动脉外膜交感神经网剥脱切除术后肢体骨内压、血液流变学、神经肽改变的实验研究

吴珊鹏，林 欣

（1.福建医科大学附属泉州市第一医院骨科，福建泉州 362000；2.首都医科大学附属北京天坛医院骨科，北京 100050）

目前已知许多常见的骨科疾病均与骨内压增高有关，如股骨头坏死、骨性关节炎、跟痛症等[1-4]，所以骨内压作为骨科临床和基础研究日益引起人们的注意。骨内高压临床治疗上较棘手，本课题从自主神经系统入手，探讨交感神经对骨内血管舒缩活动的影响。以往有报道将颈总动脉周交感神经网剥脱切除后，脑部血管出现扩张[5]。交感神经对骨内血管是否也产生同样的作用，这是本课题要研究的重点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 选取新西兰纯种大白兔15只，雌雄不拘，体重（2.16±0.35） kg，右侧膝关节“V”形聚乙烯夹板伸直位持续固定35d，制成固定侧胫骨上端骨内高压模型。

1.1.2 仪器与试剂 YH-4型生理压力传感器（北京航天医学工程研究所），BL-420生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司），R80血液流变仪和红细胞变形与聚集仪（北京世帝科学仪器公司），r计数器（合肥众成机电技术开发有限责任公司），放免分析试剂（北京晶美生物公司提供的试剂盒）。

1.2 实验方法

1.2.1 胫骨上端骨内压测量 将15只大白兔用3%戊巴比妥钠（25 mg/kg体重）进行静脉麻醉，在胫骨结节上方约0.5 cm内侧平坦面将侧压针（内径0.95 mm，外径1.5 mm）刺入骨髓腔内，抽出针芯，滴入2 500 U/ml的肝素生理盐水，将其连接到YH-4型生理压力传感器，再连接在BL-420生物机能实验系统，进行测压，每个部位观测10～15 min，待骨内压稳定后，记录其压力值及曲线。

1.2.2 股动脉外膜交感神经网剥脱切除术 15只大白兔采用3%戊巴比妥钠静脉麻醉，行右大腿上段股动脉外膜交感神经网剥脱切除术，术后再测量胫骨上端骨内压值及曲线。

1.2.3 胫骨骨髓内血液流变学测量 术前及交感神经网剥脱切除术后第2天，15只兔3%戊巴比妥钠静脉麻醉后，分别抽取每只兔右胫骨上端骨髓内血约3 ml，在R80血液流变仪和红细胞变形与聚集仪上测量血液流变学数值。

1.2.4 NPY和CGRP测检 抽取15只兔手术前、后右胫骨上端骨髓内血2 ml，注入含10%EDTA二钠30 μl和抑肽酶40 μl的试管中，混匀后离心（4℃，3 000 r/min，10 min），分离血浆，-70℃保存待测。检测前，将样品置于室温或冷水中逐渐复融，再次离心（4℃，3 000 r/min，10 min），取上清液测定。采用放免分析法进行分析，用r计数器分别测定骨髓血中NPY和CGRP的含量。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 术后骨内压结果

术后整体骨内压值有下降趋势（P<0.05），但有2只兔骨内压值略增高（图1）。

2.2 骨髓内血液流变学结果

术后胫骨上端骨髓内血浆黏度值、红细胞刚性指数、全血黏度值、红细胞变形指数、红细胞刚性指数均较术前明显下降，而红细胞聚集指数出现明显上升（表1）。

2.3 NPY和CGRP检测结果

手术前、后 NPY 值由（17.23±9.58）ng/L 下降至（14.26±8.23） ng/L， 差异有统计学意义（P<0.01）；CGRP 由（28.86±9.76） ng/L 上升至（33.89±9.63） ng/L，差异有统计学意义（P<0.01）（表1）。

3 讨论

笔者以往曾有报道本研究单项指标的结果及分析[6-8]。本文在此基础上，侧重对实验组的几项指标综合进行分析，以期进一步了解几项指标在交感神经与骨内压关系研究中的意义。

