溶血葡萄球菌临床分布特点及药敏分析

郑 彦，王海龙，杜伟平

（1.延安大学附属医院检验科，陕西延安716000；2.赤峰市第二人民医院检验科，内蒙古赤峰024000）

溶血葡萄球菌临床分布特点及药敏分析

郑 彦1，王海龙2，杜伟平1

（1.延安大学附属医院检验科，陕西延安716000；2.赤峰市第二人民医院检验科，内蒙古赤峰024000）

目的目的为临床合理用药提供实验室依据。方法对临床所送的合格标本按照《全国检验技术操作规程》的要求接种、分离、培养，用MicroScan Walkaway40型全自动细菌分析系统、手工生化和K－B纸片法进行鉴定和药敏试验。药敏结果依据NCCIS标准判定，将药敏结果进行统计分析。结果共获得221例葡萄球菌阳性病例，溶血葡萄球菌33株（14.93%）；儿科21例（63. 64%），骨科3例（9.09%），ICU病房2例（6.06%）；33株SHA中血标本21例（63.64%）；SHA中产β－内酰胺酶30株（90.91%），对苯唑青霉素耐药30株；对万古霉素完全敏感100%；SHA株中对β－内酰胺类、头孢菌素类、大环内酯类、喹诺酮类和四环素类抗生素均耐药有7株（23.33%）。结论SHA感染主要分布在儿科，容易引起儿科患者血液感染；SHA产酶率高，有效药物仍以万古霉素为主；SHA存在多重耐药性，需加强溶血葡萄球菌的临床监测，避免交叉感染和耐药率的升高，根据药敏结果合理选择抗生素，均应引起临床医护人员的重视。

溶血葡萄球菌；院内感染；药敏试验

葡萄球菌属广泛分布于自然界，长期以来关注较多的是凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌，但是近年来由于抗生素的不合理应用及葡萄球菌本身耐药性和致病性的变迁，凝固酶阴性的葡萄球菌所致的感染呈上升趋势，特别是免疫力低下患者［1］，儿科、ICU病房、老年病科和一些侵入性操作［2］。溶血葡萄球菌（SHA）是凝固酶阴性的葡萄球菌中的重要一种，分析SHA耐药性对控制凝固酶阴性葡萄球菌感染具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源延安大学附属医院2009－01～2009－12住院病人标本，1个病人多次分离的重复菌株选取耐药最强的1株。

1.1.2 质控菌株ATCC25923，ATCC29213由卫生部临检中心提供。

1.1.3 试剂微量生化反应管（杭州天和微生物试剂有限公司）、3%过氧化氢溶液（自制）、药敏纸片（杭州天和微生物试剂有限公司）、哥伦比亚血琼脂培养基（上海锃嘉微生物工程有限公司）、营养琼脂（上海锃嘉微生物工程有限公司）。1.1.4仪器德灵MicroScanWalkaway40型全自动细菌鉴定仪（西门子公司）、BACT／ALERT 3D血培养仪（法国梅里埃）、Heraeus BB16／BB5060 CO2培养箱（海尔）。

1.2 方法

1.2.1 标本接种、菌株分离培养将送检标本按四分区法接种于血、营养及巧克力等琼脂培养基，37℃，18h。

1.2.2 菌株鉴定采用镜检，全自动细菌鉴定仪Walkaway40，并结合微量生化反应对所分离的菌株进行鉴定。①菌落特征：光滑奶酪状，不透明，无色素或奶油色、黄色。②革兰染色镜检：革兰阳性球菌，成葡萄串状排列，疑似葡萄球菌。③触酶反应：阳性；凝固酶反应：阴性。④配制0.5麦氏浓度的菌悬液，使用全自动细菌鉴定仪Walkaway40进行菌株鉴定。⑤微量生化反应：吡咯烷酮芳基酰胺酶：阳性；鸟氨酸脱羧酶：阴性；尿酶：阴性；β－半乳糖苷酶：阴性。

