麻疹患儿T细胞亚群以及相关细胞因子研究

潘晓芬，刘玉玲，林国模

（中山市博爱医院儿科，广东 中山 528400）

麻疹患儿T细胞亚群以及相关细胞因子研究

潘晓芬，刘玉玲，林国模

（中山市博爱医院儿科，广东 中山 528400）

目的了解麻疹患儿的免疫状态变化。方法采用流式细胞仪以及ELISA法检测疹初、疹后患者体内CD4+T、CD8+T、TL-2、TL-4、TL-6、TL-10水平，再与健康儿童比较。结果麻疹患儿出疹早期CD4+T水平低于正常,CD8+T水平轻微上升，出疹后CD4+T/CD8+T逐步恢复正常，TL-2出疹早期上升明显（P＜0.05），疹后有下降但仍维持较高水平（P＜0.05），CD8+T、TL-4、TL-6水平出疹早期低于正常，出疹后上升（P＜0.05），TL-10疹初、疹后均维持较高水平（P＜0.05），T细胞亚群和相关细胞因子变化趋势与性别、年龄无关，但年龄越小的患者，出疹早期CD4+T/CD8+T比值越低，疹后越高。结论麻疹患儿存在暂短、可逆的免疫抑制，TH1/TH2共同参与麻疹免疫，TL-2早期升高明显，提示以TH1为主，后期TL-4、TL-6明显上升提示TH2发挥重要作用，TL-10可能参与了这种免疫调控，患儿年龄愈小，免疫紊乱可能越严重。

麻疹；T淋巴细胞亚群；细胞因子；儿童

麻疹属呼吸道急性传染性疾病，未接种人群普遍易感，我国自减毒活疫苗广泛使用以来，其发病率已显著降低，但局部地区仍有散发流行。近年来由于人口流动增加，漏种情况十分普遍，导致发病例数有上升趋势。2004年珠三角地区麻疹抗体流行病学调查显得本地区有局部爆发流行可能[1]。针对这种情况，了解麻疹患者出疹前后的免疫状况以期合理的治疗显得十分重要，为此本次试验研究了麻疹患儿出疹前后的T细胞亚群以及相关细胞因子水平，为临床诊治提供指导。

1 资料与方法

1.1 入选标准 选择2008年2月至2010年10月间来我院儿科住院的麻疹患儿，男性45例，女性18例；平均（5.6±1.2）岁，最大12岁，最小年龄5个月，年龄组分布为5～24个月30例，2～6岁22例，＞6岁11例。入选标准符合：①麻疹疹断标准[2]；②无麻疹疫苗接种病史，既往无麻疹病史；③院外未使用抗生素以及抗病毒药物；④无继发感染。对照组为30名来我院保健门诊检查健康儿童，平均（6.6±1.5）岁。

1.2 试验方法 麻疹患儿入院当日以及出疹后4 d各采静脉血3 ml，加入肝素，离心1 500 r/min 2 min，分离血清与血浆,采用流式细胞仪（Fascalibur流式细胞仪器，美国BD公司）检测T淋巴细胞亚群（），参照陈杰等[3]报道的方法。离心后的血清采用细胞因子试剂盒检测（深圳晶美生物工程有限公司），具体方法依说明书。对照组检测方法同上述。

1.3 统计学分析 实验数据采用SPSS13.0软件统计，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疹初与疹后T细胞亚群以及相关细胞因子检查情况 麻疹患者T细胞在疹初下降，而在出疹后恢复正常，T细胞疹初有轻微上升，但差异无统计学意义。TL-2疹初明显上升，疹后虽有下降但仍高于正常。TL-10在疹初、疹后均维持较高水平，TL-4、TL-6在疹后快速上升。检测结果见表1。

表1 疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

表1 疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

项目对照组(n=30) CD4+T（%）CD8+T（%）TL-2（μg/l）TL-4（μg/l）TL-6（μg/l）TL-10（μg/l）麻疹组（n=63）疹初35.3±2.1* 25.6±3.7 24.6±1.1* 2.8±1.4 4.1±1.5 7.6±1.5*疹后40.3±1.9 23.2±2.7 15.0±1.1* 5.4±1.2* 9.0±1.1* 9.7±1.9* 39.2±1.7 22.5±2.1 7.2±1.1 3.1±0.9 4.9±1.3 3.7±0.7

