大肠癌组织中CD25、CD28的表达变化及意义

郑兴斌,杨伟明,赵洪远,刘 宙,王超宇

(遵义医学院附属医院,贵州遵义 563003)

免疫系统在肿瘤的发生发展过程中起着十分重要的作用,肿瘤浸润的免疫细胞主要有 T淋巴细胞、NK细胞、B淋巴细胞及巨噬细胞,这些细胞通过参与宿主的免疫反应与肿瘤抗原相作用,以消除肿瘤细胞或控制肿瘤生长。肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)与各种原发肿瘤的预后密切相关[1],CD25、CD28即是重要的TIL亚群。1990年6月～2006年 6月,我们观察大肠癌组织中 CD25、CD28的表达变化,并探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 大肠癌60例,男 31例,女 29例;年龄26～78岁,中位年龄52岁;Dukes分期A+B期31例,C+D期29例;伴有淋巴结转移 46例,无淋巴结转移14例;生存期≥5a者30例,≤3a者30例。患者术前均未接受其他任何治疗,术中留取癌组织及癌旁正常组织标本。

1.2 CD25、CD28检测方法 采用免疫组化Envision法。将石蜡块切片至 4μm厚,切片脱蜡至水,双氧水孵育10min以去除过氧化物酶,至PBS液漂洗, pH6.0柠檬酸溶液微波修复10min,PBS冲洗5 min×3次,加一抗后4℃冰箱过夜,PBS冲洗5min ×3次,滴加二抗至37℃孵育30min,PBS冲洗5 min×3次,DAB显色,苏木素复染,脱水,透明,最后封片。以PBS代替一抗作阴性对照,扁桃体病理切片作阳性对照。结果判定：CD25定位于细胞质和细胞膜,呈棕褐色,形成环状,弥漫分布;CD28定位于细胞质和细胞核,呈棕褐色,形成条状,弥漫分布。利用多功能病理图像采集仪,400倍光镜下观察,选取阳性细胞表达最高的 5个视野,计算阳性细胞百分数,＜10%为阴性,＞10%为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。率的比较采用 χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

大肠癌组织中 CD25、CD28阳性率分别为25.0%、36.7%,癌旁正常组织分别为 55.0%、76.7%,两者比较,P＜0.05。CD25、CD28表达与大肠癌临床病理参数的关系见表 1。由表可见,CD25、CD28表达与大肠癌Dukes分期、淋巴结转移及患者存活期有关(P均＜0.05)。

表 1 大肠癌浸润淋巴细胞CD25、CD28与其临床参数的关系

3 讨论

CD25是白介素2受体(IL-2R)的α链,主要分布在活化 T细胞、B细胞和巨噬细胞。T细胞通过抗原提呈细胞(APC)递呈的抗原产生活性,在T细胞膜表面表达CD25即IL-2R,并分泌产生IL-2。因此,CD25可反映活化T细胞的增殖,被认为是激活T淋巴细胞的标志[2]。T细胞的完全活化不仅需要APC表面的MHC-抗原态复合物与T细胞受体(TCR)结合并相互作用,即第一信号作用,该信号确保了免疫应答的特异性;同时,免疫应答的产生还需APC表面的共刺激分子与 T细胞相应配体结合,使T细胞具有免疫活性。其中最重要的共刺激分子为APC表面的B7-1和B7-2,他们与T细胞表面的同质二聚体 CD28分子结合[3,4],进行细胞的免疫应答,包括促进IL-2和初始T细胞分化为效应T细胞和记忆 T细胞。CD28细胞在大肠癌患者早期存在表达,但随着肿瘤的进展,CD28的表达逐渐降低,T细胞处于无应答状态,肿瘤抗原逃避自身免疫监视,进而产生免疫耐受使肿瘤不断生长与转移。

本研究发现,CD25和CD28在癌组织内的表达明显低于癌旁正常组织,表明大肠癌组织中 CD25和CD28细胞减少,其原因可能为大肠癌中缺乏引起TIL表达的细胞因子或肿瘤细胞抗原性弱对免疫因子低表达。同时活性低下TIL不能进一步接受APC上的MHCⅡ类分子与抗原肽共刺激分子双重信号,阻止 T细胞的活化及多种细胞因子的释放,使抗肿瘤效应的T细胞减弱,从而不能有效地发挥抗肿瘤免疫。赵洁敏等[4,5]研究发现,随着大肠癌 Dukes分期的增高及淋巴结转移的发生,CD25及CD28表达相对减少;这可能是随着肿瘤浸润程度的加重,肿瘤局部免疫功能处于明显抑制状态,这对肿瘤的生长、浸润乃至转移有着明显的影响。这说明 CD25和CD28细胞在防止肿瘤进展方面起着重要作用,因此,如何提高CD25和CD28在肿瘤组织中表达率有待进一步研究。

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