RP-HPLC考察注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液配伍的稳定性

郑 芳，钟基大，朱雪松*，李春雷，李志浩

头孢吡肟(Cefepime)是一种新型氨基噻唑-联-氧亚胺头孢菌素，通过抑制细菌细胞壁的生物合成而达到杀菌作用［1］。可用于治疗多种细菌感染性疾病［2］。氟康唑(Fluconazole)为新型氟代三唑类抗真菌药物，有广谱抗真菌作用［3-7］。临床上对严重感染的病例，特别是深部真菌感染，常将二药联合应用以达到治疗的目的。由于两药的配伍稳定性未知，为了用药安全，临床用药时，两药不仅分开注射，中间还以适量糖或盐的大输液作为间隔，这样需要增加患者的补液量以及输注的次数，增添患者痛苦。为此，本实验参照有关文献［8-10］，模拟临床用药浓度，在室温［(20 ±1)℃］、不避光条件下，对注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液的配伍稳定性进行考察，为配合临床治疗、合理应用抗菌药物提供理论依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 日本岛津LC-9A高效液相色谱仪，岛津SPD-6A紫外检测器，浙大N2000色谱工作站;HS-2060超声仪;pHs-3D型酸度计(上海雷磁仪器厂);岛津AEU-210电子天平。

1.2 试药 头孢吡肟对照品(中国药品生物制品检定所，批号:130524-200802l);氟康唑对照品(中国药品生物制品检定所，批号:100314-200402);注射用盐酸头孢吡肟(商品名:达力能，深圳致君制药有限公司，批号:20100303;规格:1.0 g/支);氟康唑氯化钠注射液(商品名:辰泽，山东鲁抗辰欣药业有限公司，批号:1005215202，规格:100mL含氟康唑0.2 g与氯化钠0.9 g);乙腈为色谱纯;水为新制注射用水;其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液配制 ①对照品贮备液:分别精密称取头孢吡肟和氟康唑对照品适量，分别用注射用水和磷酸盐缓冲液［10］［取磷酸二氢钾1.0 g，磷酸氢二钠1.8 g，加水900mL溶解，用磷酸或10mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至(7.1±0.1)，用水稀释至1000mL］溶解并稀释配制成浓度分别为1.010 mg/mL和2.502 mg/mL的头孢吡肟、氟康唑对照品贮备液。②配伍溶液:取注射用盐酸头孢吡肟1支，加入100mL氟康唑氯化钠注射液中，摇匀，即得配伍溶液。③供试品溶液:取注射用盐酸头孢吡肟1支，加入100mL 0.9%氯化钠注射液中，摇匀，即得盐酸头孢吡肟供试品溶液。

2.2 含量测定方法

2.2.1 色谱条件与系统适应性试验 色谱柱:Agilent HC C18(150mm ×4.6mm，5μm);检测波长［10］:头孢吡肟与氟康唑分别为206 nm、260 nm;流速:0.8mL/min;进样量:20μL;柱温:25 ℃;头孢吡肟流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(10∶90);氟康唑流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(18∶82)。在上述色谱条件下，两主峰的理论塔板数均不低于6000，两主峰之间及与相邻的杂质峰的分离度大于3.0(见图1)。

图1 高效液相色谱图

2.2.2 标准曲线的建立 头孢吡肟:精密吸取“2.1”项下头孢吡肟对照品贮备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分置10mL 量瓶中，用注射用水稀释至刻度，摇匀。在“2.2.1”项色谱条件下分别进样分析。以峰面积A为纵坐标、浓度C(mg/L)为横坐标，进行线性回归，得回归方程:A=1.06×104C+8.40 ×103，r=0.9995(n=6)，线性范围:50.5～505.0μg/L。

氟康唑:精密吸取“2.1”项下氟康唑对照品贮备液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL，分置 10mL量瓶中，加“2.1”项下的磷酸盐缓冲液至刻度，摇匀。在“2.2.1”项色谱条件下，分别进样上述溶液20μL，记录峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标、浓度(X)为横坐标绘制标准曲线，得氟康唑的回归方程:Y=872.2 X-903.4，r=0.9993(n=6)，线性范围:250.2～1501.2μg/mL。

