雷公藤制剂抗蛋白尿疗效及其对肝脏、肾脏的影响*

吴汉利 孙 伟

1 南京中医药大学（南京 210029）

2 江苏省中医院（南京 210029）

雷公藤制剂用于治疗肾小球肾炎已有30多年历史，在减少尿蛋白方面，其显著的临床疗效为广大学者所公认[1～3]，但其有效活性成分雷公藤甲素同时也是毒性成分，可引起肝脏、生殖系统、血液系统、胃肠道等毒性反应[4]，在一定程度上限制了用药，影响了治疗效果,所以对于雷公藤制剂的减毒增效研究非常重要。本实验通过阿霉素肾病模型对雷公藤制剂抗蛋白尿疗效及安全性进行评价。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 SPF级纯系SD大鼠，购自军事医学科学院实验动物中心。雷至胶囊每粒含雷公藤2g，女贞子1g），购自江苏省卫生医药有限公司，由江苏省中医院制剂室鉴定并进行加工；雷公藤水提物由雷公藤去皮根木质部水提而成的，1mL含雷公藤中药0.8g，由江苏省中医院制剂室鉴定并进行加工；雷公藤多苷片（规格10mg/片，浙江得恩德制药有限公司，批准文号Z33020422）；阿霉素(深圳万乐药业有限公司生产,规格10mg/支,批准文号：国药准字H44024359）。

1.2 方法 42只大鼠分为正常组（6只）、模型组（6只）、雷公藤多苷组（6只）、雷公藤水提物组（6只）、雷至胶囊低剂量组（6只）、雷至胶囊中剂量组（6只）、雷至胶囊高剂量组（6只）。参照文献[5]造模方法，采用分次尾静脉注射阿霉素，除正常组外大鼠，第1日以4 mg/100g体质量注射，第7日以2mg/100g体质量注射。正常组用同法注射等剂量生理盐水。第3周开始灌胃，雷至胶囊4粒/kg，按照1mL/100g体质量计算药物浓度。正常组及模型组按1mL/100g体质量灌胃生理盐水。

1.3 观察指标 （1）血、尿标本。血标本采用玻璃毛细管(直径1.00mm）经眶后静脉丛取血,6h内离心，分离血清,置于－20℃冰箱保存待测。尿标本采用金属代谢笼收集,大鼠禁食、不禁水,收集大鼠注射阿霉素前及第1次注射阿霉素后14、21、28、35d的24h尿液,记录尿量后取1mL，15000r/min离心10min,去除沉渣后分装，置于－20℃冰箱保存待测。尿蛋白、NAG酶、血清尿素氮、血肌酐及血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶和天门冬酸氨基转移酶采用Olympus全自动生化分析仪（型号Au2700）检测。（2）肾脏、肝脏病理标本。大鼠放血处死后，主动脉灌注生理盐水,取腹正中切口,暴露并切取双侧肾脏。肾脏冠状面取组织，肝脏取左下缘，甲醛固定石蜡包埋组织切片,厚度为2μm,用于PAS染色。

1.4 统计学处理 应用SPSS 11.5。计量资料以（）表示,采用 t检验。

!结果

2.1 各组大鼠不同时间点24h尿蛋白变化比较 见表1。第1次注射阿霉素后7d，模型组尿蛋白无明显变化。14d时模型组大鼠24h尿蛋白显著高于正常组。21d模型组尿蛋白继续上升，直到35d；与模型组、雷公藤多苷组、雷公藤水提物组相比，雷至胶囊组28、35d尿蛋白均明显降低(P ＜0.05）。

2.2 各组大鼠35d血生化改变 见表2。35d时，模型组血白蛋白明显降低，甘油三酯、胆固醇明显升高，与模型组比较各治疗组白蛋白、甘油三酯、胆固醇均明显改善（P＜0.01）；雷公藤多苷组转氨酶水平明显高于其他组（P＜0.01），雷至胶囊各组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。血清尿素氮和肌酐各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 各组大鼠肾脏病理变化 见图1。正常组大鼠肾小球系膜区无增生无沉积物,基底膜未见病变，毛细血管开放较好；模型组大鼠可见弥散性肾小球系膜区增宽,系膜细胞、系膜基质增生,毛细血管腔狭窄；雷至胶囊组病变不同程度减轻。

2.4 各组大鼠肝脏光镜PAS变化 见图2。正常组、模型组、雷至胶囊低剂量组、雷至胶囊中剂量组、雷至胶囊组高剂量组肝脏结构无明显变化，雷公藤多苷组肝细胞结构紊乱，基质明显增多。

表1 各组大鼠不同时间点24h尿蛋白尿定量分析结果（mg/24h,）

表1 各组大鼠不同时间点24h尿蛋白尿定量分析结果（mg/24h,）

与正常组比较，*P ＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与雷公藤多苷组比较，*P ＜0.05，**P＜0.01；与雷公藤水提物组比较，♯P＜0.05，♯♯P ＜ 0.01。下同

