正交试验优选醋制青皮的炮制工艺

2011-01-24李毓群

中国药业 2011年10期

关键词：青皮橙皮炮制

李毓群

(浙江省台州市第一人民医院，浙江台州 318020)

正交试验优选醋制青皮的炮制工艺

李毓群

(浙江省台州市第一人民医院，浙江台州 318020)

目的优选醋制青皮的最佳炮制工艺。方法以橙皮苷的含量为考察指标，考察加醋量、焖润时间、炒制温度、炒制时间对指标成分含量的影响。结果最佳炮制工艺为加10%醋，焖润时间3 h，炒制温度200℃，炒制时间8 min。结论提取工艺设计合理、结果可靠，为优化醋制青皮的最佳炮制工艺提供了理论依据。

醋制青皮;正交试验;炮制工艺

青皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥幼果或未成熟的果皮，具有疏肝破气、消积化滞之功效，主治胸肋疼痛、疝气、食积、乳肿、乳核等症。中医认为，青皮有辛烈之性，故多用炮制品，青皮传统炮制主要是用醋制。2010年版《中国药典(一部)》及2005年版《浙江省中药炮制规范》将醋制青皮作为法定炮制方法。全国有20多个省市地区都用醋制品，查阅历代炮制文献及生产实地调查，虽然都为醋制，但实际操作不一致，导致作为疗效指标的炮制品中橙皮苷含量差异很大，而长期以来又没有具体探究原因。笔者通过正交试验对醋青皮炮制工艺进行优选，为临床用醋制青皮提供最合理的炮制方法，以利于青皮在成药和制剂中的进一步开发和利用。

1 仪器与试药

Agilent1200型高效液相色谱仪及其工作站;炒药锅等炮制设备。甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯;橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号为110721－200618);青皮(产自浙江温州，批号为20090811)，所用药材均购自台州医药有限公司，经台州市食品药品检验所鉴定，均符合2005年版《中国药典(一部)》标准。

2 方法和结果

2.1 橙皮苷含量测定

2.1.1 色谱条件

色谱柱:Agilent Eclipse XDB －C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);检测器:VWD;流动相:甲醇－水(25∶75);流速为1.0 mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:284 nm;进样量:10 μL。

2.1.2 溶液制备

精密称取橙皮苷对照品0.005 10 g，加甲醇至50 mL，溶解，摇匀，即得对照品溶液。取醋青皮细粉约0.2 g，精密称定，取50 mL置量瓶中，加甲醇30 mL超声处理30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.1.3 方法学考察

系统适用性试验:分别取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪。结果表明，供试品与对照品溶液色谱均在相同保留时间内出现吸收峰，理论板数大于8 000。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:吸取对照品溶液 1，5，10，15，20，25 μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积Y为纵坐标、进样量 X(μg)为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y=1 824 033.61X －13 938.42，r=0.999 9(n=6)。结果表明，橙皮苷进样量在0.102～2.55 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μL，进样5次。结果平均峰面积为1 769 434，RSD=1.0%(n=5)，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品(批号为20090811)溶液，分别于制备后 0，3，6，9，12 h 时进样，测定。结果平均峰面积为 1 921 436，RSD=0.3%(n=5)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

重现性试验:取批号为20090811的样品，依法制备供试品溶液并测定含量。结果平均含量为8.76%，RSD=1.60%(n=5)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:称取已测知含量的样品约0.1 g精密称定，加入橙皮苷对照品适量，按供试品溶液制备方法制备溶液并依法测定，计算回收率。结果见表1。

表1 橙皮苷加样回收试验结果(n=5)

2.2 正交试验

2.2.1 因素水平确定

该药材的主要有效成分为橙皮苷，故以橙皮苷的含量为考察指标，对醋制青皮炮制工艺中的加醋量(因素A)、焖润时间(因素B)、炒制温度(因素C)、炒制时间(因素D)进行考察，每个因素选取3个水平，按L9(34)正交表进行正交试验。因素水平见表2。

表2 炮制工艺正交试验因素水平表

2.2.2 正交试验结果

根据正交设计表，共进行9次试验。结果见表3及表4。直观分析显示，A1B3C3D3提取工艺最佳，但通过方差分析发现B因素无显著性差异，其余3个因素均有非常显著性差异(P＜0.01)。结合经济效益、生产条件等因素，确定最佳工艺为A1B3C3D3，即加10%醋，焖润时间3 h，炒制温度200℃，炒制时间8 min。

2.2.3 最佳工艺验证试验

采用A1B3C3D3提取工艺，测定同一温州产3批样品中橙皮苷的含量。结果见表5。