2.2 各年龄段患者T细胞亚群与细胞因子疹初、疹后检出情况 不同年龄段的患者，疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子变化趋势基本一致，年龄越小的患者，疹初T比例最低，出疹后最高，但不同年龄组之间差异无统计学意义。检测结果见表2。

2.3 不同性别患者T细胞亚群与细胞因子疹初、疹后检出情况 不同性别患者疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子变化趋势一致，无明显性别差异。检测结果见表3。

表2 不同年龄段患者疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

表2 不同年龄段患者疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

项目＞6岁（n=11）2～6岁（n=22）CD4+T（%）CD8+T（%）TL-2（μg/l）TL-4（μg/l）TL-6（μg/l）TL-10（μg/l）5～24个月（n=30）疹初34.9±3.9 26.0±6.7 23.2±3.1 2.9±1.6 4.3±1.5 7.4±2.5疹后41.1±3.9 22.4±5.1 14.6±5.1 5.9±1.7 8.6±2.5 10.4±4.2疹初35.7±4.7 25.1±4.5 26.5±4.8 2.8±1.8 3.5±1.7 7.6±2.8疹后39.8±5.4 23.5±4.1 15.9±5.7 4.9±1.8 9.5±3.7 9.1±3.8疹初35.5±4.9 25.7±5.1 24.5±5.8 2.8±1.8 4.8±2.7 8.2±3.1疹后39.1±4.3 24.5±4.7 14.1±6.8 5.1±2.3 9.1±3.5 9.0±3.6

表3不同性别患者疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

表3不同性别患者疹初、疹后T细胞亚群与细胞因子检出情况（±s）

项目 男（n=45）出疹前35.4±3.7 25.7±4.1 24.9±3.1 2.7±1.4 4.2±1.6 7.5±2.3 CD4+T（%）CD8+T（%）TL-2（μg/l）TL-4（μg/l）TL-6（μg/l）TL-10（μg/l）出疹后40.5±2.1 22.9±2.8 14.9±4.1 5.3±1.5 8.8±1.6 9.4±2.4女（n=18）出疹前35.2±3.1 25.2±5.1 23.7±4.1 2.8±1.9 3.9±2.0 7.8±3.0出疹后39.9±4.3 24.1±3.7 15.5±3.9 5.5±2.2 9.4±2.5 10.3±3.5

3 讨论

麻疹病毒属副黏病毒，人类是唯一的自然宿主，感染后激发机体特异性免疫应答，形成持久免疫力，此过程中T细胞发挥了重要作用，它是免疫应答的关键细胞，胸腺缺失或发育不良的患者临床表现更为严重[4]。T细胞依据其表面不同分子的表达，分为T以及NK细胞，其中细胞为辅助T细胞，参与机体细胞免疫与体液免疫，决定机体的整个免疫状况。研究显示，感染的早期阶段下降，而T不变甚至会增加，引起T比值下降，机体免疫功能轻度抑制[5]，本次研究也观察到出疹早期下降以及轻度上升，出疹后恢复正常。既往认为是麻疹病毒感染后引起抑制性因子IL-4水平上升所致[2]，但本次研究的结果却显示出疹早期IL-4水平低于正常，类似情况还见于巨细胞病毒以及呼吸道合包病毒感染早期阶段，提示这种轻度免疫抑制可能是机体对病毒感染的一种非特异性免疫应答，分泌的限制性Ts因子可能是早期免疫抑制的主要原因[6]。

