瓯柑橘和柑橘皮类黄酮、水、醇提取液对离体蛙心的作用
2011-01-13沈明华
马 森 沈明华
(1.武夷学院茶学与生物系—福建省高校绿色化工技术重点实验室,福建 武夷山 354300;2.青海大学 农牧学院 动物医学系,青海 西宁,810016)
瓯柑橘和柑橘皮类黄酮、水、醇提取液对离体蛙心的作用
马 森1沈明华2
(1.武夷学院茶学与生物系—福建省高校绿色化工技术重点实验室,福建 武夷山 354300;2.青海大学 农牧学院 动物医学系,青海 西宁,810016)
以1mg/ml的柑橘和瓯柑橘皮类黄酮溶液、1%的柑橘皮和瓯柑橘皮水、乙醇提取液各0.1mL加入离体蛙心灌流液,结果使蛙心收缩力分别提高 101.3±49.6(% ),94.0±25.2(% ),81.4±38.5(% ),93.9±34.0(% ),150.3±117.8(% ),165.1±113.5(% );心率分别降低 19.8±31.9(% ),22.1±22.3(% ),28.0±16.2(% ),28.5±20.8(% ),19.3±14.2(% ),23.0±24.3(% )(均P<0.05)。说明柑橘和瓯柑橘类黄酮、柑橘皮和瓯柑橘皮的水、醇提取液对离体蛙心均有增强心肌收缩力和减慢心率作用,各药物的持续时间在2~12min之间。
柑橘皮;瓯柑橘皮;类黄酮;水提取液;醇提取液;离体蛙心灌流
柑橘皮即传统中药陈皮,有理气、健脾、燥湿、化痰的功能。柑橘类果实、果皮中含丰富的黄酮类化合物、香精油、天然色素、维生素 A、C、E等;据报道,黄酮类化合物有抗氧化、抗衰老、降低毛细血管通透性、治疗毛细血管损伤、抑制血小板凝集、降血脂、降血压、防止心脑血管疾病、抗炎、抗过敏、强心、镇静、镇痛、抗菌、抗病毒等多种作用;还有抗癌、抗突变、抑制肿瘤等作用[1-9]。“瓯柑橘”为柑桔属的栽培变种,原产浙南,又名苦橘,果实金黄鲜艳,清甜多汁,略带苦味,营养价值较高,具有祛热生津、化痰、止咳、清凉解毒等功效,民间有“端午瓯柑似羚羊”之说,历史上为皇家贡品;临床研究瓯柑对高血压等症状有一定食疗作用,对其药理作用报道甚少[10-12]。瓯柑橘已在福建南平市引种成功,为进一步开发其橘皮的药用作用,本实验研究了瓯柑橘皮的水、醇浸提液和从瓯柑橘皮中提取的类黄酮对离体蛙心的作用,并与陈皮进行比较,结果如下。
1 材料与方法:
1.1 试验动物:牛蛙10只,市购。
1.2 试验材料与制备方法;柑橘市购,瓯柑橘由南平坎下果场提供。橘皮均用蒸馏水洗净,烘干,粉碎过40目筛。柑橘和瓯柑橘皮中黄酮类用乙醇法提取,使用时以50%乙醇配成浓度1mg/ml的溶液。柑橘和瓯柑橘皮的1%醇浸提液:10g橘皮粉加50%乙醇100ml匀浆,匀浆液滤纸过滤备用;柑橘和瓯柑橘皮的1%水浸提液:10g橘皮粉加重蒸水100m l匀浆,匀浆液用盐酸调pH至3-4,离心沉淀蛋白,上清液再用氢氧化钠调pH至7.0备用。
1.3 仪器与试验方法:成都泰盟科技有限公司的BL-420F生物技能实验系统;按常规制备离体蛙心,用蛙心夹连接至张力传感器,调节系统增益使正常蛙心收缩高度为20mm、时间常数为0.01s、扫描速度为1.0ms/div、滤波为10KHz,记录正常蛙心收缩曲线后,分别加入50%乙醇、柑橘和瓯柑橘皮类黄酮溶液、1%的水浸提液和醇提取液各0.1ml,记录蛙心收缩力(以高度mm表示)和心率(次/min)变化。每项实验后用任氏液充分清洗,至蛙心收缩恢复正常后进行下一项实验。
1.4 数据统计和处理:实验结果统计各组的蛙心收缩力、心率及变化率的,类黄酮溶液和醇提取液的测定结果中校正50%乙醇的作用,实验前后差异用配对的t检验或秩次检验,组间差异用方差分析检查,SSR法多重比较。
2 结果
乙醇、柑橘和瓯柑橘皮类黄酮、水和醇提取液对离体蛙心收缩力和心率的作用见表1和图1-7,作用持续时间见表2。
表1.柑橘和瓯柑橘皮黄酮类、水和醇提取液对离体蛙心的作用测定结果(n,)
表1.柑橘和瓯柑橘皮黄酮类、水和醇提取液对离体蛙心的作用测定结果(n,)
