鼻咽癌组织中XIAP和caspase-3的表达及意义

黄永平 何健 郭婷

NPC是一种常见的头颈部肿瘤。X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP)是凋亡抑制蛋白家族中最有潜在抑制活性的一种蛋白质，它可以与caspase-3、7、9直接结合，抑制caspase活性，从而抑制细胞凋亡的发生［1］。本实验检测凋亡抑制蛋白 XIAP和caspase-3在NPC的表达及二者的关系，旨在探讨其在NPC发生、发展中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集宜春市人民医院病理科2001年1月至2008年1月收治的NPC活检标本70例，所有患者病史完整，组织蜡块厚度能满足制作组织芯片要求。均为初治病例，未行放化疗。病理均为鳞状细胞癌，其中男47例，女23例，年龄23～80岁。另取25例鼻咽部慢性炎症组织作为对照。

1.2 免疫组织化学法处理切片脱蜡后，水化至水。SP法实验步骤，以高压修复抗原10 min，一抗4℃过夜(一抗稀释度为1∶400)，通用型二抗37℃孵育1 h，二氨基联苯胺(DAB)显色，苏木精复染，中性树胶封片。以0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)(pH=7.4)替代一抗作阴性对照，以重复实验证实为阳性的切片作为阳性对照。

1.3 结果判断SP法染色阳性为细胞质和胞核内出现棕黄至棕黑色颗粒。XIAP和caspase-3的判断标准为:阴性(-):无阳性细胞;阳性(+):阳性细胞少于50%;强阳性(++):阳性细胞多于50%。采用显微摄像计算机图像系统分析。

1.4 统计学方法 全部实验数据用SPSS 15.0统计软件进行统计分析。计数资料采用χ2检验，两变量的相关程度采用两变量关联性分析检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 XIAP和caspase-3在NPC和鼻咽部慢性炎症组织中的表达 70例NPC标本中XIAP表达阳性48例，阳性率为68%;caspase-3表达阳性22例，阳性率为36%。在鼻咽部慢性炎症组织标本中XIAP呈阴性表达;caspase-3表达阳性16例，阳性率为65%。NPC中XIAP的阳性表达明显高于炎症组织，有差异χ2=25.12，P＜0.05。NPC中caspase-3的阳性表达均明显低于炎症组织，有差异χ2=7.55，P＜0.05。

2.2 NPC中XIAP和caspase-3表达的关系 48例XIAP阳性的NPC标本中，caspase-3阳性7例，阳性率为14.7%;22例XIAP阴性的标本中，caspase-3阳性15例，阳性率为68.7%。XIAP阳性NPC标本中的caspase-3阳性表达率低于XIAP阴性的caspase-3阳性表达率，NPC组织中XIAP与caspase-3表达呈负相关(χ2=12.73，r=-0.46，P＜0.05)。

3 讨论

细胞凋亡调控的紊乱与细胞的恶变具有十分密切的关系。凋亡抑制蛋白(IAP)是细胞内一类阻止细胞凋亡的蛋白，通过结合并抑制caspase-3、7、9等来抑制细胞凋亡。XIAP能够对抗各种凋亡诱导因素，抵抗细胞凋亡，在已经发现的凋亡抑制蛋白家族的成员中，它被认为是作用最强的一种［2］。它与多种恶性肿瘤的发生发展高度相关［3，4］，它在胰腺癌、乳腺癌、大肠癌等细胞系中呈高表达，在正常的人乳腺上皮和皮肤纤维原细胞系中呈低表达［5］。

本研究结果显示，sp法测得68.0%(48/70)的NPC组织不同程度地出现XIAP阳性表达，而炎症组织XIAP蛋白表达全为阴性。NPC与炎症组织中XIAP表达阳性率之间有差异(P＜0.05)，XIAP表达升高与NPC的发展呈正相关。这说明XIAP在NPC细胞中的表达是升高的，且XIAP可影响肿瘤细胞的凋亡。

Caspase-3在细胞凋亡中处于核心位置，其高表达可引起细胞的凋亡，被称有为死亡蛋白。本研究示，SP法测得36.0%(22/70)的NPC组织中出现caspase-3阳性。NPC和炎症组织之间caspase-3表达阳性率之间有差异(P＜0.05)，caspase-3表达下降与NPC的发展呈正相关。这说明caspase-3在NPC细胞的表达是下降的，caspase-3可影响肿瘤细胞的凋亡。

本研究中48例XIAP阳性的NPC标本中，caspase-3阳性7例，阳性率为14.7%;22例XIAP阴性的标本中，caspase-3阳性15例，阳性率为68.7%。XIAP阳性的 NPC标本caspase-3阳性表达率低于XIAP阴性标本的caspase-3阳性表达率，XIAP与caspase-3表达呈负相关。

我们认为XIAP的高表达和caspase-3的低表达可能与NPC的发生、发展有关，XIAP可能是促进正常鼻咽部上皮组织恶变的重要因子，而caspase-3在调亡的过程中起着关键的作用。XIAP在NPC细胞中表达的显著升高和caspase-3的低表达对NPC的诊疗具有一定参考价值。

［1］Eckelman B P，Salvesen G S，Scott F L.Human inhibitor of apoptosis proteins:why XIAP is the black sheep of the family.EMBO Rep，2006，7(10):988-994.

［2］Eckelman BP，Salvesen GS.Scott FLHuman inhibitor of apoptoais proteins:why XIAP is the black sheep of the fruityEMBO Rep，2006，7(10):988-994.

［3］Ding X，Mohd AB，Huang Z，et al.MLH1 expression sensitises ovarian cancer cells to cell death mediated by XIAP inhibition.Br J Cancer，2009，21，101(2):269-277.

［4］Ramp U，Krieg T，Caliskan E，et al.XIAP expression is an independent prognostic marker in clear cell renal carcinomas.Human Path，2004，35(8):1022-1028.

［5］Tamm I，Komblau SM，Segall H，et al.Expression and prognostic significance of IAP family genes in human cancers and myeloid leukemias.Clin Cancer Res，2000，6(5):1796-1803.