＝12,h∶12 h、光照度2,000,lx条件下培养，接种为无菌操作．

1.2 实验设计与方法

在 Cu2+质量浓度为 0.001,mg/L、0.01,mg/L、0.1,mg/L、1,mg/L和 10,mg/L的预实验中，当 Cu2+质量浓度为10,mg/L时，2种藻产生了明显毒性作用，培养第 2天均已死亡．而 Cu2+质量浓度为 0.001,mg/L时2种藻的生长状态基本和空白组相同，因此本实验设置 Cu2+质量浓度分别为 0,mg/L、0.05,mg/L、0.5,mg/L 和 5,mg/L[11-12,14]．铜溶液用 CuSO4,5·H2O配置．

实验中取对数期藻浓缩后，弃上清液，用蒸馏水冲洗、离心 2次，使吸附在藻细胞表面的磷脱落．处理好的藻液均分为 2份，每份 15,mL，1份弃去上清液与质量分数为 5%的海藻酸钠溶液混合均匀，形成2.5%的海藻酸钠和藻类的混合液，再用 4号针头注射器将其吸取并在距离预先冷却的 0.15,mol/L,CaCl2溶液液面20,cm处滴入，形成直径为3,mm左右的小球，另 1份直接用作悬浮态．藻球在 CaCl2溶液中振荡 1,h后取出，洗涤多次备用[15]．悬浮态与固定态的藻各均分 4份，每份5组，4份对应 Cu2+质量浓度为0,mg/L、0.05,mg/L、0.5,mg/L、5,mg/L，每份分为 5 组放入盛有 pH 值为 4、5、6、7、8的 200,mL人工污水的锥形瓶中，人工污水用KH2PO4配制成PO43--P，质量浓度为9,mg/L，所有样品做3个重复．污水放入温度培养箱中培养，t(光)∶t(暗)＝12,h∶12,h，光照度2,000,lx，连续 5,d采用钼锑抗光度法[16]，测定各个瓶内污水中 PO43--P的浓度并记录．实验中所用药品均为分析纯．试验数据采用MINITAB和SPSS 13.0软件包进行统计分析．

2 实验结果与分析

2.1 不同pH下Cu2+对空白胶球除磷效果的影响

表 1为不同 pH、Cu2+质量浓度下，空白胶球 5,d内平均除磷效率．由表 1可知，不同 pH 时，空白胶球磷吸附能力差异不显著(P＞0.05)，pH8时空白胶球具有较强的磷吸附能力；不同 Cu2+时，空白胶球磷吸附能力差异显著(P＜0.05)，Cu2+质量浓度为0.05,mg/L时空白胶球磷吸附能力最强(pH8时除磷效率达最大值8.2%)，Cu2+质量浓度为5,mg/L时磷吸附能力最弱．

表1 不同pH、Cu2+质量浓度下空白胶球除磷效率Tab.1 Phosphate removal efficiency by blank glueball under condition of different pH and Cu2+ concentrations%

2.2 不同pH下Cu2+对栅藻除磷效果的影响

由表 2可知，在 Cu2+质量浓度分别为 0,mg/L、0.05,mg/L、0.5,mg/L和 5,mg/L时，固定态栅藻最高除磷率分别是 59.2%(3,d和 5,d，pH 值为 8)、59.9%(4,d，pH 值为 8)、51.7%(4,d，pH 值为 8)和49.7%(5,d，pH 值为 6)；悬浮态栅藻的最高除磷率分别是 46.6%(4,d，pH 值为 8)、36.4% (5,d，pH 值为6)、31.3%(4d，pH 值为 6)和 27.1%(4,d，pH 值为 7)．

数据进行散点回归分析，结果见图 1．由图 1可知：①1～4,d固定态栅藻除磷率差异显著(P＜0.05)，4,d中除磷效率逐渐增大，而到了第 5,天基本保持不变；而悬浮态栅藻1～2,d除磷效率的提高幅度最大，2～4,d小幅度逐渐提高，而第 5天略有所下降；②固定态栅藻较悬浮态受 pH的影响差异极显著(P＜0.01)，固定态栅藻受 pH的影响较小，除磷效率较高．对于固定态栅藻在 pH值为 4～5时除磷效率变化较小，pH值为6～8时除磷效率随pH的增大而提高；悬浮态栅藻pH值为4～6时除磷效率随着pH的增大而增大，而pH值为7时除磷效率有所减小，pH值为8时除磷效率又有所增大；③固定态栅藻受Cu2+抑制作用较悬浮态差异极显著(P＜0.01)，固定态栅藻受 Cu2+的影响较小，除磷效率高，2种状态栅藻除磷效率均随着Cu2+浓度的提高而降低．