2.2.3 精密度试验 分别进样“2.1”项下稀释10倍的头孢吡肟和5倍的氟康唑对照品贮备液，重复进样6次，测定峰面积，结果头孢吡肟峰面积RSD为0.41%;氟康唑峰面积RSD为0.54%。

2.2.4 重复性试验 取同一批样品，按“2.1”项下配伍溶液配制方法平行制备12份，取6份稀释100倍后进样，记录峰面积，头孢吡肟峰面积RSD为0.89%(n=6);另6份稀释4倍后进样，记录峰面积，氟康唑峰面积RSD为0.98%(n=6)。

2.2.5 溶液稳定性试验 将注射用头孢吡肟钠与氟康唑氯化钠注射液分别用注射用水和磷酸盐缓冲液配制成浓度约为0.1 mg/mL与0.5 mg/mL的溶液，置于室温［(20 ±1)℃］下，分别于 0、1、2、3、4 h 时，在上述色谱条件进样 20μL，测定峰面积。结果头孢吡肟与氟康唑峰面积RSD分别为0.58%、0.69%(n=5)。说明氟康唑与头孢吡肟钠在上述条件下4 h内稳定。

2.2.6 加样回收率实验 精密量取已知含量的头孢吡肟钠供试品溶液1.0mL，分置9个100mL的量瓶中，分别精密加入头孢吡肟对照品贮备液8.0、10.0、12.0mL各3份，分置上述量瓶中，用注射用水稀释至刻度，摇匀，20μL进样;精密量取已知含量的氟康唑氯化钠注射液5.0mL，分置9个25mL的量瓶中，分别精密加入氟康唑对照品贮备液3.2、4.0、4.8mL各3份，分置上述量瓶中，用磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，20μL进样;以“2.2.1”项下方法测定峰面积，代入回归方程计算浓度(X)，并计算回收率，结果见表1。

2.3 配伍稳定性试验

2.3.1 外观、pH值变化 取“2.1”项下配伍溶液适量，室温下分别于 0、1、2、3、4、5、6 h用纳氏比色管观察颜色变化，并测定pH值，结果配伍液无色澄明，无肉眼可见的物理变化，pH值结果见表2。

表1 加样回收率试验结果(n=9)

表2 注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液配伍后pH值及含量变化

2.3.2 相对百分含量变化 取“2.1”项下配伍溶液适量，放置室温下，分别于 0、1、2、3、4、5、6 h，即刻注射用水稀释100倍后，立即进样，测定头孢吡肟的峰面积;同上法取“2.1”项下配伍溶液适量，在各时间点即刻用磷酸盐缓冲液稀释4倍后，立即进样，测定氟康唑的峰面积。以配伍0 h含量为100%，计算药物相对含量变化，结果见表2。

注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液配伍6 h内，在室温、不避光条件下，配伍液无色澄明，无肉眼可见的物理变化发生。表2结果显示，配伍4 h内，两主药含量及pH值均无明显变化，在4～6 h变化较大，但在临床治疗中，根据两药滴速(说明书规定)，2 h内已足够将100mL的混合液静滴完毕，而两药连续输注的中间相互混合的时间更短。因此，在此实验条件下，两药短时配伍基本稳定。

3 讨论

本文配伍试验结果表明，注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液配伍6 h内基本稳定。若两药连续输注时，中间可以不用适量糖或盐的大输液作为间隔，可直接将注射用盐酸头孢吡肟加入到氟康唑氯化钠注射液中。这样既减少了患者的补液量以及输注的次数，减轻了患者的痛苦，降低了医疗费用，又节省了医患双方的时间。

由于头孢吡肟与氟康唑极性相差大，而且在同样稀释倍数下的各自最大吸收波长处，头孢吡肟的吸收度也比氟康唑大得多，所以二者含量测定不能在同一色谱条件下测定，故采用“2.2.1”项色谱条件，将氟康唑氯化钠注射液的临床用药浓度稀释4倍、头孢吡肟稀释100倍后进行含量测定。本实验选用高效液相色谱法对注射用盐酸头孢吡肟与氟康唑氯化钠注射液配伍后含量进行测定，结果表明，此方法灵敏度高、专属性好，对于医院临床药学开展药物监测具有一定意义。

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