醋烘制川楝子炮制工艺的探讨*

窦志英，李迎春，郑蓓蓓

（天津中医药大学，天津 300193）

醋烘制川楝子炮制工艺的探讨*

窦志英，李迎春，郑蓓蓓

（天津中医药大学，天津 300193）

[目的]优选醋制川楝子炮制工艺，为醋制川楝子规范化生产和质量保证提供依据。[方法]以川楝素为指标，采用高效液相色谱法（HPLC），以闷润时间、药材破碎粒度及烘制温度为考察因素，以正交实验法L9（34）优选醋制川楝子的最佳炮制工艺。[结果]最佳炮制工艺为：小粒度川楝子饮片，加20%醋拌润，闷润2 h后，置烘箱中130℃下烘干。[结论]药材破碎粒度和烘制温度对川楝子醋制工艺有显著性影响，优选出的炮制工艺稳定可行，重现性好。

川楝子；川楝素；炮制工艺；正交试验

川楝子，为楝科植物川楝（Melia toosendan Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果实，别名金铃子，又名楝实。性味苦寒，有小毒，归肝、小肠、膀胱经，具疏肝泄热、行气止痛、杀虫之功效[1]。川楝子生用有毒，炮制后能降低毒性，而且能增强理气止痛作用[2]，所以常炮制后入药。传统的炮制方法有炒焦、盐制、醋制等，中医传统理论认为，醋制川楝子可行气散瘀。醋性味酸、苦、微温，入肝经血分，具有收敛、解毒、散瘀、止痛的作用。但目前对醋制川楝子的工艺和质量控制等方面研究较少，药典也未对醋制川楝子做具体的规定，缺乏规范化的工艺过程和标准。由于川楝子的化学成分及其药理研究也较少，其有效成分尚不确定，目前认为川楝子的三萜类成分为其主要成分，其中川楝素为其三萜类成分的指标性成分，既是有毒成分又是有效成分[3]，因此常作为川楝子质量评价指标，2010版《中华人民共和国药典》规定以川楝素的含量限度作为川楝子药材和炒川楝子饮片的质量评价指标。鉴于此，本研究以川楝素为评价指标，采用正交实验初步探讨醋制川楝子的最佳炮制工艺。

1 仪器与药品

美国Softa高效液相色谱（HPLC）系统（6000 LDI PUMP；6000 PVW UV/VLS DETECTOR）；手动进样系统；烘箱DHG78-1（湖北省黄石市医疗器械厂）；粉碎机（武义县屹立工具有限公司），FA 1004N型电子天平（上海精密科学仪器有限公司），KQ-500E型医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），HH-S型水浴锅（巩义市英峪予华仪器厂）。

食用醋（天津市天立独流老醋股份有限公司），乙腈为色谱纯（天津市康科德科技有限公司），其余试剂均为分析纯，水为超纯水。川楝素标准品（供含量测定用，HPLC≥98%，批号58812-37-6，成都曼思特生物科技有限公司）。川楝子饮片购于天津市中药饮片厂，产自四川，批号1001084；经天津中医药大学中药学院生药教研室马琳教授鉴定为楝科植物川楝（Melia toosendanSieb.etZucc.）的成熟果实。

2 方法与结果

2.1 炮制品中川楝素的含量测定

2.1.1 色谱条件 色谱柱为HypersilODS2（250mm×4.6mm，5 μm），流动相为乙腈-水（30∶70），流速为1mL/min，检测波长为210 nm，柱温为35℃，进样量10μL。理论塔板数按川楝素峰计算应不低于3 000。空白溶剂色谱图中在川楝素相应位置上无干扰，说明此系统条件无干扰，见图1。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取川楝素对照品适量，加甲醇制成0.270 g/L的溶液，作为对照品储备液。

2.1.3 供试品溶液的制备 精密称量炮制品粉末（过40目筛）约1 g，置锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定质量，超声提取30min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过。重复提取3次，合并滤液蒸干，甲醇溶解定容至10mL容量瓶中，摇匀即得。

2.1.4 线性关系考察 精密吸取0.270 g/L川楝素对照品溶液，以甲醇配制质量浓度为：0.270、0.135、0.0675、0.03375、0.016875、0.0084375g/L，在上述色谱条件下测定川楝素的峰面积值，以峰面积为纵坐标Y，浓度（mg/L）为横坐标X，计算回归方程，得回归方程Y^=2 064.7X+1 053.3，r=0.999 9。川楝素在0.084 375～2.70μg范围内呈良好的线性关系。

2.1.5 精密度实验 精密吸取对照品溶液，重复进样6次，测定川楝素含量，记录其峰面积，以峰面积计算相对均数标准差（RSD）为0.146%。

2.1.6 稳定性实验 取同一供试品，分别于0、2、4、6、8、10 h进样测定，测定川楝素含量，记录其峰面积，以峰面积计算RSD为2.641%。

2.1.7 重现性实验 取同一批号样品，按照供试品溶液的制备方法，分别制备6份供试品溶液，测定川楝素含量，记录其峰面积，以峰面积计算RSD为1.831%。

2.1.8 加样回收率实验 精密称定已测知含量的样品6份各1 g，分别精密加入一定量的川楝素对照品，按含量测定方法进行测定，计算加样回收率，计算RSD为1.069%。

2.1.9 样品含量测定 精密称取川楝子生品和炮制品粉末各1 g，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，按上述含量测定项下的方法测定。