表2 不同pH和Cu2+浓度下固定态及悬浮态栅藻除磷效果Tab.2 Effect of copper on phosphate removal by immobilized and suspended Scenedesmus bijuga under different pH%

由于栅藻除磷效率同时受到pH、时间、Cu2+浓度的影响，对这几个因素进行交互作用分析，结果见图2和图3．

由图 2可知影响固定态栅藻除磷效率各因素之间的关系．固定态栅藻除磷效率随Cu2+质量浓度的增大而减小．Cu2+质量浓度为0,mg/L时，固定态栅藻除磷效率在 pH值为 4～6内差异不显著(P＞0.05)，而在 pH值为 6～8内除磷效率差异显著(P＜0.05)，随着 pH 的增大逐渐增大；Cu2+质量浓度为 0.05,mg/L时，固定态栅藻除磷效率在pH值为4～6内随pH的增大而减小，且 pH值为 6时出现最小值，而在 pH值为 6～8内随着 pH的增大除磷效率逐渐增大；Cu2+质量浓度为0.5,mg/L时，固定态栅藻除磷效率在pH值为4～6内逐渐增大，而pH值为7出现最小值，pH 值为 8时出现最大值；Cu2+质量浓度为 5,mg/L时，固定态栅藻除磷效率在 pH值为 4～7范围内逐渐增大，pH值为 8时有所下降．(2)Cu2+质量浓度为0,mg/L、0.05,mg/L时，1～3,d内固定态栅藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，除磷效率逐渐增大，而 3～5,d差异不显著(P＞0.05)，除磷效率趋于稳定；Cu2+质量浓度为 0.5,mg/L时，1～4,d固定态栅藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，除磷效率逐渐增大，4～5,d差异不显著(P＞0.05)；Cu2+质量浓度为5.0,mg/L时，固定态栅藻除磷效率在1～2 d差异显著(P＜0.05)，逐渐增大，2～4,d差异不显著(P＞0.05)，而第5天达到最大值．从1～3,d及第5天，pH值为8时固定态栅藻除磷效率最大，而第 4天，pH值为 7时除磷效率达到最大值，1～2,d，pH 值为 4、6时除磷效率较低，3～5,d、pH值为5时除磷效率最低；总的来说，从1～4,d、pH值为 4～8状态的固定态栅藻除磷效率逐渐增大，而第5天基本保持不变．

图1 时间、pH和Cu2+质量浓度对固定态及悬浮态栅藻除磷效率影响Fig.1 Effects of time，pH and Cu2+ concentration on phosphate removal by immobilized and suspended Scenedesmus bijuga

图2 固定态栅藻的除磷效果与pH、时间和Cu2+质量浓度的交互作用Fig.2 Interaction between phosphate removal efficiency and effect of pH，time and Cu2+ concentration by immobilized Scenedesmus bijuga

图3 悬浮态栅藻的除磷效果与pH、时间和Cu2+质量浓度的交互作用Fig.3 Interaction between phosphate removal efficiency and effect of pH，time and Cu2+ concentration by suspended Scenedesmus bijuga

