复方三拗止咳颗粒质量标准研究

2010-11-06孙蕾，杨竞，林昌

中国药业 2010年3期

孙蕾，杨竞，林昌

（1.江苏省中医院，江苏南京 210029； 2.江苏省南京市脑科医院，江苏南京 210029；3.南京医科大学第三附属医院，江苏仪征 210029)

复方三拗止咳颗粒系三拗汤加减而成，由炙麻黄、前胡、黄芩、陈皮等组成的复方制剂，具有清热化痰、降气平喘、消炎止咳的功效，用于急性支气管炎或慢性支气管炎急性发作的咳嗽。笔者对该制剂进行了质量标准研究[1]，现报道如下。

1 仪器与试药

CS-930型薄层扫描仪（日本岛津）；Millipore纯水机；BP211 D型十万分之一电子分析天平，BP 121 S型万分之一电子分析天平；UV-2500型分光光度计；硅胶G（青岛海洋化工厂）。各对照药材与对照品均由中国药品生物制品检定所提供；复方三拗止咳颗粒由南京元泰医药科技发展有限公司提供。甲醇为色谱醇；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别

陈皮：取本品3 g，研细，加水 30 mL，超声提取20 min，离心，上清液加乙醚提取2次，每次20 mL，弃去乙醚液，再用乙酸乙酯提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液。取除陈皮的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一含1%氢氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液无干扰（图1 A）。

前胡：取本品5 g，研细，加氯仿30 mL，回流提取20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取前胡对照药材0.5 g，加氯仿10 mL，回流提取20 min，滤过，作为对照药材溶液。取除前胡的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照品溶液无干扰（图1 B）。

黄芩[2]：取本品5 g，研细，加甲醇回流提取30 min，滤过，滤液蒸干，加水20 mL，微热使溶解，加入盐酸3滴，搅匀，加乙酸乙酯提取2次，每次30 mL，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。取除黄芩的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅦB]试验，吸取上述溶液各10μL，分别点于同一羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮 -乙酸 -水（10∶6∶4∶3）上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以4%三氯化铁乙醇溶液。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液无干扰（图1 C）。

图1 薄层色谱图

2.2 含量测定

2.2.1 溶液制备

精密称取盐酸麻黄碱对照品5 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取本品5 g，研细，精密称定，置100 mL锥形瓶中，精密加入甲醇25.0 mL，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，静置，取上清液，作为供试品溶液。按不含炙麻黄的处方比例和制备工艺，制成不含炙麻黄的空白样品，然后按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。

2.2.2 测定波长选择

分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5μL，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰，进行光谱扫描，结果表明供试品溶液和对照品溶液在波长505 nm处有最大吸收峰。

2.2.3 方法学考察

线性关系考察：照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录Ⅵ B]试验，精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液 1，2，3，4，5，6，7 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰。照薄层扫描法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]进行扫描，检测波长 !S=505 nm，参比波长 !R=445 nm，测量对照品吸收度积分值，得回归方程 Y=3 663.109+16 099.456X，r=0.999 9。结果表明盐酸麻黄碱点样量在0.5～3.5μg范围内与吸收度积分值呈良好的线性关系。

稳定性试验：取供试品溶液，分别点样5μL，展开，显色，分别在0，0.5，1.5，2.0 h测定样品中盐酸麻黄碱斑点吸收峰峰面积积分值，结果的 RSD=2.58%，表明样品显色斑点在2 h内稳定。

同板精密度试验：分别精密吸取对照品溶液5μL，在同一硅胶G薄层板上点5个点，展开，取出，晾干，显色，加热至斑点清晰，扫描，测定吸收度积分值，结果的 RSD=1.45%(n=5)。

异板精密度试验：精密吸取对照品溶液5μL，分别在不同的硅胶G薄层板上点样，展开，取出，晾干，显色，加热至斑点清晰，扫描，测定吸收度积分值，结果的 RSD=2.69% 。

重现性试验：取同一批样品，分别制备6份供试品溶液，精密吸取5μL，点样，展开，取出，晾干，显色，加热至斑点清晰，扫描，测定吸收度积分值并计算含量，结果的 RSD=3.38%。

加样回收试验：取已知含量(0.626 mg/g)的样品，精密称取0.25 g，加入一定量的盐酸麻黄碱对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液，按薄层色谱条件测定吸收度积分值，结果见表1。

表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果（n=6）

2.2.4 样品含量测定

取3个批次的样品细粉5 g，精密称定，每个批次的样品测2份，取其平均值，按供试品溶液制备方法制备，点样，按上述条件测定斑点吸收度积分值，以外标二点法计算含量，结果测得的盐酸麻黄碱平均含量为6.25 mg/袋，据此按80%计算，暂订本品每袋含炙麻黄以盐酸麻黄碱（C10H15NO·HCl）计算应不少于5 mg。