正常情况下，NPY与CGRP在血浆中的浓度是维持在相对平衡状态的，而NPY、CGRP活性物质对血管调节又是对立统一的，以保持血管的正常舒缩功能，保证组织血液供应。当CGRP释放增加（或NPY释放减少），将出现血管扩张，促使血液流变学改变，使血浆黏度下降，血小板凝聚性下降。本实验结果显示，交感神经切断后，胫骨骨髓血CGRP含量显著增加，NPY含量下降，全血黏度值及血浆黏度值均出现下降，血液出现稀释倾向。骨内压于术后也出现下降，说明交感神经切断与血液黏度下降、血液稀释及骨内压下降呈正相关关系，从该角度说明了交感神经切断有降低骨内压作用。

表1 实验组手术前、后血液流变学测量值和NPY、CGRP值比较（±s，n=15）Tab.1 Comparison ofdetected hemorrheological value and NPY,CGRP level before and after the operation in experimentgroup(±s,n=15)

表1 实验组手术前、后血液流变学测量值和NPY、CGRP值比较（±s，n=15）Tab.1 Comparison ofdetected hemorrheological value and NPY,CGRP level before and after the operation in experimentgroup(±s,n=15)

P值NPY（ng/L）CGRP（ng/L）全血黏度值（mPa·s）切变率（200/s）切变率（300/s）切变率（5/s）切变率（1/s）血浆黏度值（mPa·s）全血高切还原度（BRVi-H）全血低切还原度（BRVi-L）红细胞刚性指数（IR）红细胞变形指数（TK）红细胞聚集指数（EagI）指标名称 术前 术后17.23±9.58 28.86±9.76 14.26±8.23 33.89±9.63<0.01<0.01 6.29±0.72 7.67±0.80 13.56±1.61 20.93±2.23 1.60±0.18 15.18±2.11 59.20±8.43 8.08±1.96 1.25±0.18 3.34±0.23 4.64±0.63 6.34±0.81 10.53±1.42 17.54±3.53 1.41±0.18 10.45±1.75 49.46±8.13 6.26±2.00 1.05±0.20 3.94±0.43<0.01<0.01<0.01<0.01<0.01<0.01<0.05<0.01<0.05<0.01

股动脉外膜交感神经网剥脱切除术是一种治疗肢体骨内高压新方法，以往报道较少，本课题从基本实验指标做起，探索该方法的可行性。从实验结果看，该方法有降低骨内压作用，课题选择手术前后骨内压、血液流变学和神经肽三项指标，尚不能完全体现该方法对骨内压的影响。因此，在此基础上，笔者正计划做更进一步的实验检测，如血流动力学、血管周围分子因素及该方法是否对肢体产生副作用等指标。从多方面来验证该方法的可行性，为今后过渡到临床治疗骨内高压患者做好前期准备。

[1]李鹏翠,卫小春,牛金亮.骨内压在激素诱导型股骨头坏死病程发展中的价值[J].生物骨科材料与临床研究,2006,14(2):39-41.

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[3]李宏宇,安洪.骨内高压症的治疗[J].中国临床康复,2006,10(48):148-150.

[5]田洪孝,张广国,尹燕新,等.颈总动脉交感神经网剥脱术治疗脑瘫近期随访[J].中国矫形杂志,2006,14(13):1025-1026.

[6]吴珊鹏,孔抗美,王新家.股动脉外膜交感神经网剥脱切除对骨内压超微结构的影响[J].中华实验外科杂志,2004,21(8):986-987.

[7]吴珊鹏,孔抗美,王新家.股动脉外膜交感神经网剥脱切除对骨内高压血液流变学的影响[J].中华实验外科杂志,2004,21(9):1119-1120.

[8]吴珊鹏,孔抗美,齐伟力,等.股动脉外膜交感神经网剥脱切除对骨内高压神经肽的影响[J].中华实验外科杂志,2006,23(1):88-89.