组 别正常组模型组雷公藤多苷组雷公藤水提物组雷至胶囊低剂量组雷至胶囊中剂量组雷至胶囊高剂量组n6666666造模前3.62±2.43 3.62±0.76 3.60±2.42 3.88±1.38 2.86±0.67 2.94±2.28 2.96±2.29 7d 3.57±0.73 3.57±1.33 2.60±0.71 2.81±0.76 3.23±1.14 3.13±1.14 2.98±0.68 14d 6.63±4.52 22.98±15.44*22.47±12.25*22.02±10.76*21.82±6.66*21.50±9.43*26.22±16.78*21d 5.55±2.66 363.38±56.18**57.35±18.36**△△75.90±26.51**△△41.3±13.66**△△29.50±10.97△△31.80±17.32△△28d 5.50 ±3.20△△※※354.43±47.49**※※97.00±37.56**△△76.52±25.93**△△46.57±26.48*△※♯38.22±18.99*△※♯25.62±14.86*△※♯35d 6.70±1.19△△※※414.03±44.18**※※133.65±44.7**△△100.52±22.26**△△61.67±32.08**△※♯62.18±35.72**△※♯55.57±17.19*△※♯

表2 各组大鼠35d血生化改变

图1 大鼠肾脏病理图片PAS

图2 大鼠肝脏病理图片PAS

3 讨论

雷公藤具有活血化瘀、清热解毒、消肿散结、杀虫止血等功效。自20世纪80年代雷公藤被用于肾小球疾病的治疗后[6]，许多动物实验和临床研究都证明其具有较强的抗蛋白尿作用，尤其在微小病变、局灶节段性肾小球硬化和膜性肾病患者的治疗中显示了其独特的功效[1～3]。但大量研究证实雷公藤制剂常可引起肝脏、生殖系统、血液系统、胃肠道等毒性反应[5]。韦登明等[7]研究发现，雷公藤急性中毒对肝细胞有轻度毒性作用,有时可见肝细胞轻度脂肪变性,偶见灶性坏死。杨小红等[8]报道雷公藤可导致肝损害,出现黄疸、肝肿大、肝功能异常等情况。故而对雷公藤制剂的减毒增效研究非常重要。

本实验我们采用分次尾静脉注射建立阿霉素肾病模型，发现蛋白尿1周后开始升高，2周后急增，后逐渐升高，直到实验结束。而雷公藤制剂组具有强大抗蛋白尿作用，与同时期模型组相比差异具有统计学意义；不同雷公藤制剂相比，雷至胶囊抗蛋白尿效果明显优于雷公藤多苷和雷公藤水提物。从血生化方面也证实雷至胶囊在提高血清白蛋白、降血脂效果方面优于雷公藤多苷。肾脏病理也证实雷至胶囊组肾小球系膜基质沉积最轻。研究还发现雷公藤多苷可引起转氨酶升高，肝脏病理证实雷公藤多苷组肝细胞结构紊乱模糊，基质明显增多，提示雷至胶囊组在降尿蛋白、血脂，升高血清白蛋白、保护肝脏和肾脏方面优于雷公藤多苷组，且降尿蛋白也优于雷公藤水提物，但不同剂量雷至胶囊组间差异无统计学意义，说明小剂量雷至胶囊就可以达到治疗目的。因此从疗效或药物安全性方面雷至胶囊均优于其他雷公藤制剂，这体现了减毒增效的效果，同时用小剂量雷至胶囊即可达到治疗效果，故有广泛的应用前景。

[1]黎磊石,刘志红.雷公藤在肾脏病领域应用的前景[J].肾脏病与透析肾移植杂志,1997,6(3）：203～204.

[2]黎磊石,刘志红.应用雷公藤治疗肾炎二十五载的体会[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2003,12(3）：246～247.

[3]胡伟新,唐政,姚小丹,等.双倍剂量雷公藤多甙治疗原发性肾病综合征的近期疗效[J].肾脏病与透析肾移植杂志,1997,6(3）：210～214.

[4]Pavenstadt H，Kriz W.Kretzler M.Cell biology of the glomerular pidicyte[J].Physiol Re，2003，83：253 ～ 307.

[5]鲁斌，李新民，马融.对改造的阿霉素肾病模型的评价[J].实验动物科学与管理,1999,16(3）：5～9.

[6]黎磊石,张训,陈光永,等.雷公藤治疗肾小球肾炎的临床研究[J].中华内科杂志,1981,20(4）：216～220.

[7]韦登明,黄光照.雷公藤及其单体的药理和毒理病理学研究进展[J].中药材,2003,26(12）：894～897.

[8]杨小红,张伟程.雷公藤制剂的应用及其副作用[J].中医药临床杂志,2004,16(5）：511 ～512.