食管腺癌的分子生物学研究进展

麦尔旦江·木合塔尔

（西北民族大学医学院，甘肃 兰州730030）

许多肿瘤标志物已经用于临床，如将分子生物学诊断用于早期判断、预期肿瘤进展危险，肿瘤分级和预后，化疗的敏感性，将中间生物标志物用于化学预防研究及抗癌治疗的新基因靶。目前，与Barrett食管及食管腺癌相关的研究包括倍性、p53、细胞周期素D1和p16INK4a等。

1 倍 性

Barrett食管细胞核DNA含量（非整倍性）异常与其进展为恶性肿瘤有关，非整倍性百分率可能与食管发育不良的程度升高相关。谭家驹等[1]在15年内用流量血细胞计数法检测了300例Barrett食管患者的组织倍性，基础活检证实无或低度发育不良的二倍体细胞群没有非整倍性或4N（四倍性）成分升高，则恶性进展的危险性较低，建议内镜随访5年；基础活检发现患者有非整倍性、4N或高度发育不良者，5年内癌发生率分别为43%、56%和59%。无非整倍性或4N的高度食管发育不良患者，全部进展为浸润性食管腺癌[2]。

2 p53

p53肿瘤抑制基因定位于染色体17p13，编码53000多肽（TP53），通过高复合体DNA和蛋白的相互作用调节正常及恶性细胞的细胞周期、DNA复制、凋亡和血管生成。调节细胞周期停止部分是TP53通过诱导p21（WAF-1）表达、分离各种细胞周期依赖激酶（CDK）促使G，及G／M停止而获得的。Tew等[3]的一项为期10年的食管腺癌手术标本前瞻性研究显示，p53突变与肿瘤低分化、术后无瘤期和生存期短有关。在食管腺癌，p53突变的类型主要为CpG二核苷酸G：C转变为A：T，说明这种突变为内源性机制。

3 细胞周期素D1

细胞周期素D1由CCNDl基因编码于染色体11q13，是细胞周期，特别是G，转变至S期的关键调节子。64%的食管腺癌及其相关Barrett上皮有细胞周期素D1表达。Li等[4]采用FISH检测发现，在Barrett腺癌的发展过程中，c-erbB-2、20q13.2（AIB）、c-myc和细胞周期素D1的DNA拷贝数增加，而5q21（APC）和18q（DCC）杂合子丢失。食管从化生、发育不良发展为腺癌的过程中，所获得的7q＼8q、20q、2p＼10q和17q逐渐增多，而Y、4q＼5q、9p＼18q和14q丢失频数增加。在非侵袭性疾病，染色体改变与侵袭性疾病有明显差异。Steck等[5]认为，CCNDl A／A等位基因增加胃食管反流疾病、Barret食管和食管腺癌的危险，CCNDl外显子4多形（态）是食管腺癌分子进展的易感因子。

4 p16INK4a

INK4a基因位于染色体9p21，编码蛋白p16，属细胞周期依赖激酶（CDK）抑制子家族。p16与CDK4／6结合及抑制CDK4／6，减少Rb磷酸化，抑制细胞周期经G，进展。另一转录子p14AaF具有分离MDM2的功能，因而稳定p53肿瘤抑制基因[7]。Barrett食管和食管腺癌的点突变相当少见，9pLOH，p16mRNA过度表达和促进子过甲基化可能是p16失活的机制。

5 其 他

食管腺癌与反流性食管炎所致的Barrett食管有关。Her-2／neu基因扩增伴随着其细胞表面受体产物c-erbB-2蛋白的过度表达。Muter等[8]对Barrett腺癌（6例）和癌旁发育不良的组织（4例），用免疫组化的方法检测了其黏膜内的异质性；用FISH检查了原发性Barrett腺癌5例和发育不良区域4例；同时为了使评价具有客观性，他们又进行了数字影像分析和激光扫描显微镜检查。结果发现，在原发性Barrett食管腺癌的黏膜，从肿瘤细胞染色阴性或阳性区域至肿瘤强阳性染色区，6例中5例表现为明显的黏膜内异质性。FISH分析表明，原发性Barrett腺癌的黏膜内基因拷贝数具有明显的异质性，各细胞群中的多染色体状态细胞、低水平扩增和高水平扩增比例均不相同[5]。Sekine等[6]对20例胃贲门腺癌和10例邻近癌前变的基因组杂交的对比研究发现，5q、18q、4q、3p、9p、2q、11q、14q、21q、4p、9q、16q、1p和8p的丢失频率依次逐渐减少；而20q、7p、8q、1q、7q、20p、17q、13q、Xp、6q、8p、19q、5p、6p和Xq的获益频率逐渐减少。男性病例中，60%有Y染色体的丢失。在7q21、8p22、12p11.2、17q12-q21和19q13.1-q13.2位，常出现扩增水平升高，占全部肿瘤的11%以上。