细胞因子由免疫细胞分泌，以自分泌以及旁分泌的形式发挥作用，因子之间相互拮抗、相互协调，形成免疫调节网络。IL-2主要由TH1细胞分泌，促进T细胞各亚群的增殖、活化，诱导TH0细胞向TH1细胞转化，促进TH1免疫发展。IL-4、6主要由TH2细胞分泌，诱导B细胞活化、增殖，促进TH2免疫。此外，IL-4还可促进Th0细胞向Th2细胞分化；IL-6刺激抗体分泌。这些因子水平的高低，反映了机体的免疫状况。国内愈蕙曾报道[7]，成人麻疹免疫是TH1/TH2免疫共同参与的结果，本次研究也证实了这一点。在出疹的早期阶段，IL-2水平远高于正常，而IL-4、6低于正常，提示此阶段TH1免疫占优势，出疹后4 d，IL-4、6水平明显上升，高效价抗体已广泛生产，TH2发挥主导的作用，但值得注意的此时IL-2虽然较前有下降，但仍然高于正常，提示TH1免疫仍发挥着重要的作用，这种状况可能更有利感染细胞内的清除，但不清楚的这种高水平的IL-2可以维持多长时间。IL-10也由TH2细胞产生，作用除了抑制巨噬细胞的抗原递呈和辅助T细胞应答功能外，还可抑制Th0细胞向Th1细胞分化及细胞因子产生，在本次研究中一直处于较高水平，有研究认为这种高水平的IL-10来源于体内的Trg细胞，其作用可能在于调节TH1/TH2免疫，此外还可能限制免疫反应的进一步扩大，减少自身免疫性损伤，但能否成为判断麻疹严重程度的指标尚需进一步研究。

另外，本次试验也首次对不同年龄段、不同性别的麻疹患者T细胞亚群以及相关细胞因子进行了比较，发现麻疹患者T细胞亚群以及相关细胞因子变化趋势与年龄、性别无关，但年龄越小的患者，出疹早期体内T比值越低，而疹后越高。提示年龄越小的患者免疫功紊乱可能越严重。

综上所述，麻疹患儿存在暂短、可逆的免疫抑制，这种抑制可能是机体对病毒感染的一种非特异性免疫反应。TH1/TH2共同参与麻疹免疫，早期以TH1为主，后期TH2发挥重要作用，TL-10在麻疹免疫中发挥重要调控作用，年龄越小的患者，免疫功能紊乱可能越严重。

[1]郑焕英,刘 冷,郭 雪,等.珠江三角洲地区2004年流动儿童麻疹免疫状况血清流行病学调查与分析[J].中国计划免疫,2006,12 (1)∶35-37.

[2]胡亚美,江载芳.实用儿科学[M].7版.北京∶人民卫生出版社, 2002∶728-732.

[3]陈 杰,袁岳沙,李 琦,等.支气管哮喘患儿T淋巴细胞亚群变化及相关细胞因子对Th细胞的调节[J].实用儿科临床杂志, 2010,25(9)∶643-645.

[4] Ilonen J,Makela MJ,Ziola B,et al.Cloning of Human T cells specific for Measles Virus haemagg lutin in and nucleocapsid[J]. Clin Exp Immunol,1990,81(2)∶212-217.

[5]韩国强,汪洪姣,张桂莲.麻疹脑炎患儿淋巴细胞测定的临床评价[J].临床儿科杂志,2002,20(5)∶273-274.

[6]谌建新.麻疹病毒感染与免疫[J].地方病通报,2008,23(4)∶59-60. [7]愈 蕙.成人麻疹病例免疫功能研究[D].全国优秀博士论文, 2009∶55.

Changes of T cell subsets and related cytokines in children with measles.

PAN Xiao-fen,LIU Yu-ling,LIN Guo-mo.Department of Pediatrics,Zhongshan Boai Hosptial Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the immunization status in children with measles rash.MethodsFlow cytometry and ELISA was employed to investigate the changes of CD4+T,CD8+T,TL-2,TL-4,TL-6,TL-10 in early rash and after rash,and then compared with those in healthy children.ResultsT decreased,whileT increased in early rash,and returned to normal after rash.TL-2 increased significantly in early rash(P＜0.01),and decreased after the rash,but still maintained high level(P＜0.05).TL-4,TL-6 was low and increased immediately after the rash(P＜0.05),and TL-10 always maintained a high level in early rash and after rash(P＜0.05).All the changes had no relation with gender and age,but in younger patients,the younger the patients,the greaterT declined may be in the early rash.ConclusionThere is the brief reversible immunosuppression in children with measles,TH1 dominates the early while TH2 plays an important role after rash.TL-10 plays an important regulatory role in children with measles immunization.Immune disorders may be more serious in younger patients

Measles;T lymphocyte subsets;Cell factor;Children

R511.1

A

1003—6350（2011）14—095—03

潘晓芬（1975—），女，广东省兴宁市人，主治医师，学士。

2011-04-10）

·检验与临床·