祛斑养颜丸的薄层色谱定性鉴别研究

李全有

祛斑养颜丸是我院自制制剂(豫药制字 Z05050039),临床应用时间久,疗效稳定确切。主要由当归、熟地、川穹、女贞子、枸杞子、墨旱莲、红花、丹参、白芷、地黄、黄芩等组成,经粉碎泛丸而成的纯中药制剂,具有活血祛瘀、滋肾养肝功效,主要用于面部色素沉淀(蝴蝶斑)为了保证制剂的质量和临床疗效,采用薄层色谱法对制剂中的当归、白芷进行定性鉴别分析。结果表明,当归、白芷都具有明显的特征斑点,且斑点清晰。其结果简便、快速,为祛斑养颜丸的质量标准提供了定性的检测方法。

1 实验材料与制备

1.1 祛斑养颜丸(安阳市中医院自制制剂)三批,对照药材当归、白芷(符合中国药典质量标准),所用试剂乙醚、乙酸乙酯、苯、石油醚、醋酸乙酯等试剂均为分析纯,硅胶 G(青岛海洋化工厂产品)。

2 处方与制备

2.1 处方 当归、熟地、川穹、女贞子、枸杞子、墨旱莲、红花、丹参、白芷、地黄、黄芩等。

2.2 制备 取上方药品,按生产工艺粉碎,泛丸,干燥,打光即得。本品为棕褐色水丸,味微苦。

图1 祛斑养颜丸当归的鉴别薄层层析

3 定性鉴别

薄层板的制备 硅胶 G和 0.5%羧甲基纤维素钠溶液、0.4%NaOH溶液以 1:2:1的比例于研钵中充分研匀,均匀涂布于 5 cm×20 cm玻璃板上,厚约 0.5mm,室温晾干后,经110℃活化 60min,置于干燥器内,备用。

3.1 当归的鉴别 供试品溶液的制备称取祛斑养颜丸 2 g,研细,加乙醇 20 ml,超声处理 15min,过滤,滤液浓缩至约 1 ml,作为供试品溶液。当归对照药材液的制备取当归对照药材粉末 1g,按供试品液同法制备。阴性对照液的制备按处方量自制缺当归的阴性对照样品,称取本品 2 g,按供试品液同法制备。薄层层析按薄层色谱法试验[1],吸取当归对照药材液 4μl,供试品液和阴性对照液各 10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-醋酸乙酯(19:1)为展开剂,上行展开 18 cm取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视[2]。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上显三个相同的亮蓝白色荧光斑点,而缺当归的阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。

3.2 白芷的鉴别[1]取本品 4 g,研细,加甲醇 10ml,浸泡lh,时时振摇,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯 1ml使溶解,作为供试品。按制剂处方比例与工艺,除去白芷,按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。另取白芷药材约 1g,同法制成对照药材溶液。吸取上述 3种溶液各 8μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以石油醚-乙醚(3∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置于紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照色谱无干扰。结果见图 2。

图2 祛斑养颜丸白芷的鉴别薄层层析

4 讨论

当归醇溶性成分有香荚兰酸(vanillieaeid)、阿魏酸(feru lieaeid)、6-甲氧基-7-羟基香豆精;脂溶性成分蒿苯内酯、十四醇-1、棕桐酸、新当归内酯(Angellicide)等,分子色谱分析当归的活性成分蒿本内酯和阿魏酸[3,4]。白芷饱和烃类含量最高,在挥发油中约占 36.33%(如甲基-环癸烷 22.4%,环十二碳烷 4.69%,环十四碳烷 4.17%等);其次为醇类,在挥发油中占 29.79%(如1-十二烷醇 8.6%,十三烷醇 5.53%,1-十四烷醇 5.10%等);以及各种不饱和烃类,在挥发油中占 16.2%,三者之和占总挥发油的82.32%。此外,还有少量的醛、酮、酯以及苯的衍生物等,欧前胡素、异欧前胡素和水合氧化前胡素是白芷中的主要成分,作为对照品可以鉴定白芷。我院生产的祛斑养颜丸采用道地药材,恪守传统炮制方法,疗效确切。随着时代发展,传统的检验方法不能满足定性定量的要求,薄层色谱法是定性分析少量物质的一种很重要的实验技术。用方中当归、白芷进行了化学成分定性鉴别。经试验证明,本文所建立的当归、白芷薄层层析条件,分离效果较好,方法简便易行,结果准确可靠,重复性和可鉴别性良好 ,从而可为祛斑养颜丸的质量控制提供科学依据。

[1]中国药典,2005:一部,附录.

[2]马琳,徐丽.接骨片的质量控制研究.药学实践杂志,2000,18(5):307-308.

[3]孔亮,邹汉法.以血清白蛋白为固定相的分子生物色谱分析几种中药活性成分的研究.高等学校化学学报,2000,21(1):36-40.

[4]HailinWang,lingKong,HallfaZou,Screening and Analysis of Biologieally Aotive Compound in Angelica sinenssby Molecular Binchromatography,Chromatographia,1999,50:7-8.