由图 3可知影响悬浮态栅藻除磷效率各因素之间的关系．无 Cu2+时，悬浮态栅藻除磷效率受 pH影响显著(P＜0.05)，随着 pH 的增大而增大；Cu2+质量浓度为 0.05,mg/L时，悬浮态栅藻除磷效率在 pH值为 5和 7时出现极小值，pH值为8时出现最大值；Cu2+质量浓度为 0.5mg/L时，悬浮态栅藻除磷效率在pH值为5时出现最大值，而pH值为7时出现最小值；Cu2+质量浓度为5,mg/L时，悬浮态栅藻除磷效率在 pH值为 4～7范围内受 pH变化影响显著(P＜0.05)，除磷效率随 pH增大逐渐增大，pH值为 8时基本保持不变．总体来说，pH值为4～8时悬浮态栅藻除磷效率随 Cu2+质量浓度的增大而减小．无 Cu2+时，悬浮态栅藻除磷效率在 1～3 d差异显著(P＜0.05)，1～3 d除磷效率逐渐增大，3～5 d差异不显著(P＞0.05)；Cu2+质量浓度为 0.05,mg/L 时，悬浮态栅藻除磷效率在第 2天就达到最大值，2～4,d有所下降，而到第 5天除磷率有所提升；Cu2+质量浓度为0.5,mg/L时，1～4,d悬浮态栅藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，1～4,d除磷效率逐渐增大，第 5,天有所下降；Cu2+质量浓度为5,mg/L时，悬浮态栅藻除磷效率变化趋势与0.5mg/L时相似．从1～4,d在pH值为8的偏碱性条件下悬浮态栅藻除磷效率最大，而在第5,天、pH值为6时除磷效率最大，1～4,d、pH值为4的偏酸性的条件下除磷效率最低，而在第 5,d、pH值为5时除磷效率最小；总体来说，从 1～4,d，pH 值为4～8状态的悬浮态栅藻除磷效率逐渐增大，而第 5天基本保持不变，甚至有所下降．

2.3 不同pH值下Cu2+对鱼腥藻除磷效果的影响

表3 不同pH值和不同Cu2+质量浓度下固定态及悬浮态鱼腥藻除磷效果Tab.3 Effects of copper on phosphate removal by immobilized and suspended Anabaena sp. under different pH%

数据进行散点回归分析，结果见图 4．由图 4可知：①1～4,d固定态和悬浮态鱼腥藻除磷率差异显著(P＜0.05)，4,d内除磷效率逐渐提高，4～5,d除磷效率差异不显著(P＞0.05)；②固定态鱼腥藻较悬浮态受 pH 的影响差异极显著(P＜0.01)，固定态鱼腥藻pH的影响较小，除磷效率较高．对于固定态鱼腥藻pH值为4～6时除磷效率略有减小，pH值为6～8时除磷效率增大；悬浮态鱼腥藻在pH值为4、6及8时除磷效率出现极小值，pH值为5时出现极大值，pH值为 7时除磷效率最高；③固定态鱼腥藻较悬浮态受 Cu2+的影响差异极显著(P＜0.01)，Cu2+对固定态鱼腥藻抑制作用较悬浮态的小，除磷效率高，且固定态和悬浮态鱼腥除磷效率均随着Cu2+浓度的提高而降低．

对影响固定态和悬浮态鱼腥藻除磷效率各个因素进行交互作用分析，结果见图5和图6．

图4 时间、pH和Cu2+浓度对固定态及悬浮态鱼腥藻除磷效率影响Fig.4 Effects of time，pH and Cu2+ concentration on phosphate removal by immobilized and suspended Anabaena sp

由图 5可知影响固定态鱼腥藻除磷效率各因素之间的关系．Cu2+质量浓度为0,mg/L时，固定态鱼腥藻的除磷效率受 pH 影响差异显著(P＜0.05)，除磷效率随 pH的增大逐渐增大；Cu2+质量浓度为0.05,mg/L时，pH值为 4～6时固定态鱼腥藻除磷效率变化差异不显著(P＞0.05)，而 pH值为 6～8时除磷效率差异显著(P＜0.05)，随 pH 的增大除磷效率逐渐增大；Cu2+质量浓度为 0.5,mg/L时，固定态鱼腥藻的除磷效率在pH值为4～5内逐渐变小，pH值为5时出现极小值，pH 值为 5～6内逐渐增大，且 pH值为 6时出现最大值，而 pH值为 6～8时除磷效率又逐渐变小；Cu2+质量浓度为5,mg/L时，固定态鱼腥藻除磷效率在pH值为4～6范围内逐渐变小，pH值为 6时出现最小值，而 pH值为 6～8时除磷效率随着pH的增大逐渐增大．Cu2+在4个浓度梯度变化时，1～4,d固定态栅藻的除磷效率差异显著(P＜0.05)，4,d内除磷效率逐渐增大，4～5,d除磷效率差异不显著(P＞0.05)；且在1～5,d均呈现Cu2+质量浓度越大，固定鱼腥藻的除磷效率越小．1～2,d，pH的变化对固定态鱼腥藻除磷效果的影响差异不显著(P＞0.05)，3～5,d在pH值为7～8的偏碱性条件下固定态鱼腥藻的除磷效率较大，3～4,d且pH值为5时固定态鱼腥藻的除磷效率最低，第5天，pH值为4时除磷效率最低．