Steck等[7]根据43份食管癌标本切片的组织学特征分为化生特异性上皮、低度发育不良、高度发育不良和浸润性腺癌，用PCR分析标本的原癌基因c-myc，发现29份化生特异性上皮标本和23份低等级发育不良标本中未能检测出c-myc扩增，24份高等级发育不良标本中，6份检测出c-myc扩增，而在39份腺癌的标本中，检测出c-myc扩增达17份，说明c-myc扩增是Barrett食管白化生、发育不良发展至腺癌的最终结果。若在高危患者检测出c-myc扩增，则有利于对患者进行随访或治疗。在Barrett食管并发腺癌时，其增生指数Ki67明显升高。Muter等[8]检测了45例Barrett食管及其正常胃底上皮，发现在伴有肠上皮化生的Barrett上皮的凋亡明显高于正常胃底上皮和Barrett腺癌（P＜0.01）。Ajani等[9]报道一例食管下段、邻近胃食管接合部的5.5cm×3.9cm溃疡型肿瘤，手术标本组织学检查证实为良好-中等分化管状腺癌。

近年来，抑癌基因改变在肿瘤形成过程中的作用引起了广泛的注意，其中研究较多的是p53和p16肿瘤抑制基因[11,12]。在食管鳞癌和食管腺癌中，均存在17p染色体杂合子丢失和p53蛋白过度表达，检出率达36%～92%，9p21区杂合子丢失在食管癌中也很常见，该区域编码的p16表达与细胞周期素D1的表达成反比[13]。

[1] 李辉.现代食管外科学[M].北京：人民军医出版社,2004：331-332.

[2] 孙燕,周际昌.临床肿瘤内科手册[M].4版.北京：人民卫生出版社,2003：102-583.

[3] Tew WP,Kelsen DP,Ilson DH,et a1.Targeted therapies for Esophageal Cancer[J].The Oncologist,2010,8(10)：590-601.

[4] Li J,Yen C,Liaw D,et al.PTEN,a putative protein ryrosine phosphatase gene mutated in human brain,breast and prostate cancer[J].Science,2011,275 (5308)：1876-1879.

[5] Steck PA,Pershouse MA,Jasser SA,et al.Identification of a candidate tumor suppressorgene,MMACI,atchromosome that is mutated in multiple advanced cancers[J].Nat Genet,2010,15(4)：356-362.

[6] Sekine I,Sumi M,Ito Y,et al.Phase I study of cisplatin analogue nedaplatin,paclitaxel,and thoracic radiotherapy for unresectable stage III non-small cell lung cancer[J].Jpn J Clin Oncol,2011,37(3)：175-180.

[7] Steck PA,Pershouse MA,Jasser SA,et a1.Identification of a candidate tumor suppressorgene,MMACI,atchromosome that is mutated in multiple advanced cancers[J].Nat Genet,2010,15(4)：356-362.

[8] Muter GL,Lin MC,Fitzgerald JT,et al.Changes in endometrial PTEN expression throughout the human menstrual cycle[J].Clin Endocrinol Metab,2010,85(23)：34-37.

[9] Ajani JA.Contributions of chemotherapy in the treatment of carcinoma of the esophagus： results and commentary[J].Semin Oncol,2011,21(4)：474-482.

[10] Ajani JA.Treatment of patients with upper gastrointestinal carcinomas[J].Semin Oncol,2010,24(6 Suppl 19)：19-76.

[11] 王鑫,祝淑钗.食管癌综合治疗研究进展[J].中华放射肿瘤学杂志,2006,15(9)：65-68.

[12] Sharma A,Raina V,Lokeshwar N,et al.Phase II study of cisplatin,etoposide and paclitaxel in locally advanced or metastatic adenocarcinoma of gastric/gastroesophageal junction[J].Indian J Cancer,2009,43(1)：16-19.

[13] Ilson DH,Ajani J,Bhalla K,et al.Phase Ⅱ trial of paclitdxel,fl uorouracil,and ciplatin in patients with advanced carcinoma of the esophagus[J].J Clin Oncol,2010,16(5)：1826-1834.