甲状腺微小乳头状癌中MC和TPO的表达及意义

罗巧明 张建

甲状腺微小乳头状癌中MC和TPO的表达及意义

罗巧明 张建

目的 探讨甲状腺微小乳头状癌中MC及TPO的表达及意义。方法 采用免疫组化EnVision法检测21例甲状腺微小乳头状癌中MC和TPO的表达水平。结果 MC在甲状腺微小乳头状癌中呈中至重度阳性表达，只有1例呈弱阳性，而在甲状腺良性病变中呈阴性或弱阳性表达。甲状腺微小乳头状癌中有18例TPO呈阴性表达，3例呈弱阳性，21例良性病变均呈中至强阳性表达。结论 MC及TPO联合检测将进一步提高甲状腺微小乳头状癌诊断的准确性。

甲状腺肿瘤；微小乳头状癌；MC；TPO

甲状腺微小乳头状癌（papillary thyroid microcarcinoma，PTM）是指直径≤1cm的甲状腺乳头状癌，是甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma，PTC）中常见的亚型之一，由于其体积小，发病隐匿，大体检查时容易忽略；在组织学中，一些病例中不典型细胞核的改变常导致诊断上的困难。本文通过免疫组织化学染色检测间皮细胞 (Mesothelial Cell,MC)和甲状腺过氧化物酶 (Thyroid Peroxidase,TPO)在PTM中的表达水平并探讨其在鉴别诊断中的意义。

1 材料与方法

1.1 材料 选择肇庆市端州区人民医院病理科2006年10月～2010年10月诊断为PTM的手术切除标本病例21例，男性7例，女性14例；年龄33～69岁，中位年龄50岁。肿瘤组织直径从0.2～1cm。

1.2 方法 所有标本均经10%中性福尔马林液固定，常规组织处理，石蜡包埋，连续切片（切片厚4μm），常规HE染色。免疫组织化学采用EnVision二步法进行MC、TPO染色，DAB显色，苏木素复染。用诊断明确的甲状腺乳头状癌作为阳性对照，以PBS液代替一抗作为阴性对照。MC（鼠抗单克隆抗体）购自福州迈新公司，TPO（鼠抗单克隆抗体）购自上海太阳生物技术有限公司。

1.3 结果判断 MC阳性信号定位于细胞膜，TPO阳性信号定位于细胞质内，棕黄色细胞颗粒为阳性。着色根据Beesley[1]分级方法，按阳性细胞所占百分比并参考着色强度确定分级：无明显阳性细胞或着浅黄色为（-）；阳性细胞数＜25%，颗粒棕黄色为（+）；阳性细胞数25%～50%，颗粒棕黄色为（++）；阳性细胞数＞50%，颗粒深棕色为（+++）。

1.4 统计学处理 应用x2检验，并按照《临床流行病学》[2]介绍的诊断试验评价计算MC及TPO的敏感度（Sen）、特异度（Spe）、准确度(Acc)。

2 结果

2.1 形态学特征 在21例PTM中，结节性甲状腺肿（结甲）合并PTM 6例，毒性甲状腺肿（甲亢）合并PTM 8例，桥本甲状腺炎合并PTM 3例，甲状腺腺瘤合并PTM 4例。肿瘤细胞以乳头状排列为主12例，以滤泡状排列为主9例；瘤细胞核呈毛玻璃样核改变15例， 占71.4%（图1）；间质明显胶原化的14例，可见砂粒体的3例。

2.2 MC及TPO的表达 MC在PTM中的阳性表达以中到重度为主，而在良性病变（包括结甲、甲亢、桥本及腺瘤）仅2例阳性，均为弱阳性；TPO在PTM的阳性表达只有3例，均为弱阳性，而在良性病变中均为阳性。MC及TPO在PTM的阳性表达率分别为100%、14.3%，而在良性病变的阳性表达率分别9.5%、100%，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01，表1）。MC及TPO的阳性表达见图2-4。合应用。

图1 经典型PTM的毛玻璃样核(HE, ×)

图2 MC在PTM瘤细胞胞膜阳性表达（EnVision法, × )

图3 TPO在PTM中缺表达（EnVision法, × )

图4 TPO在甲状腺乳头状增生阳性表达（EnVision法, × )

