离子色谱法测定羧甲司坦片中一氯乙酸

蓝晓玉

广西柳州食品药品检验所，广西 柳州 545001

1 前言

羧甲司坦【S－(羧甲基) －半胱氨酸】是黏痰溶解药，能减少支气管的粘液分泌，使痰的粘稠度下降而易于咳出［1］。临床上用于慢性支气管炎，支气管哮喘等引起的痰液稠厚、咳痰困难、肺通气功能不全。羧甲司坦是由L－半胱氨酸在氯乙酸和氢氧化钠催化下缩合而成，目前的生产工艺不可避免会有少量氯乙酸残留。

资料显示氯乙酸具有毒性，人体摄入氯乙酸会产生一系列不良反应，因此有必要检测羧甲司坦原料药和成品药里的氯乙酸含量。目前羧甲司坦及其相关物质的测定一般采用HPLC法［2］而无法检出其中氯乙酸。当前检验氯乙酸的方法主要有气相色谱法［3－4］GC－MS［5－6］以及离子色谱法［8－9］本文采用阴离子色谱柱、碳酸钠洗脱液，抑制电导的离子色谱法测定羧甲司坦片中一氯乙酸的含量，方法回收率达到92%，结果令人满意。

2 实验部分

2.1 仪器

Metrohm－881型离子色谱仪 (瑞士万通)，配有电导检测器、化学抑制器、二氧化碳抑制器、低脉冲串联式双活塞往复泵、电子六通进样阀、柱温箱等。Millpore超纯水机，电子天平 (赛多利斯)。

2.2 试剂及样品

一氯乙酸标准品 (250mg，德国Dr.Ehrenstorfer公司)，Na2CO3(天津福晨化学试剂厂，优级纯)，浓硫酸 (广州化学试剂厂，分析纯)，NaOH(广州化学试剂厂，分析纯)。羧甲司坦片 (市售成品药)。溶液均用电阻率大于18.2MΩ超纯水配制。

2.3 色谱条件

色谱柱:Metrosep A Supp7－250阴离子分析柱，Metrosep A Supp4/5 Guard保护柱;流动相:3.6 mmol·L－1Na2CO3淋洗液;50 mmol·L－1H2SO4抑制器再生液;进样体积:20μL; 流速:0.8 mL·min－1; 柱温箱温度:45°C。

3 分析步骤

3.1 NaOH溶液的制备

称取2.0088 g NaOH用超纯水定容至100 mL塑料容量瓶，即为1 mol·L－1NaOH储备液A;

量取2 mL NaOH储备液A用超纯水定容至100 mL塑料容量瓶，即为0.02 mol·L－1NaOH储备液B。

3.2 标准溶液的制备

称取氯乙酸标准品0.1010g，用NaOH储备液B定容至100 mL塑料容量瓶，即得1010 mg·L－1标准储备液C;

量取990uL标准储备液C用NaOH储备液B定容至100 mL塑料容量瓶，即得10 mg·L－1标准储备液D。量取0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL储备液 D至100 mL容量瓶中，均使用NaOH储备液B定容，制成浓度分别为0.02、0.04、0.08、0.12、0.16、0.2 mg·L－1的一系列标准溶液。

3.3 样品制备

将羧甲司坦片碾磨成细小粉末，精密称取0.5 g样品用1 mol·L－1NaOH定容至25 mL塑料容量瓶，用超纯水稀释50倍后进离子色谱分析。

3.4 标准曲线的绘制

取一氯乙酸标准工作液，分别注入离子色谱仪，记录色谱图，见图3。以峰面积为横坐标，质量浓度为纵坐标绘制一氯乙酸 (MCAA)的标准曲线，见图1，线性方程、相关系数见表1。实验结果表明，一氯乙酸在0.02～0.2 mg·L－1范围内质量浓度与峰面积之间的线性关系良好。

表1 2种阴离子的线性方程、相关系数和相对标准偏差

图1 MCAA的标准工作曲线

图2 NaOH溶剂空白谱图

4 分析结果

4.1 NaOH溶剂空白

羧甲司坦为白色结晶性粉末，无臭，在热水中略溶，在水中极微溶解。在乙醇或丙酮中不溶，在酸或碱溶液中易溶。本实验采用NaOH溶液作为溶剂，需要测定溶剂空白，谱图见图2。标准及样品谱图均扣除溶剂空白。

4.2 样品分析

在试验条件下，对3.3项中制备的羧甲司坦样品溶液连续测定5次，测得一氯乙酸的峰面积，相对标准偏差为0.67%，说明本方法精密度良好。标准谱图、样品谱图及局部放大的样品谱图如图3、图4及图5所示。

图3 0.12mg/L标准溶液的色谱图

图4 样品色谱图

图5 局部放大样品谱图

4.3 回收率及检出限

为考察本方法的可靠性，采用标准加入法进行了样品回收率实验，一氯乙酸的回收率达到92.1%以上。

按仪器的3倍基线噪声相应的含量计算一氯乙酸离子的检出限，结果为 0.432 μg·L－1。

5 小结

本文用离子色谱法测定了羧甲司坦片中的一氯乙酸。实验结果表明，一氯乙酸的回收率为92.1%，精密度为0.67%，线性范围0.02～0.2 mg·L－1。由于样品难溶于水和普通有机溶剂，需要用高浓度的碱来溶解 (推荐0.5 mol·L－1以上NaOH)，所以样品最好能够现配现测，如果不能立即测定，样品配制好后应该密封保存。谱图显示40分钟左右出现的峰是羧甲司坦主成分峰，因此该方法可用于不仅可用于测定一氯乙酸，也可用于同时测定羧甲司坦含量，具有一定的实用和推广价值。

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