HPLC法测定解毒通窍丸中欧前胡素的含量

2010-09-11四川泸州市食品药品检验所泸州市646000

中国药房 2010年3期

陈珂，邝明，易蓉，陈菊（四川泸州市食品药品检验所，泸州市 646000）

解毒通窍丸是由白芷、全蝎、桔梗、连翘等中药材组成的复方制剂。白芷为方中主药，具有通窍止痛、散风除湿、消肿排脓等功能[1]。白芷含挥发油及多种香豆精衍生物，后者是白芷止痛的主要成分。欧前胡素是白芷中的一种香豆精衍生物，是白芷的特征成分[2]。由于解毒通窍丸目前的质量标准中没有收载含量测定方法，因此笔者采用高效液相色谱（HPLC）法对该制剂中欧前胡素进行含量测定，且证明方法简便、准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。

1 材料

1.1 仪器

1200型HPLC仪（美国Agilent公司）；AE240型电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；MJ600型超声波仪（无锡市美洁超声设备有限公司）。

1.2 试药

欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110826-200712）；甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯；解毒通窍丸（泸州市建平医院制备，批号：070228、070215、070201）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Waters Symmetryshielb C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（65∶35）；检测波长：248 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱温：室温。理论塔板数按欧前胡素计算应不低于3 000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液：称取经五氧化二磷减压干燥12 h的欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.02 mg的溶液，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液：取本品约2 g，精密称定，置于50 mL量瓶中，加甲醇40 mL，超声处理（功率300 W，频率50 kHz）40 min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液：取不含白芷的阴性样品，按“2.2.2”项下方法制备阴性对照溶液。

2.3 测定方法

分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.4 阴性对照试验

取上述对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液适量，按“2.1”项下色谱条件测定。结果，阴性对照溶液在欧前胡素峰位置处无峰出现，表明阴性对照对测定无干扰。色谱图见图1。

2.5 线性关系考察

精密吸取欧前胡素对照品溶液（0.015 g·L-1）1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 μL，分别注入液相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件进行测定。以峰面积积分值（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，制备标准曲线，得回归方程为Y＝2 694 960X+6 554（r＝0.999 7）。结果表明，欧前胡素进样量在0.15～1.35 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。