1.2.3 药敏试验采用全自动细菌鉴定仪Walkaway40和KB法进行药敏验。判断按照美国临床实验室标准化委员会规则判定。

1.2.4 β－内酰胺酶试验头孢硝基噻吩：由黄色变为红色为阳性。

1.2.5 统计方法结果采用构成比和率进行分析。

2 结果

从临床标本中共分离出221株葡萄球菌，其中，溶血性葡萄球菌33株，占葡萄球感染病例的14.93%。具体分布见表1～表5。

表1 33株溶血葡萄球菌科室分布情况

表2 33株溶血葡萄球菌标本类型构成比

表3 溶血葡萄球菌标本耐药状况

表4 溶血葡萄球菌多重耐药性分布

3 讨论

人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌最为多见，溶血葡萄球菌（SHA）为第二种常见者［3］。近年来，随着广谱抗生素，激素、免疫抑制剂、各种创伤检查及介入性诊疗技术的广泛应用，SHA引起的感染日趋增多，已成为具有重要临床意义的医院感染病原菌，可引起血液、泌尿生殖道和创伤等多部位感染。

本实验33株SHA主要分布在儿科占63.64%，因为新生儿免疫力低下，自身的免疫功能不完善，因此应对产房进行严格消毒，严格规范医护人员的操作以减少新生儿的感染率。我院所分离的SHA主要为血标本占63.64%，与有关文献报道的泌尿生殖系统标本中分离率高［4］不相符，这可能与我院送检的成人标本量少有关。SHA感染的有效治疗药物为万古霉素，呋喃妥因、辛内吉、利福平。

同时产β－内酰胺酶的细菌多重耐药现象。应引起医护人员的重视。当发现SHA菌感染患者时，宜采取适当措施进行防治，及时做病原学及药敏检测，合理使用抗生素。

近年来由于抗生素的不合理应用导致细菌的耐药率上升，不规范的用药和治疗途径既能造成细菌耐药，又能使细菌乘机而入，导致严重的院内感染。本实验药敏结果显示，33株SHA对常用抗菌药物呈多重耐药性，尤其是对β－内酰胺类、大环内酯类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类和林可霉素类抗菌药物呈高度耐药，均大于75%。与有关文献［6］研究的耐药性相比，存在一定差异。这可能与SHA携带多种耐药基因，可同时对多种抗菌药物耐药。并可灭活氨基糖苷类药物造成多重耐药。我们建议对儿科病区的医护人员，做好防护措施，病人要及时隔离，病人所在环境要预防性的消毒，防止细菌播散造成大范围院内感染，临床实验室需加大力度进行SHA的药敏检测，为临床治疗提供可靠的理论依据。

［1］李琳，钱小毛.新生儿溶血葡萄球菌败血症临床表现及其耐药性分析［J］.儿科药学杂志，2005，11（6）：27－32.

［2］邓健康，郭晓兰，苏忠龙，等.耐甲氧西林溶血葡萄球菌耐药性检测［J］.国际检验医学杂志，2007，28（9）：793－794.

［3］倪语星.临床微生物学与检验［M］.第4版.北京：人民卫生出版社.2007：77－80.

［4］李希涛，赵霞，张静.耐甲氧西林溶血葡萄球菌临床分布及耐药性分析［J］.中国实验诊断学，2009，13（6）：837－838.

［5］吕火祥，沈蓓琼，潘立勇，等.1997—2001年耐甲氧西林葡萄球菌临床分离率及耐药性分析［J］.检验医学，2O04，19（3）：220.

［6］俞关红，陈亚岗，俞云松，等.溶血葡萄球菌对抗菌药物的敏感性和mecA基因的检测［J］.检验医学，2004，19（2）：115－118.

［7］吴伟元，潘小梅，吴劲松，等.溶血葡萄球菌庆大霉素耐药表型与基因型分析［J］.检验医学，2008，23（4）：401.

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1672－2639（2011）02－0053－02

2011－04－26；责任编辑 徐文梅］