RP-HPLC测定盐酸安非他酮中间氯苯甲酸杂质的含量

厉凤英，朱鹏，史向红，余珍艳，王鸿

（1.浙江普洛家园药业有限公司，浙江东阳322118；2.浙江工业大学药学院，浙江杭州310014）

RP-HPLC测定盐酸安非他酮中间氯苯甲酸杂质的含量

厉凤英1,2，朱鹏1，史向红1，余珍艳1，王鸿2

（1.浙江普洛家园药业有限公司，浙江东阳322118；2.浙江工业大学药学院，浙江杭州310014）

建立了一个测定抗抑郁药盐酸安非他酮中间氯苯甲酸杂质的高效液相色谱方法，该方法准确、灵敏、精密度高，可用于抗抑郁药盐酸安非他酮中间氯苯甲酸杂质的含量测定。关键词：反相高效液相色谱法；盐酸安非他酮；间氯苯甲酸；含量测定

盐酸安非他酮（Bupropion Hydrochloride）是一种新型的抗抑郁药[1，2]，生产中间氯苯甲酸会被带到产品中，盐酸安非他酮降解也会产生间氯苯甲酸。美国药典（USP）中用TLC方法来控制间氯苯甲酸杂质[3]，而采用高效液相色谱法检测间氯苯甲酸杂质还未见报道。为了更好的控制该杂质来评价盐酸安非他酮的产品质量，本文建立了盐酸安非他酮中间氯苯甲酸杂质含量测定的液相方法，该方法满足ICH[4]中关于分析方法验证的要求。

1 实验部分

1.1 仪器与试药

Agilent1100（四元泵、柱温箱、脱气机、自动进样器、紫外检测器）。

乙腈（GC）；三氟乙酸（GC）；超纯水；间氯苯甲酸对照品（默克公司，批号为S）；盐酸安非他酮对照品（美国药典（USP）标化的对照品，批号为W）；盐酸安非他酮样品（批号：1、2、3）。

1.2 实验方法

1.2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAXSB-C18（4.6×250mm，5μm）（安捷伦公司）；流动相：水-乙腈-三氟乙酸（65∶35∶0.1）；检测波长：235nm；流速：1.0mL· min-1；柱温：25℃；进样量：20μL；运行时间：30min。

1.2.2 溶液配制

1.2.2.1 系统适应性溶液精密称取50mg盐酸安非他酮工作对照品于50mL容量瓶中，用适量流动相溶解后，加0.50mL的400μg·mL-1间氯苯甲酸储备液，并用流动相稀释至刻度，摇匀。

1.2.2.2 间氯苯甲酸对照溶液配制4μg·mL-1的间氯苯甲酸对照液，此溶液为间氯苯甲酸的100%溶液。

1.2.2.3 供试液精密称取20mg盐酸安非他酮样品于10mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

2 结果与分析

2.1 系统适应性实验

照“1.2.1”项下的色谱条件注入高效液相色谱仪一次，其具体数据见表1。

表1 系统适应性数据Tab.1Data of system suitability

由表1可知，结果表明符合盐酸安非他酮与间氯苯甲酸分离度应不小于10，间氯苯甲酸相对保留时间约为2.05的要求。

2.2 精密度

取“1.2.2.2”项下的间氯苯甲酸对照溶液注入高效液相色谱仪，连续测定6次，计算主峰峰面积的RSD应不大于2%。测得的数据见表2。结果表明符合要求。

表2 精密度数据Tab.2Data of RSD

2.3 定量限（LOQ）和检测限（LOD）

将间氯苯甲酸逐步稀释成一定浓度，直至S/ N=10，连续进6针，记下该浓度，计算定量限（LOQ），再换算检测限（LOD），得到的数据见表3。

表3 定量限和检测限数据Tab.3Data of LOQ and LOD

表3结果表明，该方法的定量限为1.60ng；检测限0.48ng。

2.4 线性实验

分别精密称取间氯苯甲酸适量，用流动相配制成LOQ、25%、50%、100%、200%的溶液，各进3针，其相关数据见表4。结果表明，间氯苯甲酸在LOQ～200%的范围内，相关系数R为1.000，有良好的线性。

表4 线性实验数据Tab.4Data of linear experiment

2.5 准确度

分别精密称取间氯苯甲酸适量，用流动相配制成50%、100%、200%的溶液，分别进样3针，分别计算回收率，得到的数据见表5。

表5 回收率实验数据Tab.5Data of recovery experiment

表5结果表明，符合回收率应在98%～102%之间的要求。

3 结论

取“1.2.2.3”项下3个批次的盐酸安非它酮样品的供试液，照“1.2.1”项下的色谱条件得到的检测结果与TLC方法的检测结果进行对比，其数据见表7。

表7 三批样品的含量Tab.7The assay of three lots of samples

表7结果表明，RP-HPLC方法较TLC方法更灵敏。并且分析方法的确认结果表明该方法能够有效的进行盐酸安非它酮中间氯苯甲酸杂质的检测。

参考文献

［1］Settle EC Jr.Bupropion sustained release:side effect profile［J］.J. Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:32-36.

［2］Goldstein MG.Bupropion sustained release and smoking cessation［J］.J.Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:66-72.

［3］美国药典［S］.2005年版，2005.1721.

［4］ICH三方协调指南汇编，（第一版）［M］.2000.76.

Determination of m-chlorobenzoic acid in bupropion hydrochloride by RP-HPLC

LI Feng-ying1，2，ZHU Peng1，SHI Xiang-hong1，YU Zhen-yan1，WANG Hong2
（1.Apela Jiayuan Pharmaceutical Co.,Doyang 322118,China; 2.College of Pharmaly,Zhejiang University of Techology,Hangzhou 310014,China）

A RP-HPLC method for the determination of m-chlorobenzoic acid in the antidepressant of bupropion hydrochloride was estab lised.The method was proved to be accurate,sensitive and precise.It can be applied for the content assay of m-chlorobenzoic acid in the bupropion hydrochloride.

RP-HPLC；bupropion hydrochloride;m-chlorobenzoic acid；assay

book=2010,ebook=231

1002-1124（2010）11-0027-03

2010-09-26

厉凤英（1969-）女，浙江东阳人，浙江普洛家园药业有限公司质量经理，工程师，浙江工业大学在读工程硕士，研究方向：药物分析。

O657.7

A