2.2 炮制工艺的优选

2.2.1 正交实验设计 由单因素实验结果可知，用醋量和烘制时间对川楝子中川楝素的含量影响不大，无统计学差异，故本实验采用L9（34）正交表对闷润时间（A）、药材破碎粒度（B）、烘制温度（C）进行考察，用醋量则选取传统用量20%，以川楝素含量为考察指标，进行工艺技术参数的筛选。因素水平见表1。

表1 因素及水平Tab.1 Factorsand Levels

2.2.2 川楝子炮制品的制备和含量测定 按正交表安排进行实验，取不同大小（B）的川楝子100 g，取定量的醋闷润不同时间（A）（醋的用量为每100 kg川楝子用20 kg米醋），置烘箱中采用不同温度（C）烘干后取出，放冷。按2.1.3项下方法制备供试品溶液，结果和方差分析见表2-3。

表2和表3结果显示：药材粒度和烘制温度对结果有显著性影响，从直观分析极差的结果可知三个因素的影响程度为C＞B＞A，即烘制温度＞药材破碎粒度＞闷润时间。醋制川楝子最佳工艺为A2B3C2，考虑到闷润时间对其结果影响不大，同时出于节约成本和资源的考虑，确定其最佳工艺为A1B3C2，即小粒度川楝子饮片100 g加入20mL醋，密闭闷润2 h后，置烘箱中130℃烘干，取出放凉。

2.2.3 验证 按上述A1B3C2工艺制备3批炮制品，按上述含量测定项下的方法测定。生川楝子中川楝素含量为1.981mg/g，三批醋川楝子中川楝素含量分别为 1.105、1.114、1.109mg/g，表明优选的工艺条件稳定合理可行。醋制品与生品相比，川楝素含量均有所下降，与生品比较醋制品川楝子中川楝素降低了约44%。

表2 正交实验结果Tab.2 The resultsof orthogonal test

表3 方差分析表Tab.3 Analysisof variance table

3 讨论

川楝子为果实类中药，浊臭有毒，在炒制过程中会产生异味令人咳嗽，同时火力控制不好还影响其质量。故本实验对川楝子的炮制方法进行改进，将川楝子用醋润透后，置烘箱中在一定温度下烘制一定时间后取出放凉即可。该法制得的川楝子饮片外观色泽均匀，且省力省时，也克服了人工操作时异味刺激鼻喉的缺点。该方法适用于大生产的要求。采用本实验所建立的炮制工艺技术参数来炮制醋川楝子，该醋川楝子中川楝素含量均明显低于生品，炮制后毒性有所降低，降低毒性的同时，仍保留其部分含量以令其发挥药效，达到毒效并存的目的。

川楝素是川楝子的主要成分之一，既为其活性成分，也是毒性成分。川楝素的结构是半缩醛结构，始终以互变异构体存在，所以计算时要以两个峰面积之和计算[3-4]。

2010版《中华人民共和国药典》[1]要求川楝子药材中川楝素的含量应为0.060%～0.20%，本实验中生川楝子符合要求。川楝子项下仅收载了炒川楝子炮制品，炒川楝子饮片中川楝素的含量应为0.040%～0.20%，但尚无醋川楝子炮制品化学成分含量限定和质量标准，本实验为建立醋川楝子中川楝素的含量限定和质量标准提供了实验数据。同时我们也将根据川楝子所含的其他成分[5-6]进行深入研究，从多成分、多药效的角度来探讨川楝子炮制后增效减毒的机制。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010，39-40.

[2]纪青华，陆兔林.川楝子不同炮制品镇痛抗炎作用研究[J].中成药，1999，21（4）：181-183.

[3]钟炽昌，谢晶曦，陈淑凤，等.川楝素的化学结构[J].化学学报，1975，33(1):35-47.

[4]舒国欣，梁晓天.关于川楝素的化学结构的修正[J].化学学报，1980，38(2):196-198.

[5]李 丰，朱 训，陈 敏，等.川楝子化学成分研究[J].中药材，2010,33（6）：910-912.

[6]周 英，王慧娟，郭东贵，等.川楝子化学成分的研究[J].中草药，41（9）:1421-1423.

The study of the processing technology of Fructus Toosendan processed by vinegar

DOUZhi-ying,LIYing-chun,ZHENGBei-bei
(Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin,300193,China)

[Objective]To optimize the bestprocessing technology of Fructus Toosendan for standardization of fructus toosendanin processed by the vinegarand provideabasis forquality assurance.[Methods]Thebestprocessing techniquewasobtained through determining thecontentof toosendaninby HPLCand theorthogonal testwasadopted toexplore the influencesof three factors(thebake temperature,infiltrated timewith vinegarandmedicinalspecifications)on the content.[Results]Thebestprocessing techniquewas to infiltrate 2 hours with 20%vinegar,bake at130℃.[Conclusion]Themedicinal specifications and the bake temperature had the significance influence according to the contentof the toosendanin.The bestprocessing technique is stable,feasible and good repetion.

Fructus Toosendan;toosendanin;processing technique;orthogonalexperiment

R284.2

A

1672-1519(2011)04-0338-03

国家自然科学基金项目（81073053）。

窦志英（1967-），女，教授，硕士研究生导师，主要研究方向为中药传统制药工艺和中药成分研究。

2011-05-07）