HPLC法测定夏枯草口服液中迷迭香酸的含量

2011-06-19王海宁杨青松

中国民族民间医药 2011年19期

王海宁杨青松

1.贵州省药品检验所，贵州贵阳 550002;2.贵阳新天药业有限责任公司，贵州贵阳 550005

夏枯草口服液具有清火，明目，散结，消肿。用于头痛眩晕，瘰疬，瘿瘤，乳痈肿痛，乳腺增生，甲状腺肿大，淋巴结结核，高血压症。本品收载于国家药品标准WS3－224(Z－224) －2003(Z)。原标准中含量测定为测金丝桃苷的含量，由于测定时对柱子选择性较高且分离效果不是很好，根据厂方要求及2010年版药典拟新增新药品种要求，修订本品含量测定，改为测迷迭香酸的含量。我们从生产工艺到质量标准，相继进行了一系列相关的实验研究。经过实验摸索，根据质量标准拟定的原则，因为迷迭香酸为夏枯草的主要成份，所以在此对原标准进行修订，改为HPLC测定迷迭香酸的含量。结果表明，经过对该质量标准的修订后，进一步提高了该品种的可控性。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪:岛津2010液相色谱仪;夏枯草口服液由贵阳新天药业有限责任公司提供;迷迭香酸对照品由天津一方科技有限公司提供;试剂:甲酸为分析纯、甲醇为色谱纯、纯净水为UPW－50N型超净水器和CS－2型厨下式逆渗透直饮机二次制备。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇－0.5%甲酸(40∶60)为流动相;流速:1 ml/min;进样量:10 μl;柱温:25℃。检测波长为330nm;理论塔板数按迷迭香酸峰计算，应不低于3000。

2.2 供试品溶液的制备

精密取本品1ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 方法学考察

空白试验:由于本品为单方制剂，无阴性样品，取对照品溶液及样品溶液进样，结果色谱图如下 (图1)。

线性关系考察:按上述色谱条件，精密取迷迭香酸对照品 (0.286944mg/ml)1ml、1ml、2ml、3ml、2ml，分别置25ml、10ml、10ml、10ml、5ml量瓶中，加 50% 甲醇至刻度，分别取10μl注入液相色谱仪，测得峰面积积分值。计算回归方程:Y=28937.68X+3133.08，r=0.9998(n=5)，结果表明，在0.114776～1.14776μg范围内迷迭香酸对照品的进样量与峰面积值呈良好的线性关系。

精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μl，重复进样5次，记录色谱，计算，结果迷迭香酸峰面积积分值RSD=0.52%，说明有良好的精密度。

重现性试验:取样品 (批号为080309)5份，依法制得5份供试品溶液，分别进样，记录色谱，计算，RSD为0.81%，说明有良好的重现性。

稳定性试验:精密吸取供试品溶液，分别于0、1、2、4、8、24小时进样，测定。结果迷迭香酸峰面积值的RSD=0.29%，表明供试品溶液在24小时内稳定。

加样回收率试验:采用加样回收，精密吸取已测定含量的夏枯草口服液 (080309)6份，每份1ml，置50ml量瓶中，分别精密加入迷迭香酸对照品溶液 (0.286944mg/ml)5ml，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，并按上述色谱条件测定迷迭香酸的含量计算回收率，结果见表1。迷迭香酸的回收率为100.6%，RSD为0.54%，说明本法有良好的回收率。

表1 回收率试验数据 (n=6)

2.4 样品含量测定

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪测定。结果批号为080101，080102，080103，080105， 080106， 080309， 080310， 081204， 081205，081208的样品中迷迭香酸的含量分别为10.3，11.6，8.50，10.3，10.4，14.0，9.50，13.2，14.9，12.0mg/支。