米诺环素对临床几种常见假丝酵母菌体外药敏的初步探究

邓 群,李泽玉,余 旻

(三峡大学人民医院宜昌市第一人民医院检验科,湖北宜昌 443000)

米诺环素对临床几种常见假丝酵母菌体外药敏的初步探究

邓 群,李泽玉＊,余 旻

(三峡大学人民医院宜昌市第一人民医院检验科,湖北宜昌 443000)

探究米诺环素在体外对常见酵母菌的药敏特点。采用Rosco纸片扩散法对168株常见的几种假丝酵母菌进行米诺环素的药敏试验。米诺环素有抑菌环的比率:白假丝酵母菌41%,光滑假丝酵母菌1.2%,热带假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌没有抑菌环。在常见几种酵母菌中,米诺环素几乎只对白假丝酵母菌在体外有抗菌活性。

米诺环素;假丝酵母;抗菌活性

目前住院患者侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)备受关注,据统计,深部真菌感染的绝大多数由酵母菌引起,占67.29%[1],其中以白假丝酵母菌(Candida albicans)的比例最高,且深部白假丝酵母菌感染的致死率达40%[2-3]。分离出酵母菌最多的部位是呼吸道,占真菌标本的76.39%,其种类以白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌和热带假丝酵母菌为主,分别占72.42%、13.45%和10.07%[4]。目前我院临床分离的假丝酵母菌构成比为白假丝酵母菌66.27%,光滑假丝酵母菌15.23%,热带假丝酵母菌12.17%,克柔假丝酵母菌3.12%,其他酵母菌3.21%。市场上抗真菌的药物都各具特点,但都有不同程度的不良反应,而且随着新药的研发,抗真菌药的价格不断攀升。在日常工作中发现米诺环素(Minocycline,别名二甲胺四环素)具有不同于其他抗细菌药物的特点,就是K-B纸片扩散法在M-H琼脂上对白假丝酵母菌有抑菌环。本实验力图通过体外Rosco纸片扩散法对168株常见的几种酵母菌进行米诺环素的药敏试验,分析其产生抑菌环的构成比。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 自2010年3月至2010年7月临床分离的168株假丝酵母菌(其中白假丝酵母菌115株、光滑假丝酵母菌27株、热带假丝酵母菌19株、克柔假丝酵母菌7株);病人年龄23～90岁,平均年龄(70.16±10.24)岁,分别来自痰、咽拭子、纤支镜冲洗液、血液、中段尿、分泌物等标本。均用科玛嘉显色培养基进行初步鉴定,然后用API20C AUX鉴定到种。

1.1.2 标准菌株 白假丝酵母菌ATCC 90028。

1.1.3 培养基 沙保罗培养基(蛋白胨10 g/L,葡萄糖40 g/L,琼脂13 g/L,PH 5.6±0.2);科玛嘉显色培养基;Shadomy琼脂培养(广州迪景)。

1.1.4 药敏纸片 米诺环素纸片(美国欧赛)。

1.1.5 仪器 电热恒温培养箱PBX-272(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)。

1.2 方法

1.2.1 培养[5]将临床各种标本接种于沙保培养基,35℃培养24～72 h,生长出可疑菌落经革兰染色确定为真菌后,用API20C AUX真菌D板条进行鉴定分型。

1.2.2 菌悬液制备 将沙保琼脂上的待检假丝酵母菌转种于科玛嘉显色培养基,35℃24～48 h;Shadomy琼脂培养基先置35℃干燥20～25 min,挑取直径＞1 mm的纯培养菌落用生理盐水制成菌悬液,0.5麦氏浊度,备用。

1.2.3 Rosco纸片扩散法 将0.5麦氏单位菌悬液用生理盐水1∶1稀释倾倒于Shadomy琼脂培养基,用L型玻棒涂抹均匀,吸走多余的液体,35℃干燥10 min,贴米诺环素纸片,培养18～24 h后量取抑菌环直径(抑菌环边缘少量菌落生长忽略不计)。

2 结 果

2.1 标准菌株

抑菌环直径平均14～15 mm。

2.2 药敏实验

临床分离株药敏实验结果(图1)。其中,米诺环素对白假丝酵母菌的作用最好,有抑菌环的构成比为41%;米诺环素对光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌等的作用很差(见表1)。

图1 米诺环素在白假丝酵母菌平板上的抑菌环Fig.1 Inhibitory ring of minocycline on Candida albicansplate

表1 假丝酵母菌属临床分离株对米诺环素药物纸片的敏感试验结果Table 1 Sensitivity experiment results of clinically Candidaspp.isolates to minocycline sheet

3 讨 论

尽管米诺环素(Minocycline)是抗细菌药物, CLSI指南上只有抗细菌的解释标准,Rosco纸片扩散法也没有抗真菌的解释标准,但本研究中发现米诺环素对白假丝酵母菌在体外有抗菌活性,而且抑菌环直径多在11～15 mm,且有抑菌环的构成比为41%;光滑假丝酵母菌仅有2株有抑菌环,直径在7～10 mm,热带假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌没有抑菌环,也不排除非白假丝酵母菌株数少的原因。酵母菌是深部真菌感染的主要病原菌[1],而白假丝酵母菌又是酵母菌感染里的最大构成比[2],因此白假丝酵母菌感染的治疗是抗真菌治疗的重点。由于白假丝酵母菌对唑类抗真菌药物耐药问题的日益凸显,而两性霉素B的毒副作用也不容忽视,米诺环素在体外表现出对白假丝酵母菌的抗菌活性给体内药理学研究打下了良好的基础。

[1]冯文莉,杨静,奚志琴,等.侵袭性真菌医院内感染的流行病学调查[J].中华流行病学杂志,2009,30(10):1043-1046.

[2]Lee I,fishman NO,Lautenbach E,et al.Risk factors for fluconazole-resistact Candida glabrata bloodstream infection[J]. Arch Intern Med,2009,169(4):379-383.

[3]Lockhart S R,Messer S A,Dickema D J,et al.identification of Candida nirariensis and Candada bracarensisin a large global collection of Candida glabrataisolates:comparison to the literature[J].J Chin Microbiol,2009,47(4):1216-1217.

[4]钟晓艳,陈慧玉,何加宁,等.1182株假丝酵母菌感染特性及耐药性分析[J].国际检验医学杂志,2009,30(8):816-817.

[5]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程(第3版)[S].南京:东南大学出版社,2006:920-922.

Initial Drug Sensitivity Exploration of Minocycline to Common Candidaspp.in V itro

DENG Qun,LI Ze-yu,YU Min
(First People’s Hosp.of Yichang City;Dept.of Lab.,Three Gorges Uni.People’s Hosp.,Yichang443000)

Drug sensitivity of minocycline was tested to 168 strains of common C and idaspeciesin vitroadopting Rosco disc diffusion method Methods:The results showed that the rate of bacteriostat ring to minocycline:Candida albicans was 41%,and C.glabrata1.2%;while C.tropicalis and C.kruseihad no bacteriostat ring.Therefore minocycline had the antifungal activity only on Candida albicans in vitro.

minocycline;C andidaspp.;antifungal activity

R379.4

B

1005-7021(2010)06-0086-03

宜昌市2009年医疗卫生科技攻关计划项目(A09301-15)

邓群 女,副主任技师。主要从事临床微生物检验。E-mail:dq0.1234@163.com

＊通讯作者。E-mail:53666135@qq.com

2010-10-18;

2010-11-15