益气强心饮对慢性心衰阳虚水泛证大鼠心功能及病理改变的影响1)

董 波,宋婷婷,董天宝,王东海

慢性心力衰竭(CHF)是临床常见病及多发病,是各种心血管疾病发展的终末阶段,是一个复杂的综合征,严重心力衰竭患者病死率高,其2年病死率可达30%以上,6年病死率在70%左右。除引起死亡以外,心力衰竭可严重影响患者的生活质量[1]。本实验旨在探讨益气温阳、活血利水中药益气强心饮对慢性心衰大鼠心功能及病理改变的影响,揭示益气强心饮治疗及延缓心衰发展的作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 120只雄性健康SPF级Wistar大鼠,体重200 g～250 g,由中国医科大学实验动物中心提供。

1.1.2 实验药品 马来酸依那普利片,扬子江药业集团,批号:08100902;心宝丸,广东省药物研究所制药厂,批号:20081123;益气强心饮,由红参、制附子、黄芪、葶苈子、泽兰、丹参、红花等组成,饮片来源于辽宁中医药大学附属二院药剂科。

1.1.3 实验试剂及仪器设备 SONOS5500彩色多普勒超声机,由AgzletE公司生产。BCD-243KA超低温冰箱,由美国生产;奥林巴斯BX51显微镜,由日本奥林巴斯生产;LKBV型超薄切片机,由瑞典生产;取材器械由上海医疗器械制造厂生产。

1.2 实验方法

1.2.1 CHF大鼠模型建立 大鼠经戊巴比妥钠腹腔注射(45 mg/kg)麻醉后,行腹部正中切开,分离肾动脉上方的腹主动脉约1 cm长,用7号针头紧贴腹主动脉平行放置,并将两者一起结扎,然后抽出7号针头,即可使腹主动脉部分狭窄。假手术组仅开腹并分离腹主动脉,但不予以结扎。术后,给予大鼠青霉素10 000 U肌肉注射,每日1次,连续3 d以预防感染。腹主动脉结扎4周后,如大鼠出现失代偿性症状,如呼吸急促、心动过速和劳力性呼吸困难,心脏彩超检测:左室射血分数(LVEF)＜50%,则心衰造模成功。除假手术组外,其余心衰造模成功大鼠均给予醋酸氢化可的松(25 mg/kg)肌肉注射,每日一次,共14 d。撤去激素后6 d,如大鼠出现少食少饮、体重减轻、反应迟钝、活动减少、拱背耸毛,毛无光泽,易脱落、叫声低弱,大便稀溏、肛周污染等症状,则慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型造模成功。

1.2.2 实验分组及给药 筛选假手术组大鼠12只,手术组具有典型表现的大鼠72只,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,每组 12只大鼠,加上假手术组共7组。各组动物于同等条件下饲养,其中中药治疗组:低(15 g/kg)、中(30 g/kg)、高(60 g/kg)剂量组,心宝丸(0.1 g/kg)组和马来酸依那普利片(0.001 8 g/kg)组,按1 mL/100 g灌服溶液,每日1次灌胃;假手术组、模型组灌服蒸馏水,每日1次。

1.2.3 指标测定

1.2.3.1 大鼠心功能 用药8周后,应用SONOS 5500彩色多普勒超声机测定 LVEF、收缩期容积(ESV)、舒张期容积(EDV)、每搏量(SV)、左室短轴缩短率(FS)。

1.2.3.2 心肌组织病理形态变化 每组随机抽取4只大鼠,取左心室心肌组织作为标本备检。

2 结 果

2.1 各组大鼠心功能情况 模型组大鼠心功能明显降低,LVEF、SV 降低,ESV、EDV 偏高。西药对照组、中药对照组及中药低、中、高剂量组,与模型组比较有统计学意义,西药对照组、中药对照组、中药低、中、高剂量组均能有效地改善大鼠心功能。中药中剂量组改善大鼠心功能的疗效优于西药对照组。详见表1。

表1 各组大鼠心功能测定结果(±s)

表1 各组大鼠心功能测定结果(±s)

组别 n EVD(mL) SV(mL) ESV(mL) LVEF(%) FS(%)假手术组 10 0.552±0.096 0.421±0.031 0.117±0.014 83.2±4.5 48.6±2.6模型组 9 0.549±0.105 0.243±0.0471) 0.301±0.0241) 44.2±3.21) 19.2±1.31)西药对照组 10 0.492±0.1161)2) 0.326±0.0491)2) 0.163±0.0311)2) 64.7±5.21)2) 29.8±1.61)2)中药对照组 10 0.492±0.1031)2) 0.289±0.0391)2) 0.201±0.0181)2) 59.8±3.61)2) 27.1±1.51)2)中药低剂量组 9 0.542±0.108 0.328±0.0381)2) 0.232±0.0271)2) 57.8±5.71)2) 26.2±1.71)2)中药中剂量组 10 0.540±0.091 0.389±0.0551)2) 0.151±0.0181)2) 70.2±4.81)2)3) 34.5±2.01)2)3)中药高剂量组 9 0.489±0.089 0.313±0.0411)2) 0.176±0.0151)2) 61.4±4.21)2) 28.4±1.91)2)与假手术组比较,1)P＜0.05;与模型组比较,2)P＜0.05;与西药对照组比较,3)P＜0.05

2.2 各组大鼠心肌组织病理形态变化 各治疗组较模型组左心室心肌细胞肌纤维断裂、溶解、炎性细胞浸润减轻、排列较整齐,横纹略模糊。光镜下各组大鼠心肌病理改变:假手术组肌纤维呈圆形或不规则形,大小近似,排列有序,横纹清晰。模型组心肌细胞明显肿胀,部分心肌纤维断裂、溶解,横纹消失,胞浆空泡样变,心肌间质水肿,可见炎性细胞浸润。中药中剂量组个别部位心肌细胞肿胀、横纹略模糊,少量炎性细胞浸润。中药低、高剂量,中西药阳性对照组均可见心肌细胞肿胀,横纹模糊,心肌间质轻度水肿,可见炎性细胞浸润。

3 讨 论

心力衰竭中医病机为心气虚-阳虚-血瘀-水停。心衰病因病机为气虚血瘀、阳虚水泛、水血同病,其中阳虚水泛是其病机关键,其证候实质多为本虚标实。临床以此为依据,立益气温阳、活血利水为大法,应用自拟益气强心饮治疗心衰,主要组方为红参、制附子、黄芪、葶苈子、泽兰、丹参、红花等,共具益气温阳、强心、活血利水之功,使补虚不留邪,气充血行,标本并治。应用于临床多年,使用人次达到万人以上,取得了良好的临床疗效。

本实验显示,益气强心饮能明显改善CHF大鼠的心功能,改善慢性心衰大鼠心肌细胞的病理变化。可见中药治疗慢性心衰有着广阔的前景,具有深远而重大的社会效益和经济效益。这为中医药治疗CHF提供了微观上的理论依据,也为进一步研发治疗CHF的新药提供了崭新的思路。

[1]HoK K,Pinsky JL,Kannel WB,et al.The epidemiology of heart failure:The Framingham study[J].J Am Coll Cardiol,1993,22(suppl A):6A-13A.