HPLC-ELSD法测定甘露醇注射液中甘露醇的含量

张建业 冯向东 河南省南阳市食品药品检验所（473061）

HPLC-ELSD法测定甘露醇注射液中甘露醇的含量

张建业 冯向东 河南省南阳市食品药品检验所（473061）

目的 建立甘露醇注射液中甘露醇的含量测定方法。方法 采用HPLC法，使用氨基柱，流动相为乙腈-水(83：17 )；ELSD漂移管温度70℃；氮气流速2.0L/min；柱温30℃。结果 甘露醇与相邻峰得到很好分离，进样量在1.008～6.048μg时线性关系良好，回归方程为Y=1.6206X+4.13；r=0.9992；平均加样回收率：99.24%，RSD 为2.01%。结论 本法结果准确，便于操作，可作为甘露醇注射液的质量控制方法之一。

HPLC-ELSD；甘露醇注射液；甘露醇

甘露醇注射液是一种常用的渗透性脱水药，因其起效快，作用持久，用后无明显“反跳现象”，为治疗脑水肿的首选药，临床使用量较大。2005年版《中国药典》收载的该品种含量测定方法是氧化还原滴定法，2010年版中国药典采用示差折光高效液相色谱法测该制剂的含量，色谱柱采用强阳离子交换柱，因示差折光检测器目前还不普及，所以限制了该方法的应用。本文参考文献[1]，用高效液相色谱法，采用氨基柱，配合蒸发光散射检测器，对甘露醇注射液中甘露醇进行了测定，结果较满意。

1 仪器与试药

Waters 2695高效液相色谱仪，Waters 2424 蒸发光散射检测器；Empower Two色谱管理软件；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯；甘露醇对照品、山梨醇对照品购自中检所（批号100534-200301、100555-200306），甘露醇由市场购得（河南华利药业有限公司 规格250ml:50g）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Thermo 氨基柱（4.6mm×200mm粒径5μm）；流动相为乙腈-水(83:17 )；流速1.0ml/min；柱温30℃；ELSD漂移管温度70℃；氮气流速2.0L/min；进样量15μl，甘露醇峰理论塔板数不低于4000。

2.2 供试品溶液制备 精密量取本品1ml，移至100ml容量瓶中，流动相加至刻度，摇匀，精密量取5ml移至50ml容量瓶中，流动相加至刻度，摇匀。0.45μm滤膜滤过，即得0.2 mg/ml供试品溶液。

2.3 对照品溶液制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的甘露醇对照品20.16mg，山梨醇对照品18.63mg，分别置100ml容量瓶中容量瓶中，分别加流动相至刻度，即得每1ml中含0.2016mg的甘露醇对照品溶液及每1ml中含0.1863mg的山梨醇对照品溶液。

3 方法学考察

3.1 分离度及线性关系 取上述两种对照品溶液等量混合，按上文的色谱条件进样20μl，测定，结果甘露醇与山梨醇分离度大于2.0，符合药典要求。色谱图见图1。

分别取甘露醇对照品溶液5、10、15、20、25、30μl进样，按上文的条件与方法进样测定，以对照品进样量的自然对数（lnX）为横坐标，以峰面积的自然对数（lnY）为纵坐标，进行线性回归，回归方程为Y=1.6206X+4.13；r=0.9992；线性范围为；1.008～6.048μg 。

3.2 精密度试验 取甘露醇对照品溶液，按2.1项下重复进样5次，测定峰面积的RSD为1.46%，结果表明精密度良好。

3.3 稳定性试验 取同一批样品溶液，室温下放置，按2.1项下测定方法和条件，分别于0、2、4、8h测峰面积，结果表明在8h内具有良好稳定性，RSD为2.31%。

3.4 重复性试验 取同一批样品（批号090004）6份，按2.2项下制成供试品溶液，按2.1项下分别测定。计算含量，平均含量98.2%，RSD为1.86%。

3.5 回收率试验 取已知含量的供试品（批号090004）溶液6份，每份2ml，移至5ml容量瓶中，分别精密加入甘露醇对照品液2ml，流动相加至刻度，按2.1项下分别测定。计算回收率，结果回收率99.24%，RSD为2.01%。结果见表1。

表1 甘露醇加样回收率试验结果

3.6 样品含量测定 取由市场购得的样品3批，按2.2项下制成供试品溶液，分别精密吸取甘露醇对照品溶液20μl，供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，按2.1项下测定，外标法计算含量，结果批号090004、090013、090011的甘露醇含量分别为标示量的98.2%、97.6%、98.7%。色谱图见图2。

4 讨论

4.1 色谱柱的选择 甘露醇属极性化合物，若用C18柱分离，色谱峰几乎不被色谱柱保留，很快被洗脱下来，所以不能采用常规的反相色谱柱分离测定。氨基柱为中等极性色谱柱，其键和相的氨基可与甘露醇选择性作用，可以用来分离杂质，在本实验色谱条件下，分离效果良好。

HPLC-ELSD Determination of Mannitol in Mannitol Injection

Zhang Jianye Feng Xiangdong , ( Nan yang Institute for Food and Drug Contral , Nan yang 473061 , China)

Objective To establish the method of determining mannitol in mannitol injection . Methods HPLC-ELSD was used to determine mannitol in mannitol injection. The chromatographic analysis were carried on a NH2 column , The mobile phase composition was acetonitrile- water (83:17) at 30℃.；Drift tube temperature: 70℃，gas flow rate: 2.0L/min. Results Mannitol and the adjacent peaks are well separated. The calibration curves was linear in the ranges of 1.008～6.048μg.and regressive equations was Y=1.6206X+4.13. r=0.9992. Average recoveries was 99.24%. Conclusion The method is simple and rapid and with satisfactory results，It is suitable for quality control of mannitol injection.

HPLC-ELSD；Mannitol Injection；Mannitol

10.3969/j.issn.1672-2779.2010.18.176

1672-2779（2010）-18-0241-02