HPLC法测定消栓通络分散片中芦丁的含量

黄伟 郭洁

(1.陕西国际商贸学院;2.陕西中医学院 陕西咸阳 712046)

消栓通络分散片是由:川芎、丹参、黄芪、泽泻、三七、槐花、桂枝、郁金、木香、冰片、山楂等11味药制成的中药复方制剂,本品原剂型为普通糖衣片或薄膜衣片剂[1～2]。

具有活血化瘀,温经通络的功效。用于血脂增高,脑血栓引起的精神呆滞、舌质发硬、言语迟涩、发音不清、手足发凉、活动疼痛。本试验参照有关文献[3],采用高效液相色谱法对制剂中的槐花中的芦丁(C27H30O16)进行了定量控制,测定快捷、准确、可靠。

1 仪器和试药

仪器:岛津SCL-10AVP高效液相色谱仪:Shimadzu LC-10ATVP输液泵;Shimadzu SPD-M10AVP检测器;Class-vp工作站。岛津UV-2401PC紫外分光光度计。TSK-GEL DDSC18(5μm,4.6mm×250mm)色谱拄。塞多利斯BP211D电子天平。

试剂:甲醇为色谱纯(美国TEDIA公司);乙酸为分析纯;水为二次蒸馏水;其余试剂为分析纯(西安化学试剂厂)。

试药:芦丁对照品,批号:100080-200306(供含量测定用),中国药品生物制品检定所。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-乙酸(45∶53∶2)为流动相;检测波长355nm;理论板数按芦丁峰计算应不低于1500;流速0.5mL/min;柱温30℃;进样量10μL。此条件下芦丁峰计算与其它成份峰能达到基线分离,基线平稳。

2.2 测定方法

对照品溶液的制备:取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含无水芦丁0.2mg的溶液,即得。

供试品溶液的制备:取样品20片,研细,取细粉约3g,精密称定,置100mL具塞锥形瓶中,加甲醇40mL,密塞,超声处理40min,过滤,药渣再加甲醇30mL,密塞,超声处理30min,滤过,滤液置100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。

测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL,注入液相色谱仪,测定,即得。

2.3 检测波长的选择

取芦丁对照品适量,加甲醇配制成浓度为0.228μg/mL的溶液,结果表明:芦丁在355nm处有最大吸收。

2.4 提取条件的筛选

取装量差异项下的样品品60片(批号100805),研细,取细粉约3.0g,共9份,分别精密称定,分为3组。按表1设计方案进行试验:

各组超声处理完后滤过,滤液置100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL,注入液相色谱仪,照上述色谱条件测定,即得。结果见表1、表2。

表1 供试品超声方法考察结果

表2 不同超声时间芦丁含量方差分析表

由表2可看出,供试品经不同超声时间处理,对芦丁含量有显著影响。

2.5 精密度试验

取本品样品一批(批号:100805),按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液。各精密量取5μL,注入高效液相色谱仪,共测定6次,结果供试品峰面积平均值为4165378,RSD%=1.10。表明本测定方法精密度良好。

2.6 溶液的稳定性试验

取精密度试验供试品溶液,在不同间隔时间(0、1、2、3、4、5、6h)各精密吸取5μL测定1次,共测定7次,结果供试品峰面积平均值为4184199,RSD%=1.31。表明供试品溶液在6小时内基本稳定。

3 结语

采用高效液相色谱法测定消栓通络分散片中芦丁的含量,方法可靠、简便、准确、灵敏、重现性好,回收率等均符合要求,可作为该制剂的质量控制方法。

[1]国家药典委员会.消栓通络片质量标准[S].中国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2000.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2000.

[3]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫生出版社,2000.