芍药苷对荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用研究

惠爱武 冯文革 赵 岗 杨甫昭 曹兆军 褚亚军 陕西省中医药研究院 (西安 710003)

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的主要疾病之一,化疗是治疗肿瘤的有效手段,但单纯化疗会抑制骨髓造血系统,损害机体的免疫系统,导致预后不良而加速患者的死亡[1]。寻找实现增效减毒的辅助药物刻不容缓,芍药苷具有免疫调节作用,对肿瘤等有较强的抑制作用[2]。本实验通过建立小鼠体内移植性实体瘤模型,对芍药苷与 CTX联合应用的抗肿瘤作用进行实验研究,为芍药苷作为化疗辅助药的开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 ICR小鼠,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,体重 18～ 22g,实验动物质量许可证号:SCXK(陕 )2007-001。

1.2 实验瘤株 小鼠 S180肉瘤细胞株,由第四军医大学实验动物中心引进。

1.3 实验药物 芍药苷:购自中国药品生物制品检定所,批号:200933,含量为 98.1%;环磷酰胺(CTX),江苏恒瑞医药股份有限公司生产,批号:08040321。

1.4 实验仪器 电子天平:型号:BS210S精确度:0.1mg北京赛多利斯天平厂;普通光学显微镜:olympus生产;SW-CJ-2D型双人净化工作台,型号:NO.0504192,苏州净化设备有限公司生产

1.5 试验方法 按文献方法[3～5],取生长 7～ 10d,且健康状况较佳的移植性 S180种瘤小鼠,颈椎脱臼法拉颈处死种瘤小鼠,在洁净工作台内制备瘤细胞悬液 (1×107个 /mL),每只小鼠无菌条件下腋下接种 S180瘤细胞悬液 0.2mL,计瘤细胞数约为 2× 106个。次日按体重随机分为 5组,分别为荷瘤对照组(常水 10mL/kg)、CTX(20mg/kg)和 芍 药 苷 30mg/kg+CTX20mg/kg组、芍药苷 15mg/kg+ CTX20mg/kg组和芍药苷 7.5mg/kg+ CTX20mg/kg组 ,接种 S180后次日开始给药。环磷酰胺采用腹腔注射,受试药物 ig给药,每天 1次,连续给药10d。末次给药后次日,自小鼠内眦静脉丛采血,取血 20 μL加入到 0.38mL 2%冰醋酸溶液中摇匀,常规计数外周血白细胞总数。称体重后处死小鼠,剖取瘤块称重,计算抑瘤率。同时剥离左侧股骨,用 5mL2%冰醋酸溶液冲出骨髓内细胞,常规计数细胞总数,即为一根股骨中骨髓有核细胞数。抑瘤率=(对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%。

2 结 果

2.1 芍药苷对荷瘤小鼠化疗增效的影响 与荷瘤对照组比较,CTX组与芍药苷+CTX各组荷瘤小鼠瘤重明显降低(P＜0.01),并且芍药苷 30mg/kg加环磷酰胺组对瘤重的抑制作用优于单用环磷酰胺(P＜0.05),说明芍药苷可以明显增强CTX抗小鼠肉瘤 S180的作用(表 1)。

表1 芍药苷与 CTX合用对小鼠 S180肉瘤的抑制作用(±s)

表1 芍药苷与 CTX合用对小鼠 S180肉瘤的抑制作用(±s)

注:与荷瘤对照组相比:▲P＜0.01;与 CTX组相比:△ P＜0.05。

组 别 剂 量 动物数(只) 瘤 重(g) 抑制率(%)荷瘤对照组 常水 10mL/kg 10 2.62±0.59 CTX组 20mg/kg 10 0.52±0.17▲ 80.15芍药苷+ CTX 30mg/kg+ 20mg/kg 10 0.33± 0.18▲△ 87.40芍药苷+ CTX 15mg/kg+ 20mg/kg 10 0.39± 0.21▲ 85.11芍药苷+ CTX 7.5mg/kg+20mg/kg 10 0.42± 0.22▲ 83.97

2.2 芍药苷对荷瘤小鼠化疗减毒的影响 与荷瘤对照组比较,CTX组小鼠的体重及外周血白细胞和骨髓有核细胞数明显降低(P＜0.01)。芍药苷+ CTX各组可使小鼠体重明显增加,外周血白细胞数和骨髓有核细胞数显著回升(P＜0.05～ 0.01),且升高白细胞的作用有明显的剂量关系,剂量越大,升高白细胞效果越明显。 (表 2)

表2 芍药苷对小鼠 S180肉瘤化疗的减毒作用(±s)

表2 芍药苷对小鼠 S180肉瘤化疗的减毒作用(±s)

与荷瘤对照组相比:▲P＜0.01与 CTX组比较:△ P＜0.05;◇P＜0.01

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3 讨 论

化学药物、放射等治疗方法能直接杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤生长,是目前肿瘤治疗的主要手段,但其伴随而来的诸多不良反应,尤其对肝脏、肾脏、骨髓造血功能的影响尤为显著,使其临床应用受到了极大的限制。如何提高肿瘤对化疗药物的敏感性并减轻化疗药物的不良反应是目前肿瘤治疗领域中越来越引起人们重视并值得探讨的问题。本研究证明,芍药苷和环磷酰胺合用具有对抗环磷酰胺所致体重下降、白细胞降低和骨髓抑制等毒性反应,提高 CTX的抗肿瘤效果。且升高白细胞的作用有明显的剂量关系,剂量越大,升高白细胞效果越明显。因此有希望将芍药苷开发成更适合于临床的、安全有效的抗肿瘤中药制剂。这将是一个重大地研究课题。

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