图5 固定态鱼腥藻除磷效果与pH、时间和Cu2+质量浓度的交互作用Fig.5 Interaction between the phosphate removal efficiency and the effect of pH，time and Cu2+ concentration by immobilized Anabaena sp.

图6 悬浮态鱼腥藻除磷效果与pH、时间和Cu2+质量浓度的交互作用Fig.6 Interaction between the phosphate removal efficiency and the effect of pH，time and Cu2+ concentration by suspended Anabaena sp.

由图 6可知影响悬浮态鱼腥藻除磷效率各因素之间的关系．Cu2+质量浓度为0,mg/L时，悬浮态鱼腥藻的除磷效率在pH值为4～6内受pH影响差异显著(P＜0.05)，除磷效率随着 pH 增大逐渐增大，而pH值为6～8时，pH对除磷效率影响差异不显著(P＞0.05)；Cu2+质量浓度为 0.05,mg/L时，悬浮态鱼腥藻的除磷效率在pH值为4～6内受pH影响差异显著(P＜0.05)，随着 pH 的增大逐渐变小，pH 值为 6时出现最小值，而 pH值为 7时除磷效率增大，并达到最大值；Cu2+质量浓度为 0.50,mg/L时，悬浮态鱼腥藻除磷效率基本随着 pH的增大逐渐减小；但 pH值为5时出现最大值；Cu2+质量浓度为5,mg/L时，悬浮态鱼腥藻除磷效率在pH值为4～7范围内差异不显著(P＞0.05)，pH 值为 8时出现最小值．pH 值为4～8时除磷效率大体呈现随着 Cu2+质量浓度的增大而减小．Cu2+在 4个浓度梯度变化时，悬浮态栅藻的除磷效率 1～4,d均呈增大趋势，4～5,d变化幅度较小，趋于不变；悬浮态鱼腥藻受 Cu2+影响差异显著(P＜0.05)，1～5,d均呈现 Cu2+质量浓度越大，悬浮鱼腥藻的除磷效率越小．1～5,d，pH的变化对悬浮态鱼腥藻除磷效果的影响较小，在1～5,d中pH值为7时除磷效率均最高，在1～2,d在pH值为4的条件下除磷效率最低，在 3～5,d，pH 值为 8时除磷效率最低．

2.4 不同条件下2种藻除磷效果的比较

从 Cu2+浓度的变化对固定态和悬浮态的 2种藻的除磷效果影响(见图 7(a))来看，Cu2+浓度对固定态和悬浮态2种藻的除磷效果影响不同．对于固定态2种藻，Cu2+在 4个浓度梯度变化时，栅藻除磷效率与鱼腥藻差异不显著(P＞0.05)．对于悬浮态 2种藻，Cu2+在 4个浓度梯度变化时，2种藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，为 0,mg/L、0.05,mg/L时鱼腥藻除磷效率较栅藻高，ρCu2+＝0.50,mg/L时2种藻的除磷效率相当，而＝5,mg/L时栅藻除磷效率较鱼腥藻高．2种状态的2种藻的除磷效率均随着Cu2+质量浓度的增大而减小，且固定态除磷效率均比悬浮态高(P＜0.01)．

从 pH的变化对固定态和悬浮态的2种藻除磷效果影响(见图7(b))来看：①对于固定态的2种藻，Cu2+在4个浓度梯度变化时，栅藻除磷效率与鱼腥藻差异不显著(P＞0.05)，pH值为4时2种藻的除磷效率相当，而 pH值为 5～8时栅藻的除磷效率均较鱼腥藻好；②对于悬浮态的2种藻，Cu2+在 4个浓度梯度变化时，2种藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，pH值为 4～5及 pH值为 7时，鱼腥藻的除磷效果较栅藻好，而pH值为6、pH值为8时栅藻的除磷效率较高；③pH值在 4～8内变化时，2种藻除磷效率的变化幅度较小．由此可见相对 Cu2+浓度变化，pH 值的变化对2种藻除磷影响较小，而从藻的状态来看，固定态受pH值的影响较悬浮态小．