注:※和给药前相比差异显著(P<0.05),※※和给药前相比差异极显著(P<0.01),
分 组 n给药前蛙心给药后蛙心 收缩力 给药前蛙心给药后蛙心 心率变收缩力(mm)收缩力(mm) 变化(%) 率(次/min)率(次/min) 化(%)50% 乙醇 320 .5±1.014 .5±1.3※※ -29.3±6.5 35.0±2.734 .3±2.1 -2.0±2.5柑橘类黄酮溶液421 .8±3.943 .5±10.9※ 101.3±49.6 26.5±6.519 .8±3.8※ -19.8±31.9瓯柑类黄酮溶液418 .3±2.135 .8±8.4※ 94.0±25.2 26.0±4.719 .5±2.4※ -22.1±22.3柑橘皮水提取液418 .5±3.034 .0±10.7※ 81.4±38.5 35.8±4.725 .8±6.7※ -28.0±16.2瓯柑皮水提取液418 .8±2.136 .8±9.7※ 93.9±34.0 31.0±7.421 .3±4.6※ -28.5±20.8柑橘皮醇提取液419 .8±0.551 .5±20.8※ 150.3±117.8 37.0±3.629 .8±4.8※ -19.3±14.2瓯柑皮醇提取液419 .8±0.552 .0±21.0※ 165.1±113.5 36.3±3.127 .8±8.5※ -23.0±24.3
表2.柑橘和瓯柑橘皮黄酮类、水和醇提取液对离体蛙心的作用时间(min,全距)
图1.50%乙醇作用
图2.柑橘皮类黄酮对蛙心的作用
图3.瓯柑皮类黄酮对蛙心的作用
图4.柑橘皮水提取液对蛙心的作用
图5.瓯柑皮水提取液对蛙心的作用
图6.柑橘皮醇提取液对蛙心的作用
图7.瓯柑皮醇提取液对蛙心的作用
3 分析与讨论
3.1 由表1测定结果见50%乙醇使蛙心收缩力显著增加(P<0.01),而对心率并无显著影响(P>0.05),持续时间在2.3~11.7min之间。所以柑橘和瓯柑橘皮类黄酮溶液、乙醇提取液的实验结果均进行校正,除去乙醇溶液的影响。
3.2 由表1测定结果见1mg/m l的柑橘和瓯柑橘皮类黄酮溶液、1%的柑橘皮和瓯柑橘皮水、乙醇提取液使蛙心收缩力分别提高 101.3±49.6(% ),94.0±25.2(% ),81.4±38.5 (% ),93.9±34.0 (% ),150.3±117.8 (% ),165.1±113.5(% );心率分别降低 19.8±31.9(% ),22.1±22.3 (% ),28.0±16.2 (% ),28.5±20.8 (% ),19.3±14.2(% ),23.0±24.3(% )(均 P<0.05)。说明柑橘和瓯柑橘类黄酮、柑橘皮和瓯柑橘皮的水、醇提取液对离体蛙心均有增强心肌收缩力和减慢心率作用,各药物的持续时间在2~12min之间。蛙心收缩力和心率变化在柑橘和瓯柑橘两组间,在类黄酮、水、醇提取液各组间均无显著差异;各药物持续时间也无显著差异 (均P>0.05)
3.3 关于陈皮及提取物对心脏作用的实验资料甚少,据赵雪梅等报道,柑桔属庚甲氧基黄酮降低红细胞聚集和沉降,对小鼠心肌产生收缩作用[8]。据沈明勤等报导,以250、500、1000mg/kg剂量给大鼠静注陈皮水溶性总生物碱,收缩压上升53%,维持4min,心率先减少,后显著增加,9min后恢复正常[13];给猫静注陈皮制剂后,血压迅速上升,脉压差增加,心输出量增加,左室内压及其最大上升速率均明显上升,而左室舒张末期压则有明显下降。心脏指数、心搏指数、每搏心输出量、左室作功指数均明显上升;而血管总外周阻力在给药后1~2min内上升,5min后则明显下降,反映心肌耗氧指标的TTI值在给药后3min内也明显增加,上述作用时间一般在给药后瞬间至5min时,10min后则基本恢复或接近正常;动物的心率在给药后瞬间略有减少[14]。据欧立娟等报导,陈皮对心脏有兴奋作用,能增强心肌收缩力,扩张冠状动脉,升高血压。静脉注射陈皮水提取物,可显著增加实验动物的心肌收缩力和心输出量,升高大鼠血压达55%,维持时间4min,并可短暂增加心肌耗氧量[15]。本试验结果蛙心收缩力和心率变化、持续时间和上述报道基本一致。
