萄泰牌氯己定复方消毒液的毒理学评价

丁 晟，谌乐礼，夏芝璐，吴 争，张维民，蔡 宏，肖 岗，邓奇涛

(江西省疾病预防控制中心，江西 南昌 330029)

葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液主要有效成分为葡萄糖酸氯己定，为粉红色透明略为黏稠的液体，为皮肤黏膜消毒药剂。某些葡萄球菌、变异链球菌、唾液链球菌、白假丝酵母菌、大肠埃希菌和厌氧丙酸菌对本品高度敏感。低浓度有抑菌作用，高浓度则有杀菌作用。为了解其毒性、和致突变、亚急性毒性作用，按照《消毒技术规范》2002年版[1]的要求，对样品进行小鼠经口急性毒性试验，致突变作用和亚急性毒性的实验研究，为葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液的应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 样品及处理 样品葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液主要有效成分为葡萄糖酸氯己定 (由上海利康消毒高科技有限公司提供)，根据各项试验要求进行相应的配制。

1.2 实验动物 SPF级ICR小鼠体重 18～22g 20只，体重25～30g50只，雌雄各半，体重60g左右SPF离乳SD大鼠80只，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供(许可证号：SCXK(沪)2003-0002)。 实验动物饲养在已取得使用许可证的屏障环境 (使用许可证：SYXK(赣)2007-0001)中进行，全价颗粒饲料饲养。

1.3 方法 按照卫生部 《消毒技术规范 》2002年版施行。

1.3 .1小鼠经口急性毒性试验小鼠按体重随机分为2组，每组10只，雌雄各半。小鼠禁食过夜，采用一次最大限度法。称取5g样品，用蒸馏水溶解至20ml作为受试物。取受试物直接灌胃，连续观察14d，并记录小鼠中毒症状和死亡情况，观察期结束后动物称重，处死后进行尸检。

1.3 .2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 小鼠按体重随机分为5组，高、中、低剂量组、阳性对照、阴性对照，每组10只，雌雄各半。以40mg/kg·BW剂量的环磷酰胺为阳性对照(CP)，蒸馏水为阴性对照。雌、雄性剂量组均为 5000、2500、1250mg/kg·BW/天，采用经口灌胃30h染毒法进行试验，灌胃容量为0.4mL/20g.BW。末次灌胃后6h，颈椎脱臼处死动物，取股骨骨髓用小牛血清稀释涂片，甲醇固定，吉姆莎染液(Giemsa)染色。在光学显微镜下，每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察含微核的嗜多染红细胞数 ，同时观察200个嗜多染红细胞视野内的成熟红细胞数(NCE)，计算 PCE/NCE值和微核率。

1.3 .3亚急性毒性试验 用体重60g左右SPF离乳SD大鼠80只，按体重随机分为4组，每组20只，雌雄各半。受试物设置3个剂量为1000、500、250mg/KgBW，蒸馏水为对照组。连续灌胃30d，1次/天。单笼喂养，自由饮食，记录大鼠进食量、体重，连续观察30d。观察指标：动物的一般表现、体重、食物利用率；血常规及生化指标：白细胞计数及其分类、红细胞计数、血红蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白；主要脏器重量及脏体比。放血处死动物后进行解剖，大体观察，对主要脏器肝、脾、肾、睾丸(或卵巢)称重；病理组织学检查：在对各剂量组动物做大体检查未发现明显病变和生化指标未见异常改变时，仅对高剂量和对照组动物进行肝、脾、肾、胃、十二指肠、睾丸(或卵巢)病理组织学观察。统计处理：计量资料用t检验。计数资料用χ2检验。

2 结果

2.1 小鼠经口急性毒性试验

由表1可见，葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液对雌、雄性小鼠急性经口 LD50＞5000mg/kg·BW，属实际无毒。

表1 急性经口毒性试验结果

2.2 小鼠骨髓微核实验

由表2可见，各剂量组微核率与阴性对照组比较统计学上差异无显著性且均在本实验室正常值范围内，而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组比较统计学上差异有显著性(P＜0.01)。表明样品小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验在此试验条件下结果为阴性。

表2 小鼠骨髓微核发生率及PCE/NCE值

2.3 亚急性毒性试验

由表3～表9可见，该样品各剂量组动物体重、食物利用率、主要脏体比与对照组比较差异无显著性(P＞0.05)。对照组和各剂量组的白细胞计数及其分类、红细胞计数、血红蛋白及各项生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、白蛋白)均在本实验室正常参考值范围内。各剂量组肝、肾、脾、睾丸(或卵巢)重量及其与体重的比值与对照组比较未见异常(P>0.05)。各组动物大体解剖与主要脏器病理组织检查均未见有意义的病理变化。

表3 受试物对大鼠体重的影响

表4 受试物对大鼠食物利用率的影响

表5 受试物亚急性经口毒性试验血液学检查结果

表6 受试物对大鼠WBC的影响

表7 亚急性经口毒性试验末期生化检验结果

表8 受试物对大鼠脏体比的影响

表9 受试物对大鼠脏体比的影响

3 讨论

葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液急性经口毒性试验属于实际无毒，小鼠骨髓细胞微核试验阴性，亚急性毒性试验阴性。葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮肤清洗消毒液主要成分为葡萄糖酸氯己定和丙二醇，氯己定类消毒剂被称为目前用于皮肤及粘膜消毒的一种优良消毒剂，氯已定类消毒剂的水溶液或醇溶液能快速杀死一般病原菌，广泛用于皮肤粘膜和创面的消毒[2]；而丙二醇具有一定杀菌作用[3]，同时作为溶剂，可增加生物膜通透性，起到增强杀菌作用。本研究结果说明，由葡萄糖酸氯已定与丙二醇组成的皮肤清洗消毒液毒理学评价未发现有阳性体征和异常病理学及检验指标改变。据文献报道氯已定类消毒剂在临床使用过程中也有不良反应发生，有报道用氯已定溶液口腔消毒引起舌头褪色、口腔疼痛；也有老年女性使用阴道醋酸氯已定栓剂，出现烧灼感、疼痛、渗血和溃疡，伴有发热和腰痛的报道[4]。通过用药，适宜的酸碱度可改变阴道内的pH值，改善局部微环境，恢复阴道自净作用，从而有效控制感染。但是经常对阴道进行较大浓度的给药，也可造成不同程度的阴道和宫颈上皮的损伤，反而破坏了阴道所固有的自洁系统，使局部抵抗力下降[5]。因此，在使用此类消毒剂对人体消毒时，应该严格控制使用浓度以及消毒作用时间。

[1]卫生部卫生法制与监督司..消毒技术规范[S].2002:126-135.

[2]胡国庆,林军明,潘协商,等.诗洁手消毒液消毒效果和毒性实验研究[J].中华医院感染学杂志,2003,13(1):43-45.

[3]张桂香.丙二醇熏蒸对手术室空气消毒效果的检测[J].中国消毒杂志,1996,13(3):184.

[4]马 鸽,倪根珊.洗必泰的临床应用[J].医药导报,1994,13(3):119.

[5]肖 岗,丁 晟,谌乐礼,等.妇科(抗抑菌)凝胶I型对家兔阴道黏膜刺激试验[J].实验与检验医学,2011,29(1):80.