图7 Cu2+质量浓度、pH值及时间的变化对2种藻除磷效率的影响Fig.7 Effects of time，pH and Cu2+ concentration on phosphate removal by two different algaes

从时间的变化对固定态和悬浮态的 2种藻除磷效果影响(见图7(c))来看：①对于固定态的2种藻，1～2,d 2种藻除磷效率差异显著(P＜0.05)，栅藻除磷效率较鱼腥藻高，而3～5,d 2种藻除磷效率差异不显著(P＞0.05)；②对于悬浮态2种藻，1～4,d 2种藻除磷效率差异不显著(P＞0.05)，而第 5天鱼腥藻的除磷效率较高；③1～4,d 2种藻除磷效率均随着逐渐增大，第5天基本保持不变．

3 讨 论

由以上分析可知，Cu2+的存在总体上抑制了2种藻的除磷能力．但部分含铜组的固定态藻除磷能力比不含铜组高．由表 1可以看出，固定态栅藻在第 4天、pH 值为 8、为 0.05,mg/L时除磷效率达到59.9%，超过无铜组的最大值59.2%．这可能是由于特定条件下微量 Cu2+是藻类生长所必需的，一定程度上刺激藻的生长；而浓度高时就会产生致毒作用，抑制藻类的生长，这可能是由于藻类细胞壁带有负电荷、羟基、氨基等官能团，对 Cu2+有较大的亲和力[14,17]，Cu2+浓度高时，藻细胞表面的许多官能团会与Cu2+进行结合而丧失活性．

固定态藻的除磷效率明显高与悬浮态．这是由于海藻酸钙凝胶包埋，使得藻的稳定性较强，受到pH、Cu2+浓度的影响较小，同时海藻酸钙凝胶体具有吸附磷的能力，进而固定态藻除磷效果较悬浮态好．固定态藻主要通过藻的生长代谢及胶球吸附作用去除污水中的磷，而悬浮态藻主要通过藻代谢作用去除污水中磷．

试验中不含Cu2+组，pH偏碱条件下，2种状态下的2种藻除磷效率较高；而存在Cu2+时，藻类除磷效率未受 pH的变化产生明显规律，这可能是由于 pH和 Cu2+发生交互作用，Cu2+存在时，弱化了 pH 对藻除磷效果的影响，其机理还需要进一步研究．

4 结 论

(1) Cu2+的存在，总体上抑制了2种藻的除磷能力，但在特定条件下微量 Cu2+的存在使除磷效率反而较高．

(2) pH值为 8时，2种固定态藻的除磷效率都较高，但是由于Cu2+的存在使得pH对2种藻的除磷效率的影响相对较小．

(3)固定态栅藻对Cu2+的耐受性较固定态鱼腥藻强，除磷效率较高；对于悬浮态的 2种藻，无铜及＝0.05,mg/L时，鱼腥藻较栅藻的除磷效率高，＝5,mg/L时栅藻的除磷效率较高．即栅藻对Cu2+的耐受性较强．

(4) 固定态藻的除磷效率均比悬浮态藻的除磷效率高．

［1］ 李 川，薛建辉，赵 蓉，等. 4种固定化藻类对污水中氮的净化能力研究[J]. 环境工程学报，2009，3(12)：2185-2188.Li Chuan，Xue Jianhui，Zhao Rong，et al. Nitrogen removal from wastewater by four species of immobilized algae[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering，2009，3(12)：2185-2188. (in Chinese)．

［2］ Zhang Endong，Wang Bing，Wang Qihua，et al.Ammonia-nitrogen and orthophosphate removal by immobilized Scenedesmus sp. isolated from municipal wastewater for potential use in tertiary treatment[J]. Bioresource Technology，2008，99(9)：3787-3793．

［3］ Park Jongmin，Jin Hai-Feng，Lim Byung-Ran，et al.Ammonia removal from anaerobic digestion effluent of livestock waste using green alga Scenedesmus sp. [J].Bioresource Technology，2010，101(22)：8649-8657.