3.4 关于瓯柑皮黄酮及提取物对心脏作用的实验资料更少,上海医药工业研究院药理试验结果,瓯柑果汁粉末对对麻醉大鼠正常血压有不同程度的降压作用,给药3Os左右出现瞬间一次性的血压升降,恢复至正常水平后继续慢慢下降,大约在5min左右血压降到最低值,降压约40~60(%)左右,最低血压维持时间2O~40min之间,以后逐渐回升到正常。对豚鼠离体心脏能显著增加冠脉流量[11]。王笑蓉等报导瓯柑苦味物质是新陈皮甙和柚皮甙,动物实验证明瓯柑有明显的降温、降压、扩张冠状血管及耐缺氧作用[12]。本文实验证明瓯柑皮类黄酮及水和醇提取物对蛙心均有与陈皮同样的增强收缩力和减慢心率作用。
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Effect of Flavonoids,Extractive Liquit by Water,Extractive Liquit by Ethanol in Peel of Orange and Peel of Citrus Suavissima in Vitro Frog Heart
MA Sen1SHEN Minghua2
(1.Tea science&Biology Department of Wuyi University— Fujian University Key Laboratory for Green-chemical Engineering Technology,Wuyishan,Fujian,3543002 .Animal Medical Department of Qinghai University,Xining Qinghai810016)
In vitro frog heart perfussionning wasmaked with bullfrogs.1mg/m l solution of flavonoids,extractive liquit by water,extractive liquitby ethanol in peel of orange and peel of citrus suavissima 0.1mL were added into perfussionning solution respectivily.The results were shown as follows:the cardiac contractility had been increased 101.3±49.6(% ),94.0±25.2(% ),81.4±38.5(% ),93.9±34.0(% ),150.3±117.8(% ),165.1±113.5(% ),The heart rate had been decreased 19.8±31.9(% ),22.1±22.3(% ),28.0±16.2(% ),28.5±20.8(% ),19.3±14.2(% ),23.0±24.3 (% )respectivily (P>0.05).The results proved that they had effect of increasing cardiac contractility and decreasing heart rate,these medications keeping action 2~12min.
peel of orange;peel of citrus suavissima;flavonoids;extractive liquit by water;extractive liquit by ethanol;in vitro frog heart perfussion
R285.5
A
1674-2109(2011)02-0016-04
2011-01-13
福建省教育厅《瓯柑橘类黄酮的提取及药理作用研究》(项目编号JA08247)。
马森(1947-),男,汉,教授,研究方向:生物化学。