TPO是一种糖基化血红素蛋白，存在于甲状腺滤泡细胞游离面，是一种与甲状腺激素合成相关的酶，在T3T4合成中起重要的催化作用。有学者曾用RT-PCR方法检测甲状腺组织中TPOmRNA的表达情况，发现大部分甲状腺乳头状癌、滤泡癌TPOmRNA呈阴性表达，而大部分结节性甲状腺肿、桥本病和腺瘤TPOmRNA呈阳性表达[7]。由于TPOmRNA方法仪器设备要求高，试剂价格昂贵，操作复杂，不能做组织定位及回顾性分析，在我国基层医院难以扩广，因此在甲状腺癌的诊断与鉴别诊断中的作用不理想。何春年等[8]应用免疫组织化学方法检测甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡状腺瘤及良性乳头状病变中TPO的表达情况，其阳性表达率分别为：15.6%、88.9%、100.0%，其敏感度、特异度和准确度分别为：84.4%、94.1%、90.8%。本研究用EnVison法测定PTM及甲状腺良性病变中TPO的表达，阳性率分别为：14.3%、100.0%，敏感度、特异度和准确度分别为85.7%、100.0%、92.9%，

表1 MC和TPO在PTM与良性病变中的表达情况

2.3 MC与TPO的敏感度、特异度和准确度比较 结果见表2。

表2 MC与TPO的敏感度、特异度和准确度比较（%）

3 讨论

PTM通常是由于其他原因切除甲状腺或尸检中的偶然发现。本文研究的21例手术病例中，是因为甲亢（8例，占38.1%）、结甲（6例，占28.6%）、腺瘤（4例，占19.0%）及桥本甲状腺炎（3例，占14.3%）切除甲状腺而发现PTM的。WHO分类标准[3]，指出PTC细胞核典型特征是：毛玻璃样核、核重叠、核沟及核内假包涵体。但并非所有PTC都具有上述特征，本文病例中具有毛玻璃样核特征的15例（71.4%）。在一些良性病变中常见到乳头状增生病变，虽然细胞核没有上述的典型特征，当出现核增大、淡染等不典型性改变；或乳头状结构不明显，细胞核呈空泡状、出现核沟，就难与乳头状癌鉴别。Asioli等[4]分析12例桥本甲状腺炎中出现的实性细胞巢，细胞核均见核沟，其中10例可见空泡状核，与PTM很难鉴别。当组织学难以鉴别时，可通过免疫组织化学标记帮助鉴别。

MC是间皮表面微绒毛的抗原成分，主要用于恶性间皮瘤的诊断，近年来应用于甲状腺肿瘤的鉴别诊断。据文献报道，MC在PTC中的阳性表达率为100.0%[5]。王仪等[6]研究显示MC在PTC中的阳性率100.0%，而在甲状腺滤泡癌的阳性率为87.5%，在PTC中的敏感度更高。本研究中MC的敏感度、特异度及准确度分别为：100.0%、90.5%、95.2%，与文献报道一致，可见MC在PTM的诊断中敏感度最高，而特异度较差，最好结合其他标记联与文献报道相符。

所有抗体均会出现假阳性或假阴性，单项指标应存在局限性。本研究MC在PTM的诊断中敏感度高，特异度不高，而TPO相反，其敏感度不高，特异度高；而且MC和TPO在甲状腺组织中为反向表达，在实际工作中可将两种指标联合应用，可起到相互补充的作用，结合临床及组织学将进一步提高PTM诊断的准确性。

[1] Beesley MF， Mclaren KM. Cytokeratin19 and galectin-3 inmunohistochemistry in the differential diagnosis of solitary thyroid nodules[J].Histopathology，2002,41(2):236-243.

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[8] 何春年，陈士超，赵焕芬，等.甲状腺乳头状癌诊断与鉴别的可靠标记物[J].临床与实验病理学杂志,2007，23（6）：694-698.

Objective To explore the expression and signifi cance of MC and TPO in papillary thyroid microcarcinoma. Methods The expression of MC and TPO was detected by EnVision immunohistochemical method in 21 cases of papillary thyroid microcarcinoma. Results The moderate to strong staining for MC was observed in papillary thyroid microcarcinoma and only one case was mild staining ,but negative to mild in benign thyroid lesions. 18 cases of papillary thyroid microcarcinoma showed negative for TPO and weakly positive in 3 cases, all cases of benign lesions showed medium to stong positive for TPO. Conclusion The combined detection with MC and TPO will further improve the accuracy of papillary thyoid microcarcinoma.

Thyroid tumor ; Papillary microcarcinoma; MC; TPO

10.3969/j.issn.1009-4393.2011.23.006

526060 广东省肇庆市第二人民医院（罗巧明 张建）