伊维菌素预混剂质量标准中鉴别方法的商榷

李跃龙，冯学忠，黎华鹏，叶渭源，方炳虎，张魁华

(1.广东省兽药与饲料监察总所，广州 510230;2.广东大华农动物保健品股份有限公司，广东新兴 527400;3.华南农业大学兽医学院，广州 510642)

伊维菌素是新型的广谱、高效、低毒抗生素类抗寄生虫药，属大环内酯类，主要含伊维菌素B1(B1a+B1b)［1－3］，对体内外寄生虫特别是线虫和节肢动物均有良好驱杀作用［4］。广泛用于牛、羊、猪、马的胃肠道线虫、肺线虫、牛皮蝇蛆、纹皮蝇蛆、羊鼻蝇蛆、羊痒螨和猪疥螨等，犬的肠道线虫、耳螨、疥螨、心丝虫和微丝蚴，以及家禽胃肠线虫和体外寄生虫［5－12］。伊维菌素预混剂质量标准收载于《进口兽药质量标准》一九九九年版，采用薄层色谱法［13］进行检查。经过反复实验研究，发现该标准中【鉴别】(1)的检查方法存在缺陷，需要修正。

1 材料与方法

1.1 材料 CP225D型电子天平，德国赛多利斯有限公司;UV－2450型紫外可见分光光度计;ZF－C型三用紫外分析仪。

伊维菌素对照品，批号为 K0190811，含量93.9%，中国兽医药品监察所;伊维菌素，批号10050301，河北威远动物药业有限公司;玉米芯细粉，批号20100705，济南市长清区科农玉米加工厂;伊维菌素预混剂，规格为100 g:0.2 g，批号为20100901、20100902、20100903，广东大华农动物保健品股份有限公司;硅胶 GF254薄层板，批号20100702，青岛海洋化工厂;丙酮、醋酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷为分析纯试剂。

1.2 方法

1.2.1 确定检测波长 取伊维菌素对照品适量，加甲醇制成每1 mL中约含伊维菌素0.015 mg的溶液，摇匀，以甲醇为空白，照紫外分光光度法［13］，在190～400 nm波长范围内进行紫外吸收图谱扫描。

1.2.2 伊维菌素对照品溶液的制备 精密称取伊维菌素对照品25 mg于25 mL量瓶中，加丙酮溶解，并定容稀释成1mg/mL，摇匀，作为伊维菌素对照品溶液。

1.2.3 供试品溶液的制备 取伊维菌素预混剂适量，加丙酮制成每1 mL中约含伊维菌素1 mg的溶液，置超声浴中超声15 min，过滤，取滤液，作为供试品溶液。

1.2.4 原料溶液的制备 取伊维菌素(原料)适量，按1.2.2项下方法稀释，摇匀，作为原料溶液。

1.2.5 空白溶液的制备 按处方比例称取辅料适量，制备不含伊维菌素的空白样品，按1.2.3项下方法稀释，取滤液，作为空白溶液。

1.2.6 薄层色谱法检测 把 1.2.2、1.2.3、1.2.4、1.2.5项制备的溶液，按伊维菌素预混剂质量标准中【鉴别】(1)的方法进行前处理，采用薄层色谱法进行检测，检测波长为254 nm和365 nm。

2 结果

2.1 检测波长结果 结果如图1所示。在波长254 nm处有紫外吸收，而在波长365 nm处没有紫外吸收。因此，选择254 nm为检测波长。

图1 伊维菌素紫外吸收图谱

2.2 在波长为365 nm进行检查的结果 置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品、对照品、原料、空白溶液在硅胶GF254薄层板上都没有主斑点显示。

2.3 在波长为254 nm进行检查的结果 结果如图2所示。置紫外光灯(254 nm)下检视，供试品、原料在硅胶GF254薄层板上，所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同;空白溶液在硅胶GF254薄层板上都没有主斑点显示。

图2 薄层色谱图(在254 nm紫外光灯下检视)

3 讨论

3.1 取伊维菌素对照品溶液，照“紫外可见分光光度法”进行扫描，结果在365 nm的波长处无紫外吸收，在254 nm的波长处有紫外吸收，而伊维菌素预混剂质量标准中的【鉴别】(1)要求在紫外光灯(365 nm)下进行检视。这是不能客观反映出样品的真实特性。

3.2 伊维菌素预混剂质量标准中【鉴别】(1)要求在硅胶GF254薄层板上点样，然后在紫外光灯(365 nm)下进行检视，但实验结果显示，在紫外光灯(365 nm)下检视无斑点，而置紫外光灯(254 nm)下检视有清晰斑点，此结果与现行质量标准不符。

3.3 为了使伊维菌素预混剂质量标准中【鉴别】(1)的方法具有可操作性，根据实验情况，笔者建议把“置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品所显主斑点的颜色和位置应与对照品的主斑点相同。”改为“置紫外光灯(254 nm)下检视，供试品所显主斑点的颜色和位置应与对照品的主斑点相同。”

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