狐源须毛癣菌对不同动物毛发破坏作用的观察

史振国,金艺鹏,郭 英,乔志军,林德贵

(中国农业大学动物医学院,北京海淀 100193)

须毛癣菌可以引起多种动物的皮肤真菌病,主要表现为瘙痒、脱毛或者断毛,患部出现大量皮屑,部分出现红肿或者继发感染,在皮毛动物的规模化养殖中,已经渐渐引起人们的重视,须毛癣菌病在导致皮毛动物产品淘汰、降级的同时,还引起其他动物,包括人的皮肤病,研究须毛癣菌对不同动物毛发的破坏作用,具有重要的公共卫生意义。

1 试验材料

受试菌株来自山东潍坊一养殖小区的临床分离株。毛发采用儿童和幼龄动物的毛发,3 d之内未使用过洗发剂,高压灭菌备用。

矿物质培养基:每1 000m L蒸馏水中含0.5 g MgSO4;0.1 g KH2PO4;0.01 g FeSO4×H2O;0.005 g ZnSO4×7H 2O,高压灭菌,分装 50 m L每份,备用[1]。

2 试验方法

2.1 须毛癣菌的活化 取临床分离菌株,置沙氏培养基中,27℃培养活化7 d,备用。

2.2 须毛癣菌菌悬液的制备 取活化好的须毛癣菌,挑取菌落置于生理盐水中,震荡制成菌悬液,用血细胞计数板调节浓度,使小分生孢子浓度为105CFU/m L。

2.3 接种与观察 将已经高压好的毛发剪成1 cm左右,取100m g,置于50m L矿物质培养基中,然后接种5m L已配制好的菌悬液。27℃培养4周,每天观察须毛癣菌在培养基中的生长速度,每周取1次毛发,用光学显微镜和扫描电镜观察毛发被破坏的程度。

3 试验结果

3.1 菌落生长速度的观察 第6天在含有狐狸毛发的矿物质培养基中出现了可见的菌落,可见少量的菌丝紧紧围绕毛发生长,第8天在含有猫的毛发的矿物质培养基中出现了可见的菌落,第11天时含有犬毛发的矿物质培养基中出现了可见菌落,一直到第28天,含有人的毛发的矿物质培养基中一直未见明显菌落,菌落的特点眼观未见明显差异,但是含有狐狸毛发的矿物质培养基中须毛癣菌的生长明显占优势,其次是猫和犬,而含有人的毛发的矿物质培养基中须毛癣菌的生长最差。

3.2 扫描电镜和光学显微镜对毛发破环程度的观察 光学显微镜观察结果显示,从第1周开始,4种不同来源的动物毛发周围,均可见到须毛癣菌沿毛发生长(图1),但是菌丝密度不一,狐狸毛发周围菌丝密度最大,其次是猫和犬,人的毛发周围菌丝的密度最小,提示狐狸毛发最适合须毛癣菌的生长,与肉眼观察菌落生长的结果相符。严重时可以见到毛发周围呈毛刷状(图2),但是对不同来源的动物毛发破坏的严重程度,在光学显微镜下无明显差异。

4次扫描电镜观察结果显示,须毛癣菌对4种不同来源的毛发破坏有明显差异,其中人的毛发对须毛癣菌的抵抗力最强,第4周末只有轻微的破坏,可见毛小皮轻微翘起(图3);而狐狸毛发对须毛癣菌的抵抗力最弱,第四周末时观察发现,毛发已经严重侵蚀,出现凹陷性缺损和穿孔(图4);而犬和猫的毛发的抵抗力则介于两者之间,第4周末可见须毛癣菌的菌丝侵入其毛发,毛小皮脱落严重,排列疏松,但尚未破环毛发髓质,未造成毛发的穿孔(图5)。电镜观察须毛癣菌对4种不同来源的毛发的破坏程度的比较见表1。

4 讨论

在目前皮毛动物的规模化养殖中,由须毛癣菌引起的皮毛动物的皮肤病已经越来越受到人们的重视,须毛癣菌不仅可以造成皮毛动物产品的淘汰和降级,而且可以引起人的皮肤癣病[6-10]。多数学者认为,须毛癣菌在体外可以破坏动物的毛发,但是国内尚未见有用扫描电镜观察须毛癣菌对不同动物的毛发的破坏作用。本试验选用不含任何碳源和氮源的矿物质培养基,加入不同动物的毛发培养须毛癣菌,用光学显微镜和扫描电镜观察不同须毛癣菌的生长和对毛发的破坏作用,从而推断不同动物对须毛癣菌的易感性的差异。

表1 须毛癣菌对4种不同来源的毛发的破坏程度

须毛癣菌是一种嗜角质真菌,通过机械的破坏作用和分泌角蛋白酶(包括丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶[2])将动物的角蛋白分解为短的多肽和氨基酸,来获取碳源和氮源,从而满足自身生长繁殖的需要[3]。动物体的毛发、指甲、表皮都是由角蛋白组成,而角蛋白的一个重要的特性是含有较大量的含硫氨基酸,从而形成较多的二硫键,使角蛋白的可以抵抗一些机械的破坏和一些酶的分解[4]。有报道称二硫键可以在须毛癣菌合成花生四烯酸类物质时分解,二硫键含量的多少决定了角蛋白对须毛癣菌的抵抗力[5]。由本试验的观察结果得知,人的毛发对须毛癣菌的抵抗力最强,提示组成人的毛发的角蛋白二硫键含量最高,而且在相同条件下,在含有人的毛发的矿物质培养基中,须毛癣菌的长势最差,提示须毛癣菌很难分解人的毛发作为碳源和氮源来满足自身的生长,所以在此推测,人对须毛癣菌的易感性最差,而狐狸最易感,犬和猫的易感性介于两者之间。

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