ER、PR、C-erbB-2、HMFG 在乳腺癌组织中的表达及临床意义

李文华，孙 奇，覃 希，李 婷

(广西医科大学第四附属医院，广西柳州545005)

乳腺癌是危害女性健康和生命的主要恶性肿瘤之一，在欧美国家以每年3%的速度递增，已成为女性发病首位的恶性肿瘤。我国近年来乳腺癌的发病率呈上升趋势。2009年1月～2011年9月，我们采用免疫组化EnVision法检测58例乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(C-erbB-2)、人乳脂肪球膜蛋白(HMFG)的表达水平，旨在进一步探讨乳腺癌的发生机制。

1 材料与方法

1．1 材料 选择我院手术切除的乳腺癌组织标本58份(肿瘤组)，同时取相应癌旁正常乳腺组织58份作对照组，年龄31～85岁，平均51岁;年龄＜50岁38例，≥50岁20例。均经病理检查诊断，且术前未行放化疗。其中浸润性导管癌44例、浸润性小叶癌8例、导管原位癌6例;浸润性导管癌组织学分级［1］分为高分化8例，中分化26例，低分化10例。腋窝淋巴结转移30例。主要试剂:HMFG抗体购自福州迈新生物技术有限公司，ER、PR、C-erbB-2购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1．2 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 表达检测 采用免疫组化法。所有标本经甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋、切片，HE染色。采用 EnVision二步法，HMFG采用柠檬酸高温高压修复，ER、PR、C-erbB-2则采用微波修复，抗体浓度为1∶50～1∶100，所有操作按试剂盒说明书进行。结果判定:ER、PR:细胞核可见棕黄色颗粒为阳性着色，阳性细胞数＜10%为阴性，＞10%为阳性。C-erbB-2:细胞膜可见棕黄色颗粒为阳性着色，细胞膜无着色或＜10%的细胞膜轻微着色为阴性，＞10%的细胞膜连续着色，形成网格状判为阳性。HMFG:可为膜阳性、浆阳性或膜浆阳性。根据阳性细胞数和阳性强度评级:瘤细胞未见着色为阴性;＞50%肿瘤细胞强、弥漫着色判为阳性。

1．3 统计学方法 采用SPSS13．0统计软件，蛋白表达与临床病理特征的关系采用四格表和行×列表χ2检验进行结果分析，蛋白表达之间的相关性采用Spearman等级相关分析。检验水准α=0．05。

2 结果

2．1 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 的表达 乳腺癌组中 ER、PR、C-erbB-2、HMFG的阳性率分别为75．9%、55．2%、34%、89．6%，对照组分别为82．8%、62．1%、13．8%、93．1%，乳腺癌组 C-erbB-2表达明显高于对照组(P＜0．05)，余指标两组无统计学差异。

2．2 ER、PR、C-erbB-2、HMFG 表达与乳腺癌临床病理特征的关系 见表1。

2．3 相关性分析 乳腺癌组织中ER表达与PR表达表达呈正相关(r=0．302，P=0．021);ER 与 HMFG表达呈正相关(r=0．338，P=0．01);ER 与 C-erbB-2、PR 与 C-erbB-2、PR 与 HMFG、HMFG 与 C-erbB-2均无相关性，P均＞0．05。

3 讨论

乳腺癌是一种多因素疾病，在其发生、发展过程中伴随多种基因和蛋白的改变。通过对生物标志物的研究，可以更深入地认识乳腺癌的生物学行为。ER、PR是调节性器官细胞生长发育的雌激素、孕激素受体，ER及PR的状态对肿瘤生长有着重要影响，与乳腺癌的激素治疗有密切关系，表达水平高低用于预测激素治疗的反应性。表达水平高意味着对激素治疗的敏感性强，可使肿瘤缩小凋亡，预后好。文献报道，ER、PR与各临床病理特征的关系的研究结论不太一致［2］。本研究显示，ER、PR在肿瘤组和对照组的表达无统计学差异，且乳腺癌组中不同年龄、组织学类型、分化程度和腋窝淋巴结转移的ER、PR表达差异亦无显著性，提示目前ER、PR检测可作为预测激素治疗反应性的依据，但对乳腺癌的诊断及预后判断还需结合其他指标进一步分析。

表1 ER、PR、C-erbB-2、HMFG表达与乳腺癌临床病理特征的关系

C-erbB-2基因是一种原癌基因。C-erbB-2基因激活后，通过一系列信号传导通路使细胞的生物学特性发生改变，并导致细胞恶性转化和出现恶性表型。文献报道，20% ～30%的乳腺癌中有C-erbB-2的扩增和过表达［3］;C-erbB-2过表达与组织学分级、淋巴结转移有相关性，组织分化越差，C-erbB-2阳性表达率越高［4］，而有淋巴结转移病例易出现C-erbB-2的过表达［5］。本研究显示，肿瘤组C-erbB-2阳性率明显高于对照组，且其阳性表达与乳腺癌组织学分型及腋窝淋巴结转移有关，提示C-erbB-2不仅可作为靶向治疗的靶点，还与预后关系密切，可作为预后判断的指标之一。

HMFG是存在于人乳中乳脂肪球表面的膜蛋白，可表达于正常人乳腺上皮细胞和乳腺癌上皮细胞。研究表明，在人正常乳腺组织、原发性乳腺癌和转移性乳腺癌中可见 HMFG 的表达［3，6］，且阳性率较高(达80% ～90%);但有研究表明，HMFG不仅表达于乳腺，在卵巢、胃肠、肺和皮肤汗腺的肿瘤中也有不同程度表达。本研究两组HMFG阳性率表达无统计学差异，而乳腺癌高、中、低分化者HMFG阳性率呈逐渐下降趋势，癌分化程度越高，HMFG阳性率越高，差异有统计学意义，与国外研究相符［7］。本研究不同年龄、组织学类型、腋窝淋巴结转移的HMFG阳性表达差异无显著性。提示HMFG可作为判断乳腺组织来源的肿瘤指标之一，但仍需结合其他乳腺特异性标志物综合判断;另外，由于癌分化程度越高，HMFG阳性率越高，癌分化程度与预后关系密切，提示HMFG也可作为乳腺癌预后判断指标之一。

本研究中Spearman等级相关分析显示，ER与PR表达呈正相关，说明ER、PR对肿瘤生长的有协同作用，两者均有表达者对激素治疗效果会更好;本研究还发现，ER与HMFG表达呈正相关，提示HMFG对预测激素治疗反应有一定帮助，与国外研究一致［8］。本研究 ER 与 C-erbB-2，PR 与 C-erbB-2，PR与HMFG，HMFG与C-erbB-2均无相关性，提示ER、PR、C-erbB-2和HMFG与乳腺癌的发生、发展有关，联合检测ER、PR、C-erbB-2和HMFG在乳腺癌组织中的表达情况，有助于客观评价乳腺癌的生物学行为，从而指导治疗及预后判断。

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