氯柳酊的制备与质量控制

2011-04-09石继和刘武斌

中国药业 2011年16期

石继和，刘武斌，许斌

（1.贵州省铜仁地区人民医院药剂科，贵州铜仁 554300； 2.贵州省铜仁地区药品检验所，贵州铜仁 554300）

氯柳酊为医院自制的一种外用酊剂，主要由氯霉素和水杨酸组成，具有杀菌、抑制霉菌、溶解角质的作用，临床用于治疗头皮糠疹、寻常痤疮、毛囊炎、脂溶性皮炎等。其质量标准中分别采用紫外分光光度法测定氯霉素和中和法测定水杨酸含量，方法费时、烦琐。为此，笔者参照2010年版《中国药典（二部）》采用高效液相色谱法同时测定氯霉素和水杨酸含量，效果满意，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－20AD型高效液相色谱仪，SIL－20A型自动进样器，AUW－120D型电子天平（日本岛津）。氯霉素（南京白敬宇制药有限责任公司，批号为090606）；水杨酸（镇江前进化工有限责任公司，批号为20100329）；氯霉素对照品（批号为130555－200602），水杨酸对照品（批号为100106－200303），均购于中国药品生物制品检定所；75％乙醇（自制），乙腈为色谱纯；氯柳酊（规格为100mL，批号分别为20100704，20100714，20100726，医院自制）。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

处方为氯霉素10g，水杨酸20g，75％乙醇适量，共制成1000mL。取氯霉素与水杨酸，加75％乙醇适量，搅拌使溶解，滤过，自滤器添加75％乙醇至1 000mL，搅匀即得。

2.2 一般质量控制

2.2.1 性状

本品为无色透明液体。

2.2.2 鉴别

氯霉素：取本品2mL，加1％氯化钙溶液3mL与锌粉50mg，置水浴上加热10min，倾取上清液，加苯甲酰氯约0.1 mL，立即强烈振摇1min，加三氯化铁试液0.5mL与三氯甲烷2mL，振摇，水层显紫红色；取本品5mL，加醇制氢氧化钾试液2mL，防止乙醇挥散，置水浴上加热15min，溶液显氯化物的鉴别反应。

水杨酸：取本品2mL，加三氯化铁试液2滴，溶液显紫堇色。

2.2.3 检查

应符合2010年版《中国药典（二部）》附录酊剂项下规定[1]。

2.3 含量测定

2.3.1 色谱条件

色谱柱：Dikma C18柱（200 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：0.1％庚烷磺酸钠溶液（0.1％庚烷磺酸钠溶液500 mL，加二甲基甲酰胺5 mL、冰醋酸0.5 mL，混匀）－乙腈（75∶25）；柱温：室温；检测波长：272 nm；流速：1.0mL/min；进样量：20μL。

2.3.2 溶液制备

分别精密称取氯霉素对照品与水杨酸对照品，加适量乙醇溶解，用流动相稀释成每1mL含氯霉素50μg与水杨酸100μg的对照品溶液。充分摇匀氯柳酊样品，精密量取1mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液2.5mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按照氯柳酊的处方与制法，制备不含氯霉素与水杨酸的阴性样品，按照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.3.3 方法学考察

系统适用性与干扰性试验：精密量取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液，在拟订的色谱条件下各进样20μL。色谱图见图1。结果表明，阴性对照品溶液在上述色谱条件下不干扰氯霉素与水杨酸的含量测定，氯霉素与水杨酸分离度良好。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：精密称取氯霉素对照品9.86 mg与水杨酸对照品19.6mg，置100mL容量瓶中，加乙醇溶解并用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取1，3，4，5，6，8，12mL，置10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，制成氯霉素质量浓度为9.86，29.58，39.44，49.30，59.16，78.88，118.32μg/mL与水杨酸质量浓度为19.60，58.80，78.40，98.00，117.60，156.80，235.20μg/mL的对照品溶液。精密吸取上述溶液各20μL，注入液相色谱仪，以峰面积（A）对质量浓度（C）进行线性回归，氯霉素与水杨酸的回归方程分别为A=13.566+39.165C（r=0.999 8）和 A=18.55+7.522C（r=0.999 8）。结果表明，氯霉素与水杨酸检测质量浓度线性范围分别为9.86～118.32μg/mL和19.60～235.20μg/mL。

精密度试验：取线性关系考察项下含氯霉素49.30μg/mL与含水杨酸98.00μg/mL的对照品溶液，按拟订的色谱条件重复进样5次。结果氯霉素与水杨酸峰面积的 RSD分别为0.49％和0.44％（n=5），表明方法精密度较好。

重复性试验：取同一批样品（批号为20100704），依法制备同一质量浓度的供试品溶液6份并测定含量。结果氯霉素与水杨酸的RSD分别为0.34％和0.31％（n=6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：精密吸取已知含量的氯柳酊样品（批号为20100704）6份，分别精密加入含氯霉素39.44，49.30，59.16μg/mL与含水杨酸78.40，98.00，117.60μg/mL的对照品溶液1mL，依法进样测定，记录峰面积并计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果（n=6）

稳定性试验：取同一供试品溶液，室温放置，分别于0，2，4，8，12，24h时依法进样，记录峰面积。结果氯霉素与水杨酸的 RSD分别为0.58％和0.42％（n=6），表明供试品溶液在24h内稳定。

2.3.4 样品含量测定

取3批样品，依法制备供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20μL，按拟订的色谱条件进样，测定氯霉素和水杨酸的峰面积，并按外标法计算含量。结果批号为20100704，20100714，20100726的样品中，氯霉素与水杨酸含量分别为标示量的99.40％和99.80％，99.60％和100.20％，100.20％和100.60％。