克乳痛胶囊挥发性成分包结工艺研究

蒋建春

克乳痛胶囊挥发性成分包结工艺研究

蒋建春

目的考察克乳痛胶囊中丹皮酚及蛇床子挥发油的最佳提取工艺和环糊精最佳包合工艺。方法比较饱和溶液合并超声法和研磨法两种不同挥发油包结方法及其他包结条件，以挥发性成分与β-环糊精之比、包合时间、包合温度作为考察因素，用正交试验考察最佳包合工艺，以包合物收得率和挥发油包合率作为评价包合工艺的指标。结果通过比较采用研磨法制备包合物，最佳包合工艺为：挥发油加及丹皮酚加4倍量β-环糊精及适量水，40℃研磨包合6h。结论该方法包合物的平均得率为90.8%，平均包结率为75.5%，表明该工艺基本可行。

丹皮酚；蛇床子；挥发油；包合技术；正交试验

克乳痛胶囊由江苏省中医院许芝银教授根据多年的临床实践，按照中医理论中关于乳癖的发病机制和西医体系中乳腺增生病的学说，从补益肝肾、调摄冲任为主，行淤化痰、散结止痛为辅的治疗方法入手，自拟处方而成。原方曾为医院制剂，经药效学筛选，最终确定处方组成为鹿角片、蛇床子、何首乌、丹皮、赤芍、郁金、昆布、牡蛎。其药材来源均符合药典标准。本试验进行丹皮酚及挥发油β-环糊精包合物的制备研究，应用包结技术可稳定丹皮酚及蛇床子挥发油，提高克乳痛胶囊的稳定性，实验探讨了饱和溶液合并超声法及研磨法这两种不同方法及其包结条件对包结物得率及包结率的影响，从而得出最佳工艺，并进行3批验证试验，确定该工艺的可行性。

1 丹皮酚、蛇床子挥发油的提取[1]

1.1 丹皮酚的提取

取牡丹皮药材200g，水蒸气蒸馏，收集药材量10倍的蒸馏液，冷藏48h，滤过，得丹皮酚结晶。

1.2 蛇床子挥发油的提取

分别称取蛇床子200g，郁金200g，加6倍量的水，浸泡2.0h，水蒸气蒸馏6h，冷却，收集挥发油。

2 丹皮酚及蛇床子挥发油的包结工艺研究[2-5]

2.1 试验仪器及试剂

β- CD（安徽山河药用辅料有限公司，纯度99.2%）；挥发油提取器 （南京銮玉化玻仪器有限公司）；磁力加热搅拌器（江苏金坛市大地自动仪器厂）；HT系列台式数控超声波清洗机（山东济宁恒通超声电子设备公司）；JM系列胶体磨（廊坊通用机械制造有限公司）；无水硫酸钠、无水乙醇均为分析纯。

2.2 方法与结果

2.2.1 饱和溶液合并超声法

2.2.1.1 实验方法

采用正交试验法，按表1、表2对应的因素水平进行试验。每份样品精密取蛇床子挥发油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量无水乙醇溶解，分次加入β-环糊精饱和水溶液中，边加边超声相应的时间，取出，冷藏48h，滤过，滤渣用少量无水乙醇洗涤后于40℃真空干燥[1]，即得。

2.2.1.2 评价指标[6]

包合物得率：按下式计算

包结率的测定：参照《中国药典》2000年一部牡丹皮项下丹皮酚含量测定方法测定包合前与包合后丹皮酚的含量，按下式计算

2.2.1.3 因素水平的选择

根据文献[7]，认为挥发油和β-环糊精的比例、包合时间、包合温度为主要因素，根据实际条件分别对每个因素设计出5个水平，进行单因素试验，以优选3个水平。筛选出的试验因素水平结果见表1。

表1 因素水平表

2.2.1.4 正交试验安排及结果[8,9]

