野菊花注射液玻璃体内注射对兔缺血再灌注损伤视网膜中SOD、MDA水平的影响

张永利,张铁华,冯桂玲

(1唐山市协和医院,河北唐山 063000;2玉田县人民医院;3唐山市职业技术学院)

视网膜缺血再灌注损伤在临床上广泛存在,而有效治疗措施很少[1～5]。野菊花具有良好的抗氧化作用。2009年 1～9月,我们观察了野菊花注射液对兔缺血再灌注损伤视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响,旨在探讨其对缺血再灌注损伤视网膜的保护作用。

1 材料与方法

1.1 材料 纯种大耳白兔54只,健康雄性,体质量(3.0±0.2)kg;野菊花注射液;超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)检测试剂盒;722S分光光度计,可调高速匀浆机,高速冷冻离心机等。

1.2 分组与造模 将54只兔随机分为A组6只及B、C组各 24只,A组不予处理,B、C组通过升高眼内压造成视网膜缺血后,再恢复正常眼内压制作成兔视网膜缺血再灌注损伤动物模型[1],B、C组分别于玻璃体内注射平衡盐溶液和野菊花注射液各 0.1 m l。

1.3 视网膜中SOD、MDA检测方法 分别于治疗后 1、6、24、72 h处死动物,取出视网膜,制成匀浆,采用生化法检测SOD活性及MDA水平,严格按试剂盒说明书操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0软件。所得数据以±s表示,组间比较采用t检验,同组不同时间点数据比较采用方差分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各组兔视网膜中SOD活性及MDA水平比较,见表 1。由表 1可见,与 A组比较,B组视网膜中MDA升高,随后逐渐下降;SOD活性降低,随后逐渐增强,到72 h均恢复至正常范围。C组SOD活性及MDA水平变化趋势同B组,但与B组比较,P均＜0.05。

表1 各组各时点视网膜中SOD活性、M DA水平比较(μmol/m g prot,±s)

表1 各组各时点视网膜中SOD活性、M DA水平比较(μmol/m g prot,±s)

注:与A组比较,＊P＜0.05;与B组比较,#P＜0.05

组别 MDA 1 h 6 h 24 h 72 h SOD 1 h 6 h 24 h 72 h A组 6.51±1.05 — — — 222.06±15.79 — — —B组 15.10±1.33＊ 12.32±1.52＊ 9.61±1.53＊ 7.29±1.19＊ 164.58±12.76＊ 285.16±4.15＊ 240.75±17.19＊ 218.45±19.10 C组 13.13±1.22＊# 9.82±1.41＊# 8.11±1.10＊# 6.70±1.20 241.75±19.82＊#333.77±19.52＊#289.16±15.97＊#229.33±12.52

3 讨论

Oz等[6～9]在实验中发现,仅 5～10 min的缺血后再灌注即可造成视网膜细胞层的明显凋亡。大量研究表明,缺血组织再灌注时可产生较多的氧自由基,引发生物膜中脂质过氧化,从而使生物膜遭到破坏。因此,清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应,可消除炎症、减轻组织缺血再灌注损伤。

水溶性野菊花,是一种良好的氧自由基清除剂,可消除缺血再灌注过程中产生的自由基,减少自由基的形成,起到保护细胞、减轻缺血再灌注对细胞的损害作用。实验研究证明[10,11],野菊花水提液对大鼠心、脑、肝、肾体外脂质过氧化均有不同程度的抑制作用,并呈量效关系,在缺血再灌注中具有保护作用。

本实验中,MDA是脂类过氧化反应的最终产物之一,是脂类过氧化反应的标志;SOD是机体清除超氧阴离子自由基的一种重要酶,其活性的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力。而 MDA的高低又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度。本研究结果显示,治疗组各时点 MDA水平均较损伤组低,而 SOD活性均较损伤组高,提示野菊花注射液能明显降低脂质过氧化物的产生,提高超氧化物歧化酶的活性。野菊花注射液对视网膜缺血再灌注损伤的保护机制复杂,可能与其主要成分刺槐素和其他黄酮有关[12],具体作用有待进一步探讨。

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