茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定
2011-04-09何健,印伟
何 健,印 伟
(重庆市第四人民医院,重庆 400014)
茶多酚(tea polygheno)是从天然植物茶叶中分离提纯的多酚类化合物的总称,由表儿茶素、表没食子儿茶素及其没食子酸酚类组成,在干茶叶中的含量为15%~30%[1]。近年来,国内学者对茶多酚的药理作用做了大量研究,发现其具有抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、调血脂、降血糖、抗龋护齿和抑制细菌生长等多种作用[2-3],且抗氧化活性高于一般非酚性或单酚羟基类抗氧化剂,因此在医疗、食品添加剂、美容等各方面均有广阔的使用前景。从茶叶中提取茶多酚常用的方法有溶剂提取法、金属离子沉淀法和树脂吸附法等,其中以金属离子沉淀法的成本较低、方法简单、提取率较高[4-5]。笔者采用4种不同的金属盐作为沉淀剂,从茶叶中提取茶多酚,同时对市售的24个茶叶品种的茶多酚含量进行了测定。现报道如下。
1 仪器与材料
756型紫外分光光度计(上海菁华科学仪器公司);pHS-25B型pH计(上海大普仪器公司)。茶叶(市售);氯化钙、氯化钡、三氯化铝、三氯化铁、乙酸乙酯、酒石酸钾钠、硫酸亚铁等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取
取茶叶3 g,精密称重,置250 mL三角瓶中,加20倍水,煮沸30min,再加10倍水同法处理,合并煎液,冷却后分别加入不同种类和不同量的金属盐使其溶解,用1mol/L氢氧化钠溶液调pH至沉淀待沉淀完全,过滤,分别将沉淀加稀盐酸至完全溶解,过滤,滤液用乙酸乙酯提取3次,回收乙酸乙酯,将提取物于80℃烘干,即得成品。不同金属盐提取试验结果见表1。
表1 不同金属盐提取茶多酚的收率
2.2 含量测定
根据中华人民共和国国家标准GB/T8313-2002的方法,精密称定茶叶3 g,置250mL三角瓶中,加入沸水浸泡45min,过滤,冷却后吸取一定量滤液,加入酒石酸亚铁试液显色,用紫外分光光度计于540 nm波长处测定吸光度,计算出茶叶中茶多酚含量。
2.3 含量测定影响因素试验
2.3.1 浸泡温度和时间
按2.2项下方法进行试验,结果见表2。
表2 不同浸泡温度和时间提取时的茶多酚含量(%)
2.3.2 溶液pH和放置时间
称取茶叶3 g,置250 mL三角瓶中,加入沸水250 mL,浸泡1h,其间每隔10min振摇1次,冷却后,分别吸取2mL浸泡液,置50mL容量瓶中,共6份,分别加入酒石酸亚铁试液10 mL,用0.1mol/L稀盐酸和0.1mol/L氢氧化钠溶液调成不同pH,加水至刻度,放置一段时间后测定茶多酚含量。结果见表3。
表3 不同pH提取时的茶多酚含量(%)
2.4 市售茶叶含量测定
取24种市售茶叶,每种3 g,按2.2项下方法测定茶多酚含量。结果见表4。
表4 24个品种的市售茶叶中茶多酚含量测定结果
3 讨论
金属离子沉淀法提取茶叶中的茶多酚,优点是方法简单、消耗有机溶剂少,产品纯度较高,可达98%。本试验中,以无水三氯化铝作沉淀剂时提取率可达8.77%,而无水三氯化铁的提取率最低,只有1.7%,且产品呈灰黑色,不可采用。此外,产生的沉淀量与溶液pH有关。
测定茶叶中茶多酚含量时,标准规定以100℃热水浸泡45min,pH=7.5为宜。本试验中,对40~120min的浸泡时间进行了比较,测定结果相差不大,且pH为6.6时的含量大于pH为7.5时的含量。
考察市售24个品种茶叶中茶多酚含量时发现,苦丁茶最低,只有1.08%,红茶为8.9%,一般花茶、绿茶等均在15%~29%之间。因为苦丁茶不属于绿茶系列,其植物来源为另一品种,如贵州产苦丁茶为小叶女贞树嫩芽,故茶多酚含量低;而红茶因制作工艺与绿茶不同,故茶多酚含量也较低。
[1]赵卫星,姜洪波,王 燕.天然抗氧化剂——茶多酚提取、分离和纯化方法[J].广东化工,2010,37(8):7-8.
[2]王聪慧,张星星,孙莉颖.茶多酚药理作用研究进展[J].中国药业,2010,19(4):62-63.
[3]蒋 勤.茶多酚的药理作用[J].中国药师,2006,9(1):63-64.
[4]孙志栋,顾富强,梁月荣,等.茶多酚提取优化工艺研究[J].天然产物研究与开发,2007,19(B11):490-493.
[5]刘蒙佳,陈锦屏.茶多酚提取方法的研究进展[J].现代生物医学进展,2006,6(7):70-72.