见表2～表4。

表2 L9（34）正交试验表

表3 包合物得率方差分析表

表4 丹皮酚包结率方差分析表

2.2.1.5 结论

方差分析表明，3个因素不同水平之间未见显著性差异，比较不同因素的极差R，其影响程度大小为B＞C＞A，再结合各因素不同水平之间Ki值，确定最佳的包合工艺为A1B3C2。即挥发油加8倍量β-环糊精所制成的饱和溶液，40℃超声包合1.5h的包结工艺最佳。

2.2.2 研磨法

2.2.2.1 实验方法

采用正交试验法，优选研磨法最佳工艺条件，按表5、表6对应的因素水平进行试验。每份样品精密取蛇床子挥发油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量无水乙醇溶解，分次加入β-环糊精饱和水溶液中，边加边研磨相应的时间，取出，冷藏48h，滤过，滤渣用少量无水乙醇洗涤后于40℃真空干燥，即得。

2.2.2.2 评价指标

同2.2.1.2项下评价指标。

2.2.2.3 因素水平的选择

根据文献[10]，认为挥发油和β-环糊精的比例、包合时间、包合温度为主要因素，根据实际条件分别对每个因素设计出5个水平，进行单因素试验，以优选3个水平。筛选出的试验因素水平结果见表5。

表5 因素水平表

2.2.2.4 正交试验安排及结果[8,9]

见表6～表7。

2.2.2.5 结论

包结率方差分析结果表明，3个因素不同水平之间未见显著性差异，比较不同因素的极差R，其影响程度大小为B＞C＞A，再结合各因素不同水平之间Ki值，同时考虑包合物的得率，确定最佳的包合工艺为A2B3C2。即挥发油及丹皮酚加4倍量β-环糊精及适量水，40℃研磨包合6h的包结工艺最佳[6]。

表6 L9（34）正交试验表

表7 包合物得率方差分析表

表8 丹皮酚包结率方差分析表

2.3 超声法与研磨法对包结物得率及包结率影响的比较

2.3.1 超声法最佳包合工艺

精密取蛇床子挥发油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量无水乙醇溶解，分次加入β-环糊精（12.8g）饱和水溶液之中，边加边超声，超声时间1.5h，包合温度40℃取出，冷藏48h，滤过，滤渣用少量无水乙醇洗涤后于40℃，真空干燥，即得。

2.3.2 研磨法最佳包合工艺

精密取蛇床子挥发油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量无水乙醇溶解，分次加入β-环糊精（6.4g）饱和水溶液之中，边加边研磨，研磨时间6h，包合温度40℃，取出，冷藏48h，滤过，滤渣用少量无水乙醇洗涤后于40℃真空干燥，即得。

2.3.3 结果

见表9。

表9 超声法及研磨法最佳包合工艺

结论：根据以上结果可见研磨法制备包合物优于饱和溶液合并超声法，再考虑到饱和溶液合并超声法制备丹皮酚与蛇床子挥发油β-环糊精包合物所用β-环糊精量较大，且目前尚缺乏适应生产的超声设备，故选择研磨法制备包合物，以降低β-环糊精的用量。

2.4 验证试验

取丹皮酚结晶1.0g，加2倍量无水乙醇溶解后与挥发油1.5mL混匀，分次加入丹皮酚与挥发油总量4倍量的β-环糊精混悬液研匀，40℃研磨6h，所得糊状物与40℃真空干燥24h，无水乙醇洗涤，干燥的包合物，分别按上法测定包合物得率及丹皮酚的包结率。平行试验3份，结果见表10。

表10 丹皮酚等β-环糊精包合物制备工艺

该包合物的平均得率为90.8%，平均包结率为75.5%，表明该工艺基本可行。

3 讨 论[10,11]

由于实验所得研磨法制备包合物优于饱和溶液合并超声法，且饱和溶液合并超声法制备丹皮酚与蛇床子挥发油β-环糊精包合物所用β-环糊精量较大，且目前超声设备限制，故选择研磨法制备包合物，以降低β-环糊精的用量根据。 通过正交试验筛选出最佳包合工艺，挥发油加及丹皮酚加4倍量β-环糊精及适量水，40℃研磨包合6h。验证实验表明本工艺质量稳定，基本可行。

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