［4］ Kaplan D，Stadler T. Algal Biotechnology[M]. London：Elsevier Applied Science，1988.

［5］ Garvey J E，Owen H A，Winner R W. Toxicity of copper to the green alga，chlamydomonas reinhardtii(chlorophyceae)，as affected by humic substances of terrestrial and freshwater origin[J]. Aquatic Toxicology，1991，19(2)：89-96.

［6］ 姬乃建，鲍慈光，许良知，等. 重金属及其形态对斜生栅藻生长的影响[J]. 云南大学学报：自然科学版，2003，25(增)：101-106.Ji Naijian，Bao Ciguang，Xu Liangzhi，et al. Effect of heavy metals and complex on senedesmus obliquus[J].Journal of Yunnan University：Natural Sciences，2003，25(Suppl)：101-106(in Chinese).

［7］ Hanh N N，Claude D，Canh T M. Synchronous-scan fluorescence of algal cells for toxicity assessment of heavy metals and herbicides[J]. Ecotoxicology and Environmental Safety，2009，72(2)：316-320.

［8］ Wang Wenxiong，Dei R C H. Metal stoichiometry in predicting Cd and Cu toxicity to a freshwater green alga Chlamydomonas reinhardtii[J]. Environmental Pollution，2006，142(2)：303-312.

［9］ Falih A M. Comparative toxicity of heavy metals to some yeasts isolated from Saudi Arabian soil[J]. Bioresource Technology，1998，64(3)：193-198.

［10］ Perales-Vela H V， González-Moreno S， Montes-Horcasitas C，et al. Growth，photosynthetic and respiratory responses to sub-lethal copper concentrations in Scenedesmus incrassatulus (chlorophyceae)[J]. Chemosphere，2007，67(11)：2274-2281.

［11］ Zhang Endong，Wang Bing，Yang Baoling，et al. The effect of copper on phosphate removal for wastewater tertiary treatment by immobilized chlorella and its change of physiological characteristics[J]. Guangdong Chemical Industry，2006，33(159)：87-89 (in Chinese).

［12］ 严国安，李益健，张忠新，等. 汞对固定化斜生栅藻净化污水及其生理特征的影响[J]. 应用生态学报，1995，6(3)：323-328.Yan Guoan，Li Yijian，Zhang Zhongxin，et al. Effect of mercury on sewage purification of immobilized Scenedesmus obliquus and its physiological characteristics[J]. Chinese Journal of Applied Ecology，1995，6(3)：323-328 (in Chinese)．

［13］ 王逸云，王长海. 无菌条件下的小球藻培养条件优化[J]. 烟台大学学报：自然科学版，2006，19(2)：125-129.Wang Yiyun，Wang Changhai. Culture condition optimization of Chlorella sp.[J]. Journal of Yantai Universiyt：Natural Science and Engineering Edition，2006，19(2)：125-129(in Chinese).

［14］ 陈 雷，郑青松，刘兆普，等. 不同 Cu2+浓度处理对斜生栅藻生长及叶绿素荧光特性的影响[J]. 生态环境学报，2009，18(4)：1231-1235.Chen Lei，Zheng Qingsong，Liu Zhaopu，et al. Effects of different concentrations of copper ion on the growth and chlorophyll fluorescence characteristics of Scendesmus obliquus L[J]．Ecology and Environmental Sciences，2009，18(4)：1231-1235(in Chinese)．

［15］ Fierro S，Sánchez-Saavedra M D P，Copalcúa C. Nitrate and phosphate removal by chitosan immobilized Scenedesmus[J]. Bioresource Technology，2008，99(5)：1274-1279.

［16］ 国家环境保护局. 水和废水监测分析方法[M]．第 4版．北京：中国科学出版社，2002.State Environment Protection Administration. Water and Wastewater Monitoring and Analyzing Methods[M]. 4th ed. Beijing：China Environmental Science Press，2002(in Chinese).

［17］ Xue Hanbin，Sigg Laura. Binding of Cu(Ⅱ)to algal in a metal buffer[J]. Water Research，1990，24 (9)：1129-1136.