Fas/FasL在阴茎鳞癌组织中的表达分析

李海，邓志勇，徐松，陈金珍，陈芳

（江苏大学附属医院、昆山市第一人民医院，昆山215300）

阴茎鳞癌是常见的男性生殖系统恶性肿瘤，其发病与很多因素有关。Fas是一种细胞表面蛋白分子,当与其配体FasL结合后,可诱导靶细胞凋亡,与体内多种生理功能和疾病发生有关。FasL的作用是杀伤接近肿瘤的免疫细胞，削弱机体的免疫功能。研究表明,Fas/FasL的表达异常在肿瘤的发生、发展中起重要作用[1]，为此,我们采用免疫组织化学方法,对我院40例手术切除的阴茎鳞癌组织进行Fas/FasL检测,以探讨Fas系统在阴茎鳞癌组织中的表达及临床病理学意义。

1 材料和方法

1.1 标本来源 收集昆山市第一人民医院1984年—2008年手术切除或活检的阴茎鳞癌组织40例，患者年龄58～78岁；阴茎包皮环切组织20例，患者年龄20～38岁。所有标本经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片，病理诊断证实。

1.2 方法 免疫组织化学染色（SP）法：实验用的兔抗人Fas和FasL多克隆抗体均购自福州迈新生物技术公司，工作浓度均为1∶200。免疫组化染色用的SP试剂盒及二氨基联苯胺（DAB）显色剂均购自福州迈新生物技术公司，按试剂盒说明书步骤操作，切片置于柠檬酸盐缓冲液中进行抗原微波热修复，磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照，阳性切片作阳性对照。

1.3 结果判断 Fas和FasL以阴茎鳞癌细胞和阴茎包皮环切组织的鳞状上皮细胞的胞浆、胞膜或胞核出现棕黄色颗粒为阳性细胞。随机计数10个高倍视野下的细胞数，计数阳性细胞所占的比例，阳性细胞数≥10%为阳性表达。

1.4 统计学方法 相关数据采用χ2检验。用SPSS 10.0版的统计软件处理。

2 结果

2.1 阴茎癌和阴茎包皮环切组织中Fas和FasL的表达 在阴茎癌和包皮环切组织中Fas表达阳性率分别为40.0%（16/40） 和 85.0%（17/20），P<0.05，见图 1、图 2。FasL 分别为65.0%（26/40）和 25.0%（5/20），P<0.05，见图 3、图 4。

3 讨论

尽管机体内有一系列的免疫监视机制,但肿瘤仍能发生并持续发展,原因是肿瘤细胞存在多种免疫逃逸机制。肿瘤免疫逃逸是肿瘤发生与发展的重要机制，肿瘤细胞可通过多种主动和被动机制来逃避机体的免疫监视。近年研究发现，Fas/Fasl系统表达异常与肿瘤发生关系密切，在肿瘤免疫逃避中起重要作用[2]。在肝癌等多种恶性肿瘤研究中均发现有Fas和FasL的表达异常,并且与肿瘤免疫关系密切,从而逃避机体的免疫监视[3]Fas/FasL系统不仅是引起细胞凋亡的重要途径，也是细胞毒性T淋巴细胞（CTL）清除肿瘤细胞的主要机制[4]，而CTL杀伤靶细胞是以Fas/FasL系统为基础的。肿瘤细胞得以存活发展的关键因素之一，就是能成功地逃避机体CTL的免疫识别和攻击[5,6]。一方面肿瘤细胞通过减少Fas的表达或不表达Fas分子，抵抗CTL细胞FasL介导的细胞凋亡，从而逃避CTL细胞的细胞毒作用，另一方面肿瘤细胞通过表达FasL来杀伤T细胞。因此，Fas系统与个体的正常生长发育、机体的自稳定密切相关，同时对机体免疫系统杀灭肿瘤细胞、防止肿瘤发生也有重要作用[7]。

肿瘤的发生是多种因素决定的，在癌变过程中还需要其它因素共同参与和协同。本研究结果显示，阴茎癌组织Fas表达显著低于正常阴茎组织，而FasL表达明显上调，与正常组织相比，其差异均有显著统计学意义，说明在阴茎癌的发生发展中存在Fas、FasL的表达失衡。肿瘤细胞通过Fas蛋白的下调表达，逃避机体CTL的杀伤，FasL增高虽然可以介导部分表达Fas的阴茎癌细胞凋亡，但重要的是可借此杀伤表达Fas的T细胞，从而逃避机体通过Fas-FasL系统途径的免疫清除，进一步使肿瘤细胞凋亡减少、逃避免疫细胞的攻击，最终导至肿瘤形成。提示在阴茎癌细胞中Fas、FasL系统参与了肿瘤的免疫逃逸，Fas、FasL系统的平衡失调可能是阴茎鳞癌细胞免疫逃逸的被动机制之一。因此，阴茎癌的发生与Fas系统表达有一定关系，进一步研究肿瘤细胞对Fas系统介导的凋亡抵抗因素及如何消除这些因素、并封闭其FasL

对周围淋巴细胞杀伤途径，将为今后肿瘤治